Microscopia– um conjunto de métodos para estudar objetos usando microscópios. O mais importante na microscopia é ver claramente o contorno dos objetos, o que permite identificá-los corretamente. Existem vários métodos diferentes de microcópia.
Método de campo claro– mais comum em microscopia. Um feixe de luz, passando pelas zonas não absorventes do fármaco, produz um campo uniformemente iluminado. Um objeto na parte visível do espectro absorve luz, obtendo assim uma imagem contrastante desse objeto. Freqüentemente, na microscopia, vários corantes são usados para destacar certos objetos.
Método de campo escuro– em um microscópio de campo escuro, as heterogeneidades na amostra dispersam a luz, e essa luz espalhada forma uma imagem da amostra em estudo. Usado no estudo em maior medida para estudar objetos opacos. O objeto brilha devido à dispersão da luz. Para microscopia utilizando este método, é necessário ter um condensador de campo escuro.
Microscopia de contraste de fase O método de contraste de fase fornece contraste às estruturas não pintadas estudadas devido a um diafragma anular especial colocado no condensador e à chamada placa de fase localizada na lente. Este design da óptica do microscópio torna possível converter mudanças de fase da luz que passa através de uma amostra não corada e que não são percebidas pelo olho em uma mudança em sua amplitude, ou seja, brilho da imagem resultante.
Microscopia de interferência As variedades de microscópio de contraste de fase são um microscópio de interferência, projetado para quantificar a massa do tecido, e um microscópio de interferência diferencial (com óptica Nomarski), que é usado especificamente para estudar o relevo da superfície de células e outros objetos biológicos.
Microscopia de polarização. Um microscópio polarizador é uma modificação de um microscópio óptico no qual dois filtros polarizadores são instalados - o primeiro (polarizador) entre o feixe de luz e o objeto, e o segundo (analisador) entre a lente objetiva e o olho. Pelo primeiro filtro a luz passa em apenas uma direção, o segundo filtro possui um eixo principal perpendicular ao primeiro filtro e não transmite luz. Isso produz um efeito de campo escuro. Ambos os filtros podem girar, alterando a direção do feixe de luz.
Microscópio eletrônico. Um grande passo no desenvolvimento da tecnologia de microscopia foi a criação e uso de microscópio eletrônico(ver Fig. 1, B). Um microscópio eletrônico usa um fluxo de elétrons com comprimentos de onda mais curtos do que um microscópio óptico. A uma tensão de 50.000 V, o comprimento de onda das oscilações eletromagnéticas que surgem quando um fluxo de elétrons se move no vácuo é de 0,0056 nm. É teoricamente calculado que a distância resolvida sob estas condições pode ser de cerca de 0,002 nm, ou 0,000002 µm, ou seja, 100.000 vezes menos do que em um microscópio óptico. Na prática, nos microscópios eletrônicos modernos, a distância resolvida é de cerca de 0,1-0,7 nm.
Microscopia de raios X- Para estudar a estrutura das macromoléculas em nível atômico, são utilizados métodos que utilizam raios X com comprimento de onda de cerca de 0,1 nm (o diâmetro de um átomo de hidrogênio). Moléculas que se formam estrutura de cristal, são estudados por meio de padrões de difração, que são registrados em uma chapa fotográfica na forma de vários pontos de intensidade variável. A intensidade dos pontos depende da capacidade de vários objetos na matriz de espalhar a radiação. A posição dos pontos no padrão de difração depende da posição do objeto no sistema, e sua intensidade indica sua estrutura atômica interna.
Métodos de pesquisa microscópica- formas de estudar vários objetos usando um microscópio. Na biologia e na medicina, esses métodos permitem estudar a estrutura de objetos microscópicos cujas dimensões vão além da resolução do olho humano. A base do M.m.i. consiste em microscopia óptica e eletrônica. Na prática e atividade científica médicos de diversas especialidades - virologistas, microbiologistas, citologistas, morfologistas, hematologistas, etc., além da microscopia de luz convencional, utilizam microscopia de contraste de fase, interferência, luminescência, polarização, estereoscópica, ultravioleta, infravermelha. Esses métodos são baseados em diferentes propriedades da luz. Na microscopia eletrônica, as imagens dos objetos em estudo surgem devido a um fluxo direcionado de elétrons.
Para microscopia óptica e outros M.M.Is baseados nele. determinação do valor além da resolução microscópio possui o caráter e a direção do feixe de luz, bem como as características do objeto em estudo, que pode ser transparente ou opaco. Dependendo das propriedades do objeto, as propriedades físicas da luz mudam - sua cor e brilho associados ao comprimento de onda e amplitude, fase, plano e direção de propagação da onda. Vários MMIs são baseados no uso dessas propriedades da luz. Para microscopia óptica, os objetos biológicos são geralmente corados para revelar algumas de suas propriedades ( arroz. 1 ). Neste caso, os tecidos devem ser fixados, pois a coloração revela certas estruturas apenas em células mortas. Em uma célula viva, o corante é isolado no citoplasma na forma de vacúolo e não mancha sua estrutura. No entanto, um microscópio óptico também pode estudar objetos biológicos vivos usando o método da microscopia vital. Neste caso, é utilizado um condensador de campo escuro, embutido no microscópio.
A microscopia de contraste de fase também é usada para estudar objetos biológicos vivos e não manchados. Baseia-se na difração de um feixe de luz dependendo das características do objeto de radiação. Neste caso, o comprimento e a fase da onda de luz mudam. A lente de um microscópio especial de contraste de fase contém uma placa de fase translúcida. Objetos microscópicos vivos ou microrganismos e células fixos, mas não coloridos, devido à sua transparência, praticamente não alteram a amplitude e a cor do feixe de luz que os atravessa. causando apenas uma mudança de fase de sua onda. Porém, após passar pelo objeto em estudo, os raios de luz são desviados da placa de fase translúcida. Como resultado, surge uma diferença de comprimento de onda entre os raios que passam pelo objeto e os raios da luz de fundo. Se essa diferença for de pelo menos 1/4 do comprimento de onda, surge um efeito visual no qual um objeto escuro é claramente visível contra um fundo claro ou vice-versa, dependendo das características da placa de fase.
A microscopia de interferência resolve os mesmos problemas que a microscopia de contraste de fase. Mas se este último permite observar apenas os contornos dos objetos de estudo, então com a ajuda da microscopia de interferência é possível estudar os detalhes de um objeto transparente e realizar sua análise quantitativa. Isso é conseguido dividindo o feixe de luz em um microscópio: um dos raios passa pela partícula do objeto observado e o outro passa por ela. Na ocular do microscópio, ambos os feixes estão conectados e interferem um no outro. A diferença de fase resultante pode ser medida determinando-a. muitas estruturas celulares diferentes. A medição consistente da diferença de fase da luz com índices de refração conhecidos permite determinar a espessura de objetos vivos e tecidos não fixos, a concentração de água e matéria seca neles, o conteúdo de proteínas, etc. Com base nos dados da microscopia de interferência, pode-se julgar indiretamente a permeabilidade das membranas, a atividade enzimática e o metabolismo celular dos objetos de estudo.
A microscopia de polarização permite estudar objetos de estudo em luz formada por dois feixes polarizados em planos perpendiculares entre si, ou seja, em luz polarizada. Para isso, utilizam-se polaróides de filme ou prismas de Nicolas, que são colocados em um microscópio entre a fonte de luz e o preparo. A polarização muda à medida que os raios de luz passam (ou refletem) através de diferentes componentes estruturais células e tecidos cujas propriedades são heterogêneas. Nas chamadas estruturas isotrópicas, a velocidade de propagação da luz polarizada não depende do plano de polarização, nas estruturas anisotrópicas a velocidade de sua propagação varia dependendo da direção da luz ao longo do eixo longitudinal ou transversal do objeto. Se o índice de refração da luz ao longo da estrutura for maior,
do que na direção transversal, ocorre birrefringência positiva; com a relação oposta, ocorre birrefringência negativa. Muitos objetos biológicos têm orientação molecular estrita, são anisotrópicos e exibem birrefringência de luz positiva. Tais propriedades possuem miofibrilas, cílios do epitélio ciliado, neurofibrilas, fibras de colágeno, etc.. A comparação da natureza da refração dos raios de luz polarizados e a magnitude da anisotropia de um objeto permite julgar a organização molecular de sua estrutura ( arroz. 2 ). A microscopia de polarização é uma das métodos de pesquisa histológica, caminho diagnóstico microbiológico, encontra aplicação em estudos citológicos etc. Neste caso, tanto as chamadas preparações nativas de secções de tecido coradas como as não coradas e não fixadas podem ser examinadas em luz polarizada.A microscopia fluorescente é amplamente utilizada. Baseia-se na propriedade de algumas substâncias de produzir brilho - luminescência nos raios UV ou na parte azul-violeta do espectro. Muitas substâncias biológicas, como proteínas simples, coenzimas, algumas vitaminas e medicação, têm sua própria luminescência (primária). Outras substâncias começam a brilhar somente quando corantes especiais são adicionados a elas - fluorocromos (luminescência secundária). Os fluorocromos podem ser distribuídos difusamente em uma célula ou corar seletivamente estruturas celulares individuais ou certos compostos químicos de um objeto biológico. Esta é a base para o uso da microscopia fluorescente em estudos citológicos e histoquímicos (ver. Métodos de pesquisa histoquímica ). Usando a imunofluorescência em um microscópio fluorescente, os antígenos virais e sua concentração nas células são detectados, os vírus são identificados, os antígenos e anticorpos, os hormônios, vários produtos metabólicos, etc. ( arroz. 3 ). Nesse sentido, a microscopia fluorescente é utilizada no diagnóstico laboratorial de infecções como virais, etc., utilizada no diagnóstico rápido de infecções virais respiratórias, no exame de impressões da mucosa nasal dos pacientes e no diagnóstico diferencial de diversas infecções. Na patomorfologia utilizando microscopia fluorescente os tumores malignos são reconhecidos em preparações histológicas e citológicas
determinar áreas de isquemia do músculo cardíaco durante estágios iniciais infarto do miocárdio, detectar amiloide em biópsias de tecidos, etc.A microscopia ultravioleta é baseada na capacidade de certas substâncias que fazem parte de células vivas, microrganismos ou tecidos transparentes fixos, mas não coloridos, de absorver a radiação UV com um determinado comprimento de onda (400-250 nm). Esta propriedade é possuída por compostos de alto peso molecular, como ácidos nucléicos, proteínas, ácidos aromáticos (tirosina, triptofano, metilalânio), bases purinas e piramidais, etc. o caso do estudo de objetos vivos, suas mudanças no processo da vida.
A microscopia infravermelha permite examinar objetos opacos à luz visível e à radiação UV, absorvendo luz com comprimento de onda de 750-1200 por suas estruturas. nm. A microscopia infravermelha não requer tratamento químico preliminar das preparações. Este tipo de M.m.i. mais frequentemente usado em zoologia, antropologia e outros ramos da biologia. Na medicina, a microscopia infravermelha é usada principalmente em neuromorfologia e oftalmologia.
A microscopia estereoscópica é usada para estudar objetos tridimensionais. O design dos microscópios estereoscópicos permite ver o objeto de estudo com os olhos direito e esquerdo de diferentes ângulos. Eles examinam objetos opacos com uma ampliação relativamente baixa (até 120 vezes). A microscopia estereoscópica é usada em microcirurgia, em patomorfologia com estudo especial de biópsia, material cirúrgico e seccional, em pesquisas laboratoriais forenses.
A microscopia eletrônica é usada para estudar a estrutura das células, tecidos de microrganismos e vírus nos níveis subcelular e macromolecular. Este M.m.i. permitiu-nos passar para um nível qualitativamente novo de estudo da matéria. Encontrou ampla aplicação em morfologia, microbiologia, virologia, bioquímica, oncologia, genética, imunologia.Um aumento acentuado na resolução do microscópio eletrônico é garantido pelo fluxo de elétrons que passam no vácuo através de campos eletromagnéticos criados por lentes eletromagnéticas. Os elétrons podem passar pelas estruturas do objeto em estudo (microscopia eletrônica de transmissão) ou ser refletidos a partir delas (microscopia eletrônica de varredura),
A pesquisa realizada com microscópio permite obter o máximo de informações sobre o objeto em estudo, pois com a ajuda deste instrumento é possível obter a imagem mais nítida do material em estudo. O microscópio utilizado para este método de obtenção de informação é um equipamento com amplas capacidades, é utilizado para diversos fins, enquanto a qualidade da informação obtida é a mais elevada possível. A microscopia, como método de investigação, tem sido amplamente utilizada, mas este tipo de obtenção de informação é mais importante na medicina, onde a informação obtida permite combater eficazmente as doenças mais perigosas para o homem e compilar esquemas eficazes efeitos terapêuticos.
Hoje, são usados microscópios de potência e design variados, proporcionando bons resultados de pesquisa. Diferentes modelos desses dispositivos podem ser usados para finalidades diferentes.
Aparecendo em em um sentido geral Um dos métodos de pesquisa mais informativos, a microscopia consiste em um exame detalhado de uma amostra de tecido com múltiplas ampliações. Isso permite identificar a estrutura do tecido, seus distúrbios e os processos que ocorrem em um organismo vivo.
Usando um microscópio, é possível registrar as alterações que ocorrem nos tecidos, o que permite determinar os processos patológicos e o grau de impacto do tratamento. Hoje, existem vários tipos desse procedimento de pesquisa, que têm objetivos ligeiramente diferentes e são realizados de forma adequada.
Dispositivo para microscopia (foto)
Usando microscópios de potência e design variados, os médicos têm a oportunidade de realizar os estudos mais versáteis. Existe uma certa classificação de tipos de microscopia, que é determinada por diferentes abordagens de pesquisa.
Os seguintes tipos de exame microscópico são diferenciados:
Todos os tipos de pesquisa fornecem as informações mais completas.
O vídeo abaixo lhe dirá o que é microscopia:
A utilização de um algoritmo específico de ações que determina um alto resultado é determinada pelo método escolhido de condução da pesquisa utilizando um microscópio de qualquer tipo e desenho. Foi desenvolvido uma vez, e a alta precisão, bem como o conteúdo informativo dos dados obtidos, determinaram sua utilização constante na realização deste tipo de pesquisa.
Usando a microscopia, você pode identificar, entre outras coisas, doenças como:
Microscopia óptica, fluorescente, de luz, eletrônica e outros tipos (métodos) são descritos abaixo.
O método mais comum usado em microscopia é o tipo de luz desse tipo de pesquisa. Suas principais características são as seguintes:
A microscopia de luz utiliza uma combinação de diversos efeitos ópticos, o que garante a mais completa aquisição de informações sobre o objeto em estudo.
A microscopia de luz possui diversas variedades que diferem na localização e extensão do feixe de luz, na direção e na intensidade da luz. Métodos luminescentes, ultravioleta, infravermelho, contraste, campos escuros e claros - todos esses tipos de pesquisa de luz de tecidos são usados no estudo da estrutura dos tecidos e dos processos dentro deles.
A viabilidade de utilização de tal dispositivo na medicina, há muito conhecido como microscópio, é cientificamente fundamentada e muito promissora. Afinal, o constante aprimoramento desta ferramenta para a realização de diversos diagnósticos nos permite estudar cada vez mais a fundo a célula de um organismo vivo, que é o material mais informativo para se ter uma ideia do estado de saúde e das perspectivas. para efeitos terapêuticos.
Os seguintes métodos usando microscopia são considerados os mais informativos:
Cada um dos métodos de exame microscópico listados é um conjunto de determinadas ações que revelam a estrutura das células do material em estudo, os processos no interior das células e, com base nos dados obtidos, permitem fazer previsões e traçar tratamento regimes.
O vídeo abaixo mostra como a microscopia de máscara é realizada:
Sendo a urina o produto final dos rins, o seu estudo permite-nos obter o quadro mais completo tanto do funcionamento destes órgãos como dos processos que neles ocorrem. As células da urina permitem determinar a presença de processos inflamatórios em curso nos rins, a presença de infecções, fungos e outras microfloras perigosas para a saúde.
A urina também é avaliada por indicadores como transparência, cor, presença de sedimentos e reatividade. Além do funcionamento dos rins, a urina contém informações sobre condição geral corpo e sangue. Com a ajuda da microscopia de urina, outros são revelados.
O estudo das células de amostras de sangue ao microscópio permite que os especialistas tenham uma ideia dos processos atuais no corpo. Isso se torna possível graças à análise da composição das células, pois em condições normais e de boa saúde elas contêm um certo número de componentes diferentes que desempenham uma determinada função: os leucócitos são projetados para combater as células infecciosas que penetram no corpo, os glóbulos vermelhos enriquecem tudo órgãos internos oxigênio. E quando sua quantidade muda, podemos tirar uma conclusão sobre as mudanças que ocorrem no corpo.
Por meio de um exame microscópico, é possível determinar a eficácia do tratamento medicamentoso realizado. A seguir descreve-se a microscopia de esfregaços urogenitais e outros tipos de esfregaços.
Um esfregaço de sangue, que também fornece uma quantidade significativa de informações, permite determinar com maior precisão todos os processos patológicos presentes no corpo e o grau de sua negligência. Afinal, o sangue, sendo um dos mais ambientes importantes nosso corpo, contém informações completas sobre ele.
Usando um esfregaço de sangue, a microscopia revela processos como o grau de coagulação do sangue e a maturidade dos leucócitos nele contidos. E isso permite ter uma visão mais completa do tratamento que está sendo realizado, assim como da quimioterapia e do tratamento a laser.
Os principais parâmetros do microscópio para microscopia de esfregaço, análise de urina, fezes, escarro sanguíneo e interpretação dos resultados são descritos a seguir.
O uso de um microscópio em medicina e biologia é mais justificado. A grande quantidade de informação obtida com a sua ajuda e a relativa facilidade de utilização permitem obter a imagem mais informativa. As características mais indicativas de qualquer microscópio devem ser consideradas resolução e contraste, que proporcionam clareza de imagem e conteúdo de informação.
A importância de um método de pesquisa de tecidos como a microscopia não pode ser superestimada. Suas capacidades permitem identificar alterações estruturais nos tecidos celulares que podem causar várias doenças. Os estudos microscópicos também fornecem material para que os especialistas analisem o tratamento realizado e sua eficácia.
Vários métodos de exame microscópico permitem criar o quadro mais completo do estado de saúde e dos processos atuais do corpo e prevenir a probabilidade de recaídas de doenças.
A microscopia eletrônica de varredura é discutida neste vídeo:
Métodos de pesquisa microscópica- formas de estudar vários objetos usando um microscópio. Na biologia e na medicina, esses métodos permitem estudar a estrutura de objetos microscópicos cujas dimensões vão além da resolução do olho humano. A base é a microscopia óptica e eletrônica. Nas atividades práticas e científicas, médicos de diversas especialidades - virologistas, microbiologistas, citologistas, morfologistas, hematologistas, etc., além da microscopia de luz convencional, utilizam microscopia de contraste de fase, interferência, luminescência, polarização, estereoscópica, ultravioleta, infravermelha. Esses métodos são baseados em diferentes propriedades da luz. Na microscopia eletrônica, as imagens dos objetos em estudo surgem devido a um fluxo direcionado de elétrons.
Para microscopia óptica e outros baseados nela métodos de pesquisa microscópica determinação do valor além da resolução microscópio possui o caráter e a direção do feixe de luz, bem como as características do objeto em estudo, que pode ser transparente ou opaco. Dependendo das propriedades do objeto, as propriedades físicas da luz mudam - sua cor e brilho associados ao comprimento de onda e amplitude, fase, plano e direção de propagação da onda. Com base no uso dessas propriedades da luz, vários métodos de pesquisa microscópica. Para microscopia óptica, os objetos biológicos são geralmente corados para revelar algumas de suas propriedades ( arroz. 1 ). Neste caso, os tecidos devem ser fixados, pois a coloração revela certas estruturas apenas em células mortas. Em uma célula viva, o corante é isolado no citoplasma na forma de vacúolo e não mancha sua estrutura. No entanto, um microscópio óptico também pode estudar objetos biológicos vivos usando o método da microscopia vital. Neste caso, é utilizado um condensador de campo escuro, embutido no microscópio.
A microscopia de contraste de fase também é usada para estudar objetos biológicos vivos e não manchados. Baseia-se na difração de um feixe de luz dependendo das características do objeto de radiação. Neste caso, o comprimento e a fase da onda de luz mudam. A lente de um microscópio especial de contraste de fase contém uma placa de fase translúcida. Objetos microscópicos vivos ou microrganismos e células fixos, mas não coloridos, devido à sua transparência, praticamente não alteram a amplitude e a cor do feixe de luz que os atravessa. causando apenas uma mudança de fase de sua onda. Porém, após passar pelo objeto em estudo, os raios de luz são desviados da placa de fase translúcida. Como resultado, surge uma diferença de comprimento de onda entre os raios que passam pelo objeto e os raios da luz de fundo. Se essa diferença for de pelo menos 1/4 do comprimento de onda, surge um efeito visual no qual um objeto escuro é claramente visível contra um fundo claro ou vice-versa, dependendo das características da placa de fase.
A microscopia de interferência resolve os mesmos problemas que a microscopia de contraste de fase. Mas se este último permite observar apenas os contornos dos objetos de estudo, então com a ajuda da microscopia de interferência é possível estudar os detalhes de um objeto transparente e realizar sua análise quantitativa. Isso é conseguido dividindo o feixe de luz em um microscópio: um dos raios passa pela partícula do objeto observado e o outro passa por ela. Na ocular do microscópio, ambos os feixes estão conectados e interferem um no outro. A diferença de fase resultante pode ser medida determinando-a. muitas estruturas celulares diferentes. A medição consistente da diferença de fase da luz com índices de refração conhecidos permite determinar a espessura de objetos vivos e tecidos não fixos, a concentração de água e matéria seca neles, o conteúdo de proteínas, etc. Com base nos dados da microscopia de interferência, pode-se julgar indiretamente a permeabilidade das membranas, a atividade enzimática e o metabolismo celular dos objetos de estudo.
A microscopia de polarização permite estudar objetos de estudo em luz formada por dois feixes polarizados em planos perpendiculares entre si, ou seja, em luz polarizada. Para isso, utilizam-se polaróides de filme ou prismas de Nicolas, que são colocados em um microscópio entre a fonte de luz e o preparo. A polarização muda à medida que os raios de luz passam (ou refletem) através de vários componentes estruturais de células e tecidos, cujas propriedades são heterogêneas. Nas chamadas estruturas isotrópicas, a velocidade de propagação da luz polarizada não depende do plano de polarização, nas estruturas anisotrópicas a velocidade de sua propagação varia dependendo da direção da luz ao longo do eixo longitudinal ou transversal do objeto. Se o índice de refração da luz ao longo da estrutura for maior do que na direção transversal, ocorre birrefringência positiva; na relação oposta, ocorre birrefringência negativa. Muitos objetos biológicos têm orientação molecular estrita, são anisotrópicos e exibem birrefringência de luz positiva. Tais propriedades possuem miofibrilas, cílios do epitélio ciliado, neurofibrilas, fibras de colágeno, etc.. A comparação da natureza da refração dos raios de luz polarizados e a magnitude da anisotropia de um objeto nos permite julgar a organização molecular de sua estrutura ( arroz. 2 ). A microscopia de polarização é uma das métodos de pesquisa histológica, caminho diagnóstico microbiológico, encontra aplicação em estudos citológicos etc. Neste caso, tanto as chamadas preparações nativas de secções de tecido coradas como as não coradas e não fixadas podem ser examinadas em luz polarizada.
A microscopia fluorescente é amplamente utilizada. Baseia-se na propriedade de algumas substâncias de produzir brilho - luminescência nos raios UV ou na parte azul-violeta do espectro. Muitas substâncias biológicas, como proteínas simples, coenzimas, algumas vitaminas e medicamentos, possuem luminescência própria (primária). Outras substâncias começam a brilhar somente quando corantes especiais são adicionados a elas - fluorocromos (luminescência secundária). Os fluorocromos podem ser distribuídos difusamente em uma célula ou corar seletivamente estruturas celulares individuais ou certos compostos químicos de um objeto biológico. Esta é a base para o uso da microscopia fluorescente em estudos citológicos e histoquímicos (ver. Métodos de pesquisa histoquímica). Usando a imunofluorescência em um microscópio fluorescente, os antígenos virais e sua concentração nas células são detectados, os vírus são identificados, os antígenos e anticorpos, os hormônios, vários produtos metabólicos, etc. ( arroz. 3 ). Nesse sentido, a microscopia fluorescente é utilizada no diagnóstico laboratorial de infecções como herpes, caxumba, hepatites virais, gripe, etc., utilizada no diagnóstico expresso de infecções virais respiratórias, exame de impressões da mucosa nasal dos pacientes e no diagnóstico diferencial de diversas infecções. Na patomorfologia, por meio de microscopia fluorescente, reconhecem tumores malignos em preparações histológicas e citológicas, determinam áreas de isquemia do músculo cardíaco nos estágios iniciais do infarto do miocárdio, detectam amiloide em biópsias de tecidos, etc.
A microscopia ultravioleta é baseada na capacidade de certas substâncias que fazem parte de células vivas, microrganismos ou tecidos transparentes fixos, mas não coloridos, de absorver a radiação UV com um determinado comprimento de onda (400-250 nm). Esta propriedade é possuída por compostos de alto peso molecular, como ácidos nucléicos, proteínas, ácidos aromáticos (tirosina, triptofano, metilalânio), bases purinas e piramidais, etc. o caso do estudo de objetos vivos, suas mudanças no processo da vida.
A microscopia infravermelha permite examinar objetos opacos à luz visível e à radiação UV, absorvendo luz com comprimento de onda de 750-1200 por suas estruturas. nm. A microscopia infravermelha não requer tratamento químico preliminar das preparações. Esse tipo métodos de pesquisa microscópica mais frequentemente usado em zoologia, antropologia e outros ramos da biologia. Na medicina, a microscopia infravermelha é usada principalmente em neuromorfologia e oftalmologia.
A microscopia estereoscópica é usada para estudar objetos tridimensionais. O design dos microscópios estereoscópicos permite ver o objeto de estudo com os olhos direito e esquerdo de diferentes ângulos. Eles examinam objetos opacos com uma ampliação relativamente baixa (até 120 vezes). A microscopia estereoscópica é usada em microcirurgia, em patomorfologia com estudo especial de biópsia, material cirúrgico e seccional, em pesquisas laboratoriais forenses.
A microscopia eletrônica é usada para estudar a estrutura das células, tecidos de microrganismos e vírus nos níveis subcelular e macromolecular. Este M.m.i. permitiu-nos passar para um nível qualitativamente novo de estudo da matéria. Encontrou ampla aplicação em morfologia, microbiologia, virologia, bioquímica, oncologia, genética, imunologia.Um aumento acentuado na resolução do microscópio eletrônico é garantido pelo fluxo de elétrons que passam no vácuo através de campos eletromagnéticos criados por lentes eletromagnéticas. Os elétrons podem passar pelas estruturas do objeto em estudo (microscopia eletrônica de transmissão) ou ser refletidos a partir delas (microscopia eletrônica de varredura), desviando-se em diferentes ângulos, resultando em uma imagem na tela luminescente do microscópio. Com a microscopia eletrônica de transmissão (transmissão), é obtida uma imagem planar de estruturas ( arroz. 4 ), ao digitalizar - volumétrico ( arroz. 5 ). Combinação da microscopia eletrônica com outros métodos, como autorradiografia, histoquímica, métodos de pesquisa imunológica, permite estudos radioautográficos de elétrons, histoquímicos de elétrons e imunológicos de elétrons.
A microscopia eletrônica requer treino especial objetos de pesquisa, em particular fixação química ou física de tecidos e microrganismos. Após a fixação, o material de biópsia e o material seccional são desidratados, despejados em resinas epóxi, cortados com facas de vidro ou diamante em ultratómos especiais, que permitem obter cortes ultrafinos de tecido com espessura de 30-50 nm. Eles são contrastados e depois examinados ao microscópio eletrônico. Em um microscópio eletrônico de varredura (rasterização), a superfície de vários objetos é estudada depositando-se substâncias eletrodensas sobre eles em uma câmara de vácuo, e as chamadas réplicas que seguem os contornos da amostra são examinadas. Veja também
Métodos de pesquisa microscópica são usados para estudar
formas de micróbios, estrutura e definição de células bacterianas
mobilidade bacteriana.
1) Microscopia óptica. Baseia-se na passagem de um feixe de luz através de um sistema de lentes, que garante uma ampliação do objeto de 300 vezes.
2) Microscopia de imersão. Com base no uso
óleo de imersão, cujo poder de refração é igual a
poder de refração do vidro. Devido a isso, os raios de luz não são
estão espalhados, como em um microscópio óptico, mas caem na lente,
proporcionando boa iluminação.
3) Microscopia de contraste de fase. Baseado na transformação das mudanças de fase que ocorre quando um feixe de luz diverge através de objetos transparentes.
4) Microscopia de campo escuro. Com base na difração de luz em
forte iluminação de suspensão Micro-particulas em líquido.
5) Microscopia de luminescência. Baseado em impacto
fluorocromos nos componentes celulares das bactérias.
6) Microscopia eletrônica. A principal diferença entre eletrônico e
microsporia leve é que em vez de luz há
um fluxo rápido de elétrons é usado e lentes de vidro
substituídos por campos eletromagnéticos.
A resolução de um microscópio é a distância mínima entre dois pontos em que eles são percebidos separadamente. Para um microscópio óptico pc = 0,2 µm.
O poder de ampliação de um microscópio é o produto da ampliação das lentes oculares e da ampliação das lentes objetivas.
2. AG: definição, química. Natureza, estrutura, tipos, propriedades
Propriedades dos antígenos
Os antígenos têm duas propriedades principais:
1) antigenicidade. Esta é a capacidade de induzir o corpo a produzir anticorpos.
A antigenicidade de uma substância depende da sua estranheza, do tamanho e da complexidade da estrutura da molécula e da sua solubilidade. Todas essas propriedades são inerentes às proteínas ou à parte proteica do antígeno;
2) especificidade - expressa na capacidade dos antígenos interagirem apenas com os anticorpos que foram desenvolvidos em resposta à introdução de um determinado antígeno. A especificidade do antígeno é determinada por uma pequena parte da molécula - o grupo determinante. O número desses grupos pode variar. Suas funções são desempenhadas por carboidratos, peptídeos, lipídios e ácidos nucléicos.
3. agente causador da tularemia
1. Vírus: definição, morfologia, ultraestrutura, classificação.
Quando os métodos modernos de pesquisa se tornaram possíveis, usando um microscópio eletrônico foi possível revelar detalhes da estrutura dos vírus.
Os vírus diferem das bactérias pela sua estrutura simples. Eles consistem em um ácido nucléico e um invólucro protéico denominado capsídeo. Os ácidos nucléicos são um elemento necessário da matéria viva, o principal é
cujo objetivo é preservar e transferir informações hereditárias ou genéticas. O ácido nucleico consiste em um grande número de unidades estruturais - nucleotídeos. Cada nucleotídeo consiste em três partes principais: uma molécula de ácido fosfórico, uma molécula de açúcar e uma molécula de base orgânica. As bases orgânicas são representadas pelas seguintes substâncias: citosina, timina, uracila, adenina e guanina. Com base no tipo de açúcar contido nos ácidos nucléicos, distinguem-se dois tipos de ácidos. Em um deles, os nucleotídeos contêm ribose, e então o ácido é chamado de ácido ribonucleico (RNA), e no outro, a desoxirribose e o ácido são chamados de ácido desoxirribonucleico (DNA). Os vírus sempre contêm apenas um de dois ácidos: RNA ou DNA. Nas bactérias e outras células vivas, o DNA é encontrado principalmente no núcleo e o RNA está localizado no citoplasma e no nucléolo da célula. Os ácidos nucleicos virais consistem em uma ou duas hélices.
Os vírus podem infectar muitos organismos vivos: bactérias, plantas, humanos e animais. Por exemplo, as plantas com flores são hospedeiras de muitos tipos de vírus. A ciência da fitopatologia também trata do estudo de doenças virais da batata, feijão, beterraba, cana-de-açúcar e outras culturas.
Entre os invertebrados, as doenças virais são encontradas apenas em insetos. Entre os vertebrados, as doenças virais são conhecidas em peixes e anfíbios (tumor renal na rã leopardo). Muitas doenças virais são conhecidas em aves (sarcoma e leucemia são modelos favoritos para estudar a natureza viral dos tumores). As doenças virais humanas incluem: gripe, sarampo, poliomielite, raiva, rubéola e muitas outras.
Os antígenos de muitos microrganismos já foram bem estudados (Salmonella, Escherichia, Shigella). Existem vários tipos de antígenos em bactérias:
1) grupo. São comuns a dois ou mais tipos de micróbios. Por exemplo, os agentes causadores da febre tifóide têm antígenos de grupo comuns com os agentes causadores da febre paratifóide A e B;
2) antígenos específicos – disponíveis apenas em um determinado tipo de microrganismo. O conhecimento de antígenos específicos permite diferenciar micróbios dentro de gêneros e espécies.
Assim, dentro do género Salmonella, mais de 1500 tipos de Salmonella são diferenciados por combinação de antigénios. Com base na localização dos antígenos em uma célula microbiana, eles distinguem:
1) antígenos somáticos O - associados ao corpo da célula microbiana. O antígeno O é altamente tóxico (é uma endotoxina de microrganismos gram-negativos), estável ao calor (não entra em colapso mesmo quando fervido). Contudo, o antígeno somático é destruído pela ação do formaldeído e dos álcoois;
2) flagelos, antígenos H - possuem natureza proteica e são encontrados nos flagelos de microrganismos móveis. Os antígenos H são rapidamente destruídos quando aquecidos;
3) antígenos K capsulares - localizados na superfície da célula microbiana e também chamados de superficiais. Esses antígenos foram estudados detalhadamente no grupo intestinal de bactérias. Eles têm antígenos Vi-, M-, B-, L- e A. Ao imunizar uma pessoa com o complexo Vi-antígeno, alto grau proteção contra a febre tifóide. A maior estabilidade térmica é característica do grupo A - eles não entram em colapso mesmo após fervura prolongada. O grupo B pode suportar o aquecimento até 60°C durante cerca de 1 hora, o grupo L colapsa rapidamente à mesma temperatura.
Toxinas bacterianas, enzimas e proteínas secretadas por bactérias no meio ambiente também possuem propriedades antigênicas. Ao interagir com anticorpos específicos, esses antígenos perdem atividade.
De acordo com a sua imunogenicidade, os antígenos são completos ou incompletos.
Antígenos completos têm a capacidade de induzir a formação de anticorpos no corpo e entrar em uma interação específica com eles. Tais antígenos têm grande peso molecular, grande tamanho de molécula e interagem bem com fatores imunológicos. O resultado desta interação pode ser observado in vitro. Sob a influência
Ao comer anticorpos, os micróbios podem aderir e depositar-se no fundo do tubo de ensaio. Esta reação é chamada de reação de aglutinação.
Antígenos incompletos têm baixa imunogenicidade e não causam a formação de anticorpos no organismo, mas tornam-se completos se combinados com proteínas do organismo.
Existem várias maneiras de os antígenos entrarem
macroorganismo:
F através da pele e mucosas em decorrência de seus danos (picadas de insetos, feridas, microtraumas, etc.); por absorção no trato gastrointestinal;
3. Agente antitetânico
1. As principais etapas da reprodução do vírus na célula hospedeira. Peculiaridades da reprodução de vírus LC
A interação de um vírus com uma célula hospedeira é um processo complexo de vários estágios que começa com a adsorção de partículas virais nos receptores da célula hospedeira e continua após sua penetração na célula. Como resultado dessa interação, desenvolve-se uma forma produtiva, abortiva ou integrativa de infecção celular. Na forma podutiva, ocorre a reprodução, ou mais precisamente, a reprodução (lat. reproduzir-reproduzir) do vírus; na forma abortiva, é interrompida em uma das etapas; na forma n-integrativa, a integração do ácido nucleico viral no genoma celular ocorre.
REPRODUÇÃO DE VÍRUS
Conforme observado acima, os vírus são uma forma auto-replicante que é incapaz de fissão binária, ao contrário dos microrganismos com organização celular. Na década de 50, constatou-se que a reprodução, ou reprodução, dos vírus ocorre por meio da replicação de seus ácidos nucléicos e biossíntese de proteínas, seguida da automontagem do vírion. Este processo ocorre em diferentes partes da célula - o núcleo ou citoplasma,
por isso recebeu o nome de disjuntiva, ou seja, reprodução desconectada.
A reprodução viral é uma forma única de expressão de informação estranha (viral) em células humanas e animais, insetos, plantas e bactérias, que consiste em subordinar os mecanismos genéticos da matriz celular da informação viral.
O estágio 1 - adsorção - é caracterizado pela ligação do vírion aos receptores celulares, que são glicoproteínas da membrana celular contendo ácido neuramínico. Esses receptores estão presentes em diversas células, em particular nos eritrócitos, nos quais muitos vírus são adsorvidos1. Para orto e paramixovírus, os receptores específicos são glicolipídeos contendo ácido siálico (gangliosídeos); para outros, são proteínas ou lipídios da membrana celular.
Os receptores virais são as chamadas proteínas de “ligação” localizadas nos capsídeos de vírions simples e nos supercapsídeos de vírions complexos. Eles podem ter a forma de fios (fibras em adenovírus) ou pontas (formações de glicoproteínas na camada externa de orto e paramixo-, rabdo-, areno- e bunyavírus).
O primeiro estágio de adsorção é determinado por forças inespecíficas de atração intermolecular, o segundo por homologia estrutural específica ou complementaridade de receptores de células e vírus sensíveis.
A fase 2 – penetração do vírus na célula hospedeira – ocorre através de viropexia e fusão de membranas. Viropexis nada mais é do que caso especial endocitose de receptor, que consiste na invaginação de uma seção da membrana plasmática onde existem reentrâncias cobertas por receptores na parte externa onde o vírus é adsorvido (Fig. 5.3). Em seguida, um vacúolo é formado ao redor do vírus, dentro do qual ele está localizado no citoplasma da célula hospedeira. O método descrito de penetração de partículas virais é típico de adenovírus, vírus influenza, etc.
A penetração de uma partícula viral em uma célula hospedeira também pode ocorrer através da fusão da membrana (Fig. 5.4). Neste caso, o envelope viral se funde com a membrana plasmática da célula hospedeira, resultando em estruturas internas(“núcleo”) do vírion acabam no citoplasma da célula infectada e, quando fundidos com a membrana nuclear, no núcleo da célula.
A 3ª etapa - “despir” os vírions - consiste na sua desproteinização e liberação do supercapsídeo e do capsídeo, que impedem a replicação do ácido nucleico viral. O “despir” do vírion começa imediatamente após sua ligação aos receptores celulares e continua no vacúolo endocítico e sua fusão com os lisossomos com a participação de enzimas proteolíticas, bem como nos poros nucleares e no espaço perinuclear durante a fusão com a membrana nuclear. A 4ª etapa envolve a transcrição e replicação dos genomas virais. A transcrição do genoma viral de vírus contendo DNA de fita dupla ocorre, assim como o genoma celular, ao longo da tríade DNA->-mRNA->-proteína (Fig. 5.5, a). As diferenças dizem respeito apenas à origem da enzima RNA polimerase dependente de DNA necessária para este processo. Os vírus cujo genoma é transcrito no citoplasma da célula hospedeira (por exemplo, o vírus da varíola) possuem sua própria RNA polimerase específica do vírus. Os vírus cujos genomas são transcritos no núcleo (papovírus, adenovírus, vírus do herpes) utilizam a RNA polimerase II ou III celular ali contida.
1. Vírus com genoma negativo (cadeia negativa, Fig. 5.5, b), que incluem orto-, paramixovírus e rabdovírus (ver Tabela 5.1), contêm uma RNA polimerase ou transcriptase específica do vírus. Eles sintetizam “RNA em um modelo de RNA genômico. Uma enzima semelhante está ausente nas células normais, mas é sintetizada por células infectadas por vírus.
É encontrado em vírus de RNA de fita simples e de fita dupla.
2. Nos vírus com genoma positivo, que incluem picorna-, togavírus, etc., a função do mRNA é desempenhada pelo próprio genoma, que traduz a informação nele contida para os ribossomos da célula hospedeira.
3. O grupo de retrovírus contendo RNA, que contém transcriptase reversa, ou revertase, se destaca. A singularidade desta enzima reside na sua capacidade
copiar informações do RNA para o DNA. Este processo é chamado de transcrição reversa
Conforme observado acima, o número de genes no genoma viral é muito limitado. Portanto, para aumentar a quantidade de informação viral, existe um mecanismo de tradução único que opera através do mRNA, que transmite significativamente mais informação do que a registrada no ácido nucleico viral. Isso é conseguido de diferentes maneiras, por exemplo, ao transcrever informações de seções reescritas de DNA em RNA por splicing (cortando códons sem sentido e unindo extremidades), bem como quando anticódons de gRNA leem a mesma molécula de mRNA de diferentes nucleotídeos. Nesse caso, novos trigêmeos são formados, aumentando a quantidade de informações transmitidas.
A regulação da transcrição é realizada por mecanismos celulares e específicos de vírus. Consiste na leitura sequencial de informações dos chamados genes “precoces” e “tardios”. O primeiro codifica informações para a síntese de enzimas de transcrição e replicação específicas de vírus, e o segundo - para a síntese de proteínas do capsídeo.
As informações específicas do vírus são traduzidas para os ribossomos da célula hospedeira, que são previamente liberados das proteínas celulares e montados em polissomas específicos do vírus. O genoma do piruinil consiste na síntese de moléculas de DNA ou RNA, que se acumulam nos estoques desses núcleos. ácidos usados na montagem de vírions.
A replicação do DNA viral ocorre em ambas as fitas com a participação da DNA polimerase celular. Nos vírus de fita simples, uma segunda fita (forma replicativa) é formada primeiro.
A replicação do RNA viral ocorre apenas com a participação da mesma enzima específica do vírus que catalisa a transcrição do genoma viral. Nos vírus de cadeia positiva, a replicação do RNA praticamente não difere de sua transcrição. Nos vírus de cadeia negativa, a replicação difere da transcrição no comprimento das moléculas filhas de RNA resultantes. Durante a replicação, eles correspondem completamente em comprimento à fita materna e, durante a transcrição, moléculas de sRNA encurtadas são formadas.
Nos retrovírus, a replicação, assim como a transcrição do DNA, ocorre dentro do genoma celular com a participação da DNA polimerase celular.
A 5ª etapa - montagem do vírion - consiste principalmente na formação de nucleocapsídeos. Como a síntese de ácidos nucléicos e proteínas virais na célula ocorre em diferentes estruturas celulares, o transporte é necessário componentes virion em um local de montagem. Ao mesmo tempo, as proteínas virais e os ácidos nucleicos têm a capacidade de reconhecer e combinar-se espontaneamente entre si. A automontagem de vírions simples é baseada na capacidade dos polipeptídeos virais de se combinarem em capsômeros, que, localizados em torno de eixos de simetria, formam um poliedro. Noutros casos, os polipéptidos formam uma hélice que envolve o ácido nucleico viral.
Muitos vírions simples são montados em complexos replicativos, as membranas do retículo endoplasmático. “Nos vírions complexos, a montagem do nucleocapsídeo começa nos complexos replicativos e depois continua na membrana plasmática, no lado externo da qual estão localizadas as glicoproteínas do supercapsídeo . Em seguida, as glicoproteínas e os nucleocapsídeos adjacentes a elas nas outras seções laterais se projetam através da membrana celular, formando um botão, como é o caso dos orto e paramixovírus, rabdovírus. Após a separação do botão contendo as proteínas do nucleocapsídeo e do supercapsídeo, Virions livres são formados. Eles passam através da membrana plasmática da célula para o espaço extracelular ou através do retículo da membrana endoplasmática penetram no vacúolo do retículo endoplasmático. Ao mesmo tempo, os lipídios da membrana envolvem o rim, deslocando proteínas dele. Muitos Os vírus contendo DNA, por exemplo o vírus do herpes, são coletados no núcleo da célula em sua membrana, onde se formam os nucleocapsídeos, e então brotam no espaço perinuclear, adquirindo uma casca externa. A formação adicional do vírion ocorre nas membranas do retículo citoplasmático e no aparelho de Golgi, e o vírus se espalha para a superfície celular.
O estágio 6 – liberação de partículas virais da célula – ocorre de duas maneiras. Vírus simples sem supercapsídeo, como picornavírus, adenovírus, etc., causam destruição celular e entram no espaço extracelular. Outros vírus que possuem uma camada externa lipoproteica deixam a célula por brotamento, e como resultado ela permanece viável por um longo tempo. Este caminho é típico do vírus influenza, etc.
2. AT: químico Natureza, estrutura, propriedades, mecanismo de interação específica com AG
Os anticorpos são produzidos pelo macrorganismo quando agentes estranhos - antígenos - entram nele. Os anticorpos pertencem à fração globulina do sangue, portanto também são chamados de imunoglobulinas e são designados pelo símbolo ^. Os anticorpos são sintetizados pelas células plasmáticas. Ig pertence aos fatores de imunidade humoral específica: inativam toxinas; em combinação com o complemento, evitam a penetração de vírus e lisam bactérias; ativar a fagocitose; participar de reações alérgicas; participar da destruição de helmintos.
O plasma sanguíneo contém cerca de 5% de proteínas - das quais 3% são imunoglobulinas. As imunoglobulinas são
diferem na estrutura, composição antigênica e funções que desempenham. Com base nessas propriedades, são divididos em 5 classes: IgG, IgM, IgA, IgE, IgD. A Ig é encontrada no soro sanguíneo nas seguintes quantidades: IgG - 7-20 hl, IgA - 0,7-5 hl; IgM - 0,5-2 hl; IgD e IgE - muito pouco.
Natureza química das imunoglobulinas
As moléculas de imunoglobulinas de todas as cinco classes têm uma estrutura universal. Se uma molécula de imunoglobulina for tratada com mercaptoetanol, ela se dividirá em dois pares de cadeias polipeptídicas: duas pesadas e duas leves. A cadeia leve tem até 200 resíduos de aminoácidos e a cadeia pesada tem até 400. Cada uma dessas cadeias é torcida em uma hélice primária - uma hélice a e cada uma das cadeias tem uma hélice secundária - domínios. Existem 2 domínios localizados em cada cadeia leve e 4 domínios em cada cadeia pesada. As cadeias leves e pesadas são conectadas entre si por ligações dissulfeto, formando uma única molécula. As cadeias leves e pesadas consistem em um conjunto constante de aminoácidos, e alguns domínios também incluem um conjunto variável de aminoácidos que participam da formação do centro ativo das imunoglobulinas. As Igs têm especificidade pronunciada - o domínio variável se ajusta ao antígeno como a chave de uma fechadura. A molécula de qualquer imunoglobulina possui uma estrutura quaternária.
1. Imunoglobulinas classe G (IgG) - esses anticorpos são os mais importantes no desenvolvimento da imunidade, pois representam 80% de todas as imunoglobulinas séricas. No início da doença são poucos, mas à medida que a doença progride, seu número aumenta e a função principal de combater os micróbios recai sobre eles. A imunoglobulina atravessa facilmente a barreira placentária e proporciona imunidade humoral ao recém-nascido nos primeiros meses de vida.
2. A imunoglobulina classe M (Ig M) é a maior molécula de todas as cinco classes de imunoglobulinas. Ig é um pentâmero, formado por 5 moléculas. As moléculas consistem em 2 cadeias leves e uma cadeia pesada. A molécula desta imunoglobulina é 5 vezes maior que a IgG, portanto sua taxa de sedimentação será maior. As imunoglobulinas desta classe são as primeiras a aparecer durante o desenvolvimento fetal e as últimas a desaparecer na velhice.
3. Imunoglobulinas Classe A (IgA) - desempenham um papel importante na proteção das membranas mucosas dos tratos respiratório e digestivo e do sistema geniturinário. A molécula de IgA possui as mesmas cadeias leves e sua própria cadeia pesada. Existem modificações - IgA secretora e soro. A imunoglobulina secretora ativa o complemento e estimula a atividade fagocítica nas membranas mucosas. A imunoglobulina A sérica pode ser um anticorpo incompleto, não fixa o complemento e não atravessa a barreira placentária. O peso molecular varia.
4. Imunoglobulinas da classe E (IgE) - ou anticorpos reaginosos, pois participam de reações alérgicas do tipo imediato, e também participam da destruição de helmintos. Encontrado no soro sanguíneo em pequenas quantidades. Não atravessa a barreira placentária.
Imunoglobulinas classe D (IgD) - seu envolvimento não foi suficientemente estudado. Contido no soro sanguíneo em quantidades muito pequenas. Sabe-se que a IgD é produzida pelas células das amígdalas e adenóides. A IgD não se liga ao complemento e não atravessa a barreira placentária. A especificidade das imunoglobulinas se manifesta na especificidade da resposta imune, portanto, na medicina prática, vários medicamentos são utilizados para a prevenção e tratamento de diversas doenças. A especificidade das imunoglobulinas se manifesta em reações imunológicas in vitro (reações de precipitação, etc.).
3. Causa do botulismo
Pertence ao gênero Clostridium, foi descoberto na Holanda por E. van Ermengem em 1896. O patógeno foi isolado do presunto, que serviu de fonte de intoxicação para 34 pessoas.
Propriedades morfológicas e culturais. C. botulinum são bastonetes com extremidades arredondadas e possuem flagelos, embora sejam considerados um microrganismo de fraca mobilidade. Ao bater condições desfavoráveis formar disputas. Anaeróbios estritos. As culturas jovens coram gram-positivas, as culturas com 5 dias de idade coram gram-negativas. Eles são cultivados em ambientes normais com pH 7,3-7,5. No ágar glicose-sangue, formam-se pequenas colônias turvas acinzentadas ou amareladas de formato irregular. Na gelatina, os patógenos formam colônias redondas e transparentes, no ágar sangue - zonas de hemólise. No caldo de fígado, o botulismo por Clostridium forma uma turvação uniforme, depois aparece um sedimento no fundo e o caldo clareia.
Propriedades enzimáticas. Clostridia botulinum produz gelatinase, lecitinase, sulfeto de hidrogênio e amônia, bem como aminas voláteis, álcoois, ácidos acético, láctico e butírico. A glicose e a maltose são fermentadas para formar ácido.
Estrutura antigênica. Foi estabelecida a presença de 8 sorovares do agente causador do botulismo - A, B, C, C2, D, E, F e L. Cada sorovar é caracterizado por imunogenicidade específica. Eles possuem um antígeno O, comum a todos os sorovares.
Resistência. As formas vegetativas do agente causador do botulismo morrem a 80°C em 30 minutos. Os esporos podem resistir à fervura por 1,5 a 6 horas, a t - 115°C eles morrem após 30-40 minutos, a 120°C - após 3-20 minutos. Em grandes pedaços de carne e potes de grande capacidade, eles podem permanecer vivos mesmo após autoclavá-los a 120°C por 15 minutos. Em uma solução de fenol a 5%, os esporos podem ser armazenados por 24 horas. A exotoxina botulínica é destruída em 10 minutos quando fervida e é resistente à luz solar.
Epidemiologia. C. botulinum é difundido no solo. A doença está registrada em todos os lugares. Uma pessoa é infectada com botulismo ao comer produtos de carne e peixe, vegetais enlatados, frango, patos e outros alimentos infectados com patógenos do botulismo.
Manifestações clínicas. No botulismo, o período de incubação varia de 2 horas a 10 dias, na maioria das vezes de 18 a 24 horas.As manifestações dependem da natureza do produto que causou o envenenamento e da quantidade de toxina que entra no corpo. O processo patológico é causado por uma exotoxina, que é absorvida pelo intestino, entra na corrente sanguínea, afeta os núcleos da medula oblonga, sistema cardiovascular e músculos. Os primeiros sinais da doença são distúrbios gastrointestinais (náuseas, vômitos, dores abdominais); os pacientes queixam-se frequentemente de boca seca. Neste contexto, desenvolvem-se dores de cabeça, dificuldade em engolir, pupilas dilatadas, visão dupla e surdez. Muitas vezes (40-60%) a doença termina em morte.
Após a doença, a imunidade de curto prazo permanece.
Prevenção. Para prevenção de emergência, utiliza-se soro de cavalo polivalente, disponível na forma seca e líquida. Para prevenir o botulismo grande importância possui a tecnologia correta para processamento de alimentos e enlatados (principalmente em casa). Produtos defumados e em conserva, bem como cogumelos enlatados, são perigosos. É preciso lembrar que os clostrídios do botulismo, preservados após a esterilização, causam inchaço das latas (bombardeio). Seu conteúdo exala cheiro de óleo rançoso. Esses alimentos enlatados não podem ser colocados à venda, estão sujeitos a apreensão e exame minucioso.
Bilhete 18
1. Bacteriófagos: definição, história de descoberta, morfologia e ultraestrutura usando o exemplo de T-
até mesmo bacteriófagos de Escherichia coli, propriedades, conversão lisogênica, lisogenia,
uso pratico
Em 1917, o microbiologista francês D'Herrel estudou o agente causador da disenteria e observou a lise de uma cultura bacteriana quando lhe foi adicionado filtrado de fezes de doentes.
O princípio de lise persistiu durante repetidas passagens da cultura de bactérias da disenteria e até tornou-se mais ativo. O autor chamou o agente que dissolve as bactérias de bacteriófago (“comedor” de bactérias do latim pha-gos - devorador), e a ação do bacteriófago, que termina na lise das bactérias, de fenômeno da bacteriofagia.
Ao mesmo tempo, D'Herrel avaliou corretamente o significado biológico do fenômeno que descobriu. Ele sugeriu que um bacteriófago é um agente infeccioso que lisa bactérias, fazendo com que partículas filhas de fagos entrem no ambiente. Em meio sólido inoculado com um mistura de cultura de fagos e bactérias, em locais onde aparecem lise de bactérias, manchas estéreis ou colônias negativas de fagos. Semear a mesma cultura bacteriana em meio líquido leva à limpeza do meio. Mais tarde, foi demonstrado que os fagos são vírus bacterianos que possuem bactérias de certas espécies como hospedeiros. A nomenclatura dos bacteriófagos é baseada no nome da espécie do hospedeiro. Por exemplo, os fagos que lisam as bactérias da disenteria são chamados de bacteriófagos da disenteria, salmonela - bacteriófagos de salmonela, bactérias da difteria - bacteriófagos da difteria, etc.
Na história da microbiologia, o estudo do fenômeno da bacteriofagia ocupa um lugar especial. Facilidade de cultivo período curto geração, alto rendimento de progênie de fagos e a capacidade de quantificá-la com precisão contribuíram para o estudo bem-sucedido de muitos problemas de genética molecular e virologia geral. Em particular, no sistema celular fago-bacteriano, foi descoberto pela primeira vez o fenômeno da lisogenia, que mais tarde recebeu o nome de infecção integrativa.
Estrutura. A maioria dos fagos tem forma de esperma. Eles consistem em uma cabeça, que contém ácido nucléico, e um processo. Alguns fagos têm um processo muito curto ou nenhum processo. As dimensões da partícula do fago variam de 20 a 200 nm. O diâmetro médio da cabeça é de 60 a 100 nm, o comprimento do processo é de 100 a 200 nm.
Existem vários tipos morfológicos de bacteriófagos (Fig. 5.9.). O tipo I inclui fagos filamentosos contendo DNA que lisam células bacterianas que transportam o plasmídeo F
(ver 6.7). O tipo II consiste em fagos com um análogo do processo. Estes são pequenos fagos contendo RNA e fagos de DNA de fita simples f/174. O tipo III inclui fagos T3, T7 com processo curto, o tipo IV inclui fagos com bainha de processo não contrátil e DNA de fita dupla (Tl, T5, etc.). Tipo V são fagos contendo DNA com uma bainha de processo contrátil terminando em uma placa basal Formas diferentes(T2, T4, T6).
Os fagos T (inglês, tipo - típico) são os mais estudados. Eles constituem o grupo T dos fagos coli-disenteria, incluindo 7 representantes: 4 ímpares T1, T3, T5 e T7 e 3 pares T2, T4, T6. A estrutura dos fagos T pares, em particular T2, revelou-se a mais complexa (ver Fig. 5.9). Consiste em uma cabeça hexagonal e um processo. Este último é formado por uma haste oca com diâmetro de cerca de 8 nm. Do lado de fora, a haste é cercada por uma bainha capaz de se contrair. Na extremidade distal do processo existe uma placa basal hexagonal, em cujos cantos existem dentes curtos. Um filamento de 150 nm de comprimento se estende de cada dente. A placa basal e os filamentos realizam o processo de adsorção do fago na célula bacteriana.
Composição química. Os fagos, como outros vírus, consistem em ácidos nucléicos e proteínas. A maioria deles contém DNA de fita dupla, que é fechado em círculo. No entanto, também existem fagos de cadeia simples, por exemplo o fago f%174. Alguns fagos contêm DNA com bases nitrogenadas incomuns. Assim, o fago T2 contém 5-hidroximetilcitosina em vez de citosina. Alguns fagos contêm RNA.
O capsídeo da cabeça do fago e a bainha do processo são construídos a partir de subunidades polipeptídicas de acordo com os tipos de simetria cúbica (cabeça) e helicoidal (processo).
As partículas de alguns fagos sob a bainha da parte distal do processo (fago T2) contêm a enzima lisozima. Uma proteína interna contendo poliaminas (espermina, putrescina) foi encontrada dentro da cabeça do fago T2. Essa proteína desempenha um certo papel no superenrolamento do DNA do fago, que somente nesta forma pode caber em uma cabeça relativamente pequena.
Resistência a fatores ambiente. Os fagos são mais resistentes à ação de agentes físicos e fatores químicos do que muitos vírus humanos. A maioria deles é inativada em temperaturas acima de 65°-70°C. Eles toleram bem o congelamento e podem ser armazenados por muito tempo. Baixas temperaturas e secagem. Sublimado (solução a 0,5%), fenol (solução a 1%) não têm efeito inativador sobre eles. Ao mesmo tempo, uma solução de formalina a 1% inativa o fago em poucos minutos. Os raios ultravioleta e a radiação ionizante também causam efeito inativador e, em baixas doses, mutações.
A interação dos fagos com uma célula bacteriana é caracterizada por uma mudança sequencial nos mesmos estágios considerados para vírus animais e humanos. No entanto, existem algumas peculiaridades.
A adsorção do fago em uma célula bacteriana ocorre apenas quando os receptores do fago localizados no final do processo correspondem aos receptores da célula bacteriana associados à parede celular. Alguns fagos são adsorvidos aos pili sexuais, controlados pelos plasmídeos F ou R (ver 6.7). Em bactérias completamente desprovidas de paredes celulares (protoplastos), não ocorre adsorção de fagos.
A adsorção de fagos é grandemente influenciada pela composição e pH do meio, temperatura, bem como pela presença de certos aminoácidos ou outros compostos, por exemplo triptofano para fago T2.
A penetração do fago em uma célula bacteriana ocorre pela injeção de ácido nucleico através do canal de processo. Neste caso, ao contrário dos vírus humanos e animais, as proteínas do capsídeo da cabeça e dos apêndices permanecem fora da célula.
Alguns fagos injetam seu DNA sem primeiro danificar a parede celular bacteriana, outros através de buracos que fazem na parede celular usando a lisozima contida em seu capsídeo.
O DNA de fita simples do fago Φ174, assim como o ácido nucleico dos fagos filamentosos, entra na célula junto com uma das cápsulas.
proteínas das sementes.
A replicação do ácido nucleico do fago e a síntese de enzimas de transcrição e replicação específicas do fago ocorrem da mesma maneira que durante a reprodução de outros vírus. Contudo, o período latente de infecção, isto é, o tempo para a formação da descendência do fago, é muito mais curto.
A montagem de partículas fágicas, ou morfogênese, envolve o preenchimento dos capsídeos da cabeça oca com DNA do fago.
A liberação de fagos maduros da célula bacteriana ocorre através de uma “explosão”, durante a qual as bactérias infectadas são lisadas. A lise ocorre com ou sem a participação da lisozima do fago. Alguns fagos filamentosos contendo DNA (por exemplo, fago fd) são liberados da célula “vazando” DNA através da membrana citoplasmática e da parede celular da bactéria, durante os quais adquirem capsídeos. A célula bacteriana mantém sua viabilidade.
A lisogenização está subjacente à conversão do fago ou lisogênica. Consiste em alterar as propriedades das bactérias lisogênicas, por exemplo, adquirir a capacidade de produzir uma toxina, alterar a morfologia e outras características antigênicas. O mecanismo deste fenômeno está associado à introdução nova informação em uma célula bacteriana.
2. Imunidade: definição, formas, tipos e suas características
Ainda na antiguidade, percebeu-se que quem sofreu uma doença infecciosa fica imune a ela e não adoece novamente. Na Idade Média, as pessoas que sofreram com a peste e a cólera estavam envolvidas no cuidado dos doentes ou no enterro dos mortos. Pela primeira vez, o médico inglês E. Jenner usou a infecção artificial de uma pessoa para protegê-la da varíola. Então L. Pasteur propôs vacinações contra a raiva e antraz. O estudo dos fenômenos da imunidade possibilitou a criação de vacinas, a obtenção de soros terapêuticos e gamaglobulinas.
No processo de evolução, os humanos desenvolveram um sistema especial para proteger o corpo de substâncias estranhas e microorganismos que causam doenças. Este sistema é chamado de sistema imunológico. É representado pelo tecido linfóide e desempenha funções especiais de vigilância, ou seja, reconhece substâncias estranhas que são geneticamente estranhas ao macroorganismo. Os agentes estranhos que entram no nosso corpo são chamados de “antígenos”. Estes incluem substâncias de natureza proteica; compostos de proteínas, lipídios e polissacarídeos, micróbios e suas toxinas; vírus, etc. E não
A suscetibilidade do corpo a substâncias estranhas (antígenos) é chamada de “imunidade” (do latim Immunitas - liberação, livrar-se de algo).
A vigilância imunológica desempenha um papel importante no funcionamento normal do organismo, protegendo contra diversas doenças de natureza infecciosa e não infecciosa.
A imunologia, ciência da imunidade, estuda o funcionamento do sistema imunológico, bem como o desenvolvimento de ferramentas e métodos para diagnóstico imunológico, prevenção e tratamento de doenças infecciosas e não infecciosas. A imunologia como ciência foi formada apenas no final do século XIX. Seus fundadores podem ser considerados I.I. Mechnikov, L. Pasteur e P. Ehrlich.
Existem várias classificações de tipos e formas de imunidade. A classificação mais simples:
1) imunidade natural:
a) imunidade inata;
b) imunidade adquirida;
c) imunidade passiva dos recém-nascidos;
2) imunidade artificial:
a) imunidade ativa;
b) imunidade passiva.
1. A imunidade inata natural é a forma mais durável de imunidade, que é determinada pela imunidade inata, características biológicas deste tipo. Por exemplo, uma pessoa não sofre de peste bovina ou cólera das galinhas. Os animais não sofrem de doenças humanas: difteria, sífilis, etc. Essas propriedades de imunidade a certas doenças são herdadas pelos descendentes. É por isso que falamos sobre imunidade inata.
A imunidade natural adquirida ocorre depois que uma pessoa sofreu uma doença infecciosa, portanto
essa imunidade também é chamada de imunidade pós-infecciosa. A imunidade adquirida é individual e não é herdada. Se uma pessoa sofreu de caxumba (caxumba) na infância, isso não significa que seus filhos não sofrerão desta doença. A duração da imunidade adquirida varia e depende do tipo de patógeno. Por exemplo, depois de sofrer algumas doenças, o corpo humano desenvolve imunidade de longo prazo e vitalícia (peste, caxumba, tosse convulsa, tularemia, etc.), e depois de sofrer outras doenças, a imunidade de curto prazo permanece. Uma pessoa pode adoecer várias vezes com essas infecções (gripe A, gonorréia, amigdalite, etc.).
A imunidade à infecção ocorre não apenas nas formas graves da doença, mas também nas formas assintomáticas da doença.
A imunidade passiva dos recém-nascidos se deve à transferência de substâncias protetoras especiais - anticorpos - do corpo da mãe para o feto através da placenta ou para a criança através do leite materno. A duração dessa imunidade é curta, apenas alguns meses, mas o seu papel na saúde da criança é muito importante. Já está claramente provado que as crianças em amamentação, adoecem com muito menos frequência do que aqueles que são alimentados artificialmente.
2. Imunidade artificial - é criada artificialmente no corpo humano para prevenir a ocorrência de uma doença infecciosa e também é usada para tratar doenças infecciosas. Existem formas ativas e passivas de imunidade artificial: a imunidade ativa é criada em humanos pela administração de vacinas ou toxóides. A imunidade ativa pode ser intensa e duradoura. A imunidade passiva é criada pela introdução no corpo humano de soros imunes que contêm
anticorpos imunológicos. A imunidade passiva não dura muito, cerca de um mês, enquanto os anticorpos permanecerem no corpo. Os anticorpos são então destruídos e removidos do corpo. Dependendo da localização, a imunidade pode ser geral e local. A imunidade local protege a pele e as membranas mucosas, e a imunidade geral fornece proteção imunológica ao ambiente interno do corpo humano. Divisão da imunidade em tipos diferentes e as formas são muito condicionais, pois a proteção do corpo é feita pelos mesmos sistemas, órgãos e tecidos. Sua função visa manter um estado normal constante do corpo. Os fatores de proteção que determinam a imunidade de uma pessoa a doenças podem ser específicos e inespecíficos.
3. Possibilidade de leptospirose
Mycobacterium tuberculose Mycobacterium bovis Mycobacterium avium
Bilhete 19
1. Obtenção de energia através da fosforilação do substrato (fermentação)
As bactérias aeróbicas oxidam várias substâncias orgânicas (carboidratos, proteínas, gorduras, álcoois, ácidos orgânicos, etc.) durante a respiração.
A respiração nos anaeróbios ocorre pela fermentação do substrato com a formação de grande quantidade energia. Processos de decomposição matéria orgânica sob condições livres de oxigênio, acompanhada pela liberação de energia, é chamada de fermentação. Dependendo da participação de determinados mecanismos, distinguem-se os seguintes tipos de fermentação: alcoólica, realizada por leveduras, ácido láctico, causada por bactérias lácticas, ácido butírico, etc.
2. sistema imunológico humano, células imunocompetentes: definição, tipos, funções
A imunidade - antibacteriana, antiviral, antitóxica, etc. - é fornecida pelo sistema imunológico como um todo.
Como pode ser visto no diagrama, o sistema imunológico é dividido em órgãos centrais e periféricos. Uma resposta imune adequada à presença de antígenos ocorre em órgãos periféricos. O baço é o órgão através do qual o sangue é filtrado. O baço está localizado na região ilíaca esquerda e possui estrutura lobular. As acumulações linfóides são povoadas por linfócitos T, B e células plasmáticas. Os linfócitos reconhecem moléculas e células geneticamente estranhas e participam na regulação da resposta imune e na formação da imunidade humoral e celular.
Componentes do sistema imunológico
Órgãos e tecidos do sistema imunológico
1) central: medula óssea; timo
2) periférico: baço;
Os gânglios linfáticos; acúmulo de tecido linfóide nas membranas mucosas
Células do sistema imunológico
imunocompetente - garante a especificidade das reações imunológicas;
1) Linfócitos T e B;
2) macrófagos;
3) células dendríticas
Fatores humorais da atividade imunológica
realizar uma função de destruição inespecífica:
1) a terceira população de linfócitos - células K (células assassinas) NK (células assassinas normais)
2) macrófagos;
3) neutrófilos;
4) eosinófilos
1) imunoglobulinas;
2) citocinas (fatores reguladores);
3) complemento
O sangue também é um órgão periférico do sistema imunológico. Contém linfócitos T e B, fagócitos e leucócitos.
1 células de substância. As principais células da linfa são os linfócitos.
que são responsáveis pela síntese das imunoglobulinas das cinco classes e participam da formação da imunidade humoral. Essas células representam 15% de toda a população linfóide. Eles podem viver no corpo por até 10 anos ou mais. Os gânglios linfáticos são pequenas formações anatômicas, em forma de feijão, localizadas ao longo dos vasos linfáticos. Cada área do corpo possui linfonodos regionais. Existem cerca de 1000 gânglios linfáticos no corpo humano. A linfa é filtrada através deles, vários antígenos são retidos e concentrados. Dentro do nódulo, é ativado um sistema de resposta imune específico, que visa neutralizar o antígeno. A linfa é um tecido líquido encontrado nos vasos e nódulos linfáticos. Como as células do corpo não entram em contato com o sangue, cada célula é lavada pela linfa, que contém o necessário para
Os linfócitos B são células imunocompetentes que
3. Supressores T - inibem a atividade dos linfócitos T ou linfócitos B, previnem o desenvolvimento excessivo de reações imunológicas.
camada, as moléculas CD8 são determinadas.
| destruir células. Na superfície da membrana T-kil-
| 2. T-citotóxico (assassino) - reconhece antígenos e
| A espessura da membrana T-helper é determinada pelas moléculas CD4.
| superfície das células apresentadoras de antígenos. Na superfície
1. Células T auxiliares - reconhecem a parte transportadora do antígeno no
Os linfócitos T fornecem as formas celulares da resposta imune. Entre os linfócitos T, existem 3 populações principais:
Três tipos de células estão envolvidos na implementação da defesa imunológica: fagócitos, linfócitos T e B. A atividade dessas células visa reconhecer e destruir agentes estranhos - antígenos.
3. Possibilidade de tuberculose
O gênero inclui hastes finas e ramificadas; Bactérias Gram+ resistentes a álcool, ácidos e álcalis, aeróbicas. O gênero das micobactérias inclui os agentes causadores da tuberculose e da hanseníase, bem como saprófitas comuns no meio ambiente. Das micobactérias patogênicas, foram identificados 5 grupos: M. tuberculosis, M. bovis, M. microti, M. leprae, M. lepraemirium.
M. tuberculose - As micobactérias da tuberculose humana foram descobertas por R. Koch em 1882. Em homenagem a esta descoberta, o agente causador da tuberculose ainda é chamado de bacilo de Koch. Esta doença é conhecida pelas pessoas desde os tempos antigos. A forma pulmonar foi descrita pelo antigo médico grego Hipócrates. Naquela época, a doença não era considerada infecciosa, e o médico do Oriente árabe, Avicena, a considerava hereditária. Silvius foi o primeiro a ver a ligação entre tubérculos pulmonares e tuberculose.
Nos séculos XVIII-XIX. tuberculose ceifou muitas vidas, incluindo figuras proeminentes da época - A.P. Chekhova, N.A. Nekrasov, Mozart, Chopin. A natureza infecciosa da tuberculose foi comprovada pela primeira vez por Villemin (1865), e R. Koch isolou o patógeno em sua forma pura.
Propriedades morfológicas e culturais. Mycobacteria tuberculosis é caracterizada por polimorfismo. São bastões finos, longos e ligeiramente curvos. Às vezes apresentam pequenos inchaços nas pontas. Nas culturas jovens, os bastões são mais longos e nas antigas tendem à simples ramificação. Às vezes, formam-se bastonetes curtos e grossos. Imóveis, gram-positivos, não formam esporos ou cápsulas. As micobactérias, devido ao alto teor de ácido micólico e lipídios na parede celular, são mal coradas pelos métodos convencionais, por isso a coloração de Ziehl-Neelsen é usada para identificá-las: os bastonetes são pintados de vermelho brilhante sobre fundo azul.
Existem microcápsulas na superfície das células. A microscopia eletrônica revelou a presença de grânulos e vacúolos nas extremidades das células. O citoplasma das culturas jovens é homogêneo, as antigas são granulares. A resistência ácida é explicada pela presença de grandes quantidades de ácido micólico e lipídios nas micobactérias tuberculosas.
O bacilo da tuberculose é um microrganismo de crescimento muito lento; exigente em meio nutriente, dependente de glicerol. Aeróbios, mas também podem crescer em condições anaeróbicas facultativas. Limites extremos de temperatura 25-40°C, opte - 37°C. A reação do meio é quase neutra (pH 6,4-7,0), mas pode crescer na faixa de pH de 4,5-8,0. Para um melhor crescimento das micobactérias, vitaminas (biotina, ácido nicotínico, riboflavina), bem como íons (Mg2+, K+, Na+, Fe2+), são adicionados ao meio. Meios de ovo sólidos, ágar glicerina-batata e meios líquidos sintéticos e semissintéticos (por exemplo, meio líquido de Soton) são frequentemente usados para cultivo. Em meio líquido, o bacilo da tuberculose forma uma película seca e enrugada após 5 a 7 dias, subindo até as bordas do tubo de ensaio. O ambiente permanece transparente. Em meios sólidos, o bacilo da tuberculose forma colônias de cor creme que se assemelham couve-flor, quebradiço, o tanque é difícil de remover -
alça teriológica. Esse crescimento é observado no 14º ao 40º dia.
Estrutura antigênica. Vários tipos de micobactérias foram identificados por reações de aglutinação e fixação de complemento: mamíferos, aves, animais de sangue frio, saprófitas.
A espécie humana não é sorologicamente diferente das espécies bovina e aviária. O antígeno Mycobacterium tuberculosis contém proteínas, lipídios, fosfatídeos e polissacarídeos. A tuberculina é considerada um antígeno que, quando exposto a um organismo infectado pela tuberculose, causa uma reação alérgica local e focal (teste de Mantoux).
Resistência. Comparado com outros bacilos não formadores de esporos, o Mycobacterium tuberculosis é muito estável no ambiente externo. Em água corrente podem permanecer viáveis por até 1 ano, no solo e estrume por 6 meses, em vários objetos por até 3 meses, no pó de biblioteca por 18 meses, em pus seco e expectoração por até 10 meses. Quando fervido, o bacilo de Koch morre após 5 minutos, no suco gástrico - após 6 horas, durante a pasteurização - após 30 minutos. As micobactérias são sensíveis à luz solar e a soluções ativadas de cloramina e alvejante.
Epidemiologia. A tuberculose é uma pandemia e está disseminada em todo o mundo. A fonte da infecção por M. tuberculosis é uma pessoa doente, a principal via de infecção é a aerogênica. A pessoa é muito suscetível a esta doença. A grande maioria da população acabará por ser infectada pela tuberculose, mas na maioria dos casos a infecção provoca pequenas alterações sem tendência ao desenvolvimento progressivo da doença. Eles ainda levam a um aumento na resistência do organismo à imunidade específica. Apesar disso, a incidência da tuberculose está aumentando em todo o mundo. Todos os anos, mais de 8 milhões de pessoas em todo o mundo adoecem com tuberculose, 95% delas residentes em países em desenvolvimento. Em 1991 a Assembleia Geral Organização Mundial saúde (OMS)
foi forçado a afirmar que a tuberculose é um problema de saúde internacional e nacional não só nos países em desenvolvimento, mas também em países economicamente países desenvolvidos. 3 milhões de pessoas morrem de tuberculose todos os anos e 30 milhões de pacientes poderão morrer nos próximos 10 anos. Portanto, a situação atual foi caracterizada pela OMS como uma crise política global no campo da tuberculose.
A progressão da morbilidade actualmente observada na Federação Russa está associada à deterioração das condições socioeconómicas de vida da população, que se tornou evidente no período 1991-1992, e ao correspondente desequilíbrio na nutrição (diminuição do consumo de produtos proteicos) , bem como com inúmeras situações estressantes associadas às ações militares; um afluxo de refugiados de outras repúblicas da ex-URSS. Um papel especial na infecção tuberculosa é desempenhado pela superlotação da população - centros de detenção provisória, campos de refugiados, pessoas “sem local fixo de residência”. A incidência está crescendo entre os segmentos “prósperos” da população com especialidades de contato: médicos, professores, estudantes, escolares. A incidência é facilitada pela redução do trabalho de prevenção e detecção precoce da tuberculose, deterioração da qualidade e cobertura dos exames preventivos. Devido à redução do volume de tuberculose detectada precocemente, o reservatório da infecção tuberculosa na sociedade começou a crescer - formas avançadas e de difícil tratamento da doença, especialmente aquelas causadas por micobactérias resistentes a medicamentos.
Patogênese das lesões. A tuberculose em humanos é causada por dois tipos principais de micobactérias - humana (M. tuberculosis) e bovina (M. bo vis), menos comumente por micobactérias aviárias (M. avium). A infecção ocorre através de gotículas e poeiras transportadas pelo ar, por vezes através da boca, através do consumo de produtos alimentares infectados com micobactérias tuberculosas, através da pele e membranas mucosas.
É possível a infecção intrauterina do feto através da placenta.
Na infecção aerogênica, o foco infeccioso primário se desenvolve nos pulmões, e na infecção alimentar, nos linfonodos mesentéricos. No desenvolvimento da doença distinguem-se a tuberculose primária, disseminada e secundária, que é uma reativação endógena de focos antigos.Com baixa resistência corporal e condições sociais desfavoráveis, a partir do local de localização primária o patógeno pode se espalhar por todo o corpo e causar um infecção generalizada.
No local de penetração das micobactérias ou áreas mais favoráveis à proliferação de bactérias, surge um complexo primário de tuberculose, constituído por um foco inflamatório (nos pulmões é um foco pneumático sob a pleura), linfonodos regionais afetados e um “caminho ”De vasos linfáticos alterados entre eles. A disseminação de micróbios pode ocorrer bronco, linfo e hematogenamente.
A formação do complexo primário é caracterizada pelo desenvolvimento de granulomas em forma de tubérculos (tuberculose ou tuberculose). A formação de granulomas não apresenta traços característicos e é uma reação celular. As micobactérias são circundadas por leucócitos e todo esse acúmulo é circundado por células epitelióides e gigantes (multinucleadas). Na maioria das vezes, a lesão primária é observada nos pulmões (lesão de Ghohn). Com boa resistência corporal, as micobactérias podem permanecer no tubérculo por vários anos ou por toda a vida. Na maioria dos casos, as lesões primárias cicatrizam com degradação completa do conteúdo, calcificação e fibrose do parênquima. Com a diminuição da imunidade, as lesões primárias tornam-se mais ativas e progridem com o desenvolvimento de um processo secundário. Essa reativação geralmente ocorre 20 a 25 anos após a infecção inicial; geralmente é provocada por estresse, má nutrição e enfraquecimento geral do corpo. Segundo as estatísticas, 80% das pessoas adoecem devido a
forma exata de tuberculose, os 20% restantes - tuberculose de outros órgãos e tecidos (tuberculose disseminada). A tuberculose afeta os órgãos genitais, ossos e articulações, pele, etc.
Manifestações clínicas. O período de incubação da tuberculose é relativamente longo - de várias semanas a 5 anos. A doença pode evoluir de forma aguda: falta de ar intensa, dor na região do peito. A tuberculose reativa manifesta-se como tosse, às vezes com hemoptise; perda de peso corporal; suor noturno; temperatura corporal subfebril. Não há sintomas específicos apenas da tuberculose, uma vez que a tuberculose é caracterizada por uma variedade de formas clínicas e alterações anatômicas.
Imunidade. A imunidade na tuberculose não é estéril, devido à presença de formas Z de micobactérias no corpo. A imunidade adquirida resulta da ativação de células T pelos antígenos do Mycobacterium tuberculosis. Portanto, o resultado da doença é determinado pela atividade de fatores imunológicos celulares.
Um dos fatores de proteção são os bacteriófagos, que atuam tanto nas cepas virulentas quanto nas avirulentas do bacilo da tuberculose.
Métodos para diagnosticar tuberculose:
1. Microscopia. Este método é simples, acessível e permite dar uma resposta rapidamente. Nos esfregaços corados por Ziehl-Neelsen, os bastonetes vermelhos podem ser identificados sobre um fundo azul. A desvantagem desse método é sua baixa sensibilidade (devido ao crescimento muito lento das micobactérias, elas podem não entrar no esfregaço; podem ser detectadas quando há 100.000-500.000 micobactérias em 1 ml de material).
2. Para microscopia negativa, utiliza-se um método microbiológico: semear o material em estudo em meio nutriente (geralmente Lowenstein-Jensen).
Para facilitar o isolamento, são adicionados antibióticos ao meio para suprimir o crescimento de microrganismos associados. A vantagem desse método é a possibilidade de obtenção de uma cultura pura, o que permite identificá-la e determinar a sensibilidade aos medicamentos. Desvantagem - crescimento lento do bacilo de Koch (de 4 a 14 semanas).
3. Um método de exame obrigatório é o diagnóstico tuberculínico, baseado na determinação da sensibilidade do organismo à tuberculina. As micobactérias contêm endotoxinas, que são liberadas durante a degradação celular. R. Koch isolou esta toxina em 1890 e chamou-a de “tuberculina”. Existem várias preparações de tuberculina disponíveis. A tuberculina “velha” de Koch é uma cultura de 5 a 6 semanas em caldo de glicerina, esterilizada com fluxo de vapor (100°C) por 30 s, evaporada a 70°C até 110 do volume original e filtrada através de velas de porcelana. A “nova” tuberculina de Koch é o Mycobacterium tuberculosis seco, moído em 50% de glicerol até obter uma massa homogênea. A tuberculina de micobactérias bovinas (M. bo vis) contém proteínas, ácidos graxos e lipídios. Para realizar a reação de Mantoux (proposta por um cientista francês em 1908), utiliza-se a “nova” tuberculina de Koch. Esta reação é realizada por via intradérmica. Se a reação for positiva, após 48 horas (em idosos - após 72 horas), forma-se no local da injeção uma pápula de 10 mm de diâmetro com bordas hiperêmicas. Você deve saber que nem sempre um resultado positivo é sinal de processo de tuberculose ativo, assim como uma reação de Mantoux negativa nem sempre indica ausência de processo, pois em pacientes com imunodeficiências a reação costuma ser negativa.
4. Para a detecção precoce de pacientes com tuberculose, utiliza-se o método diagnóstico radiográfico (fluorográfico a partir dos 15 anos). De acordo com as diretrizes atuais
documentos, a frequência de sua realização é determinada
situação epidemiológica da tuberculose e grupos populacionais,
sujeito a inspeção.
A prevenção da tuberculose é assegurada através do diagnóstico precoce, identificação atempada dos pacientes e do seu exame médico, neutralização do leite e da carne dos animais doentes. A prevenção consiste na realização de medidas sociais (melhorar as condições de trabalho e de vida da população, aumentando o seu nível material e cultural).
Para imunoprofilaxia, utiliza-se a vacina BCG - micobactérias bovinas atenuadas. Na Rússia, todos os recém-nascidos são vacinados. Nos EUA - apenas em grupos de alto risco. A imunização como meio de prevenção da tuberculose não é a ideal e, quanto mais grave for a situação epidemiológica da tuberculose, menos eficaz será. A introdução de revacinações BCG subsequentes em idades mais avançadas não afeta a incidência. Portanto, o mais importante na imunização específica é proteger as crianças. Após a vacinação, recusam-se a realizar testes cutâneos por algum tempo para prevenir complicações hiperreativas (reações necróticas, etc.).
M. bovis - causa tuberculose em bovinos e em 5% dos casos em humanos. O gado é infectado com tuberculose através da aspiração, da inalação de poeira infectada e também através da nutrição - através de alimentos e água contaminados. A excreção de bacilos no leite ocorre frequentemente mesmo em animais que não apresentam alterações clinicamente significativas. A este respeito, a infecção humana por leite ou produtos lácteos obtidos de animais doentes é de grande importância.
A tuberculose em bovinos e aves representa um perigo particular para os trabalhadores da pecuária e da avicultura, das fábricas de processamento de carne e dos matadouros, entre os quais a tuberculose é de natureza ocupacional pronunciada.
As lesões em humanos são caracterizadas por tendência a complicações, generalização, reações exsudativas e metástases broncogênicas. Morfologicamente não difere do M. tuberculosis. Os métodos para isolar o patógeno também são semelhantes aos das micobactérias humanas. M. bovis é isolado de 60 espécies de mamíferos, mas bovinos, camelos, caprinos, ovinos, suínos, cães e gatos representam um risco epidemiológico.
Esquema para isolamento de Mncobacterium tuberculosis
Lumi-l "sem cheiro4
microscopia
Método bacteriológico
M. leprae é o agente causador da hanseníase (hanseníase ou hanseníase).
A lepra é conhecida desde a antiguidade. Na Idade Média, afetou aldeias inteiras. A lepra foi tratada com horror místico; sempre esteve envolta em segredo. A lepra tornou-se a base de muitos temas literários. Stevenson, Conan Doyle e Jack London escreveram sobre leprosos. Na Europa medieval, os leprosos foram isolados do mundo pessoas saudáveis. A necessidade de isolamento continua sendo a principal condição para o combate à hanseníase. Ao ser diagnosticada com hanseníase, a pessoa é forçada a romper com sua vida anterior e se estabelecer em uma colônia de leprosos. Desde o século XIV. A incidência da lepra na Europa diminuiu acentuadamente e a lepra ocorre agora em vários países como casos esporádicos. Atualmente, existem cerca de 2 milhões de pacientes com hanseníase no mundo. O patógeno foi descoberto pelo cientista norueguês Hansen (1873).
Propriedades morfológicas e culturais. Os bastonetes da hanseníase são retos ou curvos, as extremidades podem ser pontiagudas ou espessadas, imóveis, não formam esporos ou cápsulas, resistentes a álcool e ácidos, gram-positivos.
M. leprae é difícil de crescer em meio nutriente. As culturas desenvolvem-se muito lentamente (6-8 semanas), formam colónias na forma de uma camada seca e enrugada.
A epidemiologia da hanseníase não é totalmente compreendida. A seletividade da infecção desafia a lógica. A literatura médica descreve um caso em que um pai com hanseníase foi cuidado por filha mais velha, e os filhos do meio e os mais novos, que tiveram menos contato com o paciente, adoeceram. Portanto, em cada caso específico é impossível identificar a via de infecção.
O reservatório da infecção é uma pessoa doente. Presumivelmente, a infecção ocorre por contato ou
abafado e tipo gotejamento. A principal forma de combate à hanseníase continua sendo o isolamento dos pacientes. O papel principal na propagação da infecção pertence a factores socioeconómicos, como evidenciado pela elevada incidência nos países do terceiro mundo. Na Rússia, a taxa de incidência é baixa. Nas regiões de Lipetsk, Irkutsk, Leningrado - 1 paciente cada, em Região de Rostov- 70 pessoas (o Don é uma zona endémica de lepra - desde os tempos em que os cossacos faziam longas campanhas).
Patogênese das lesões. A lepra afeta apenas pessoas, portanto a fonte da doença é uma pessoa doente. A patogênese é causada pela formação de tubérculos (como a tuberculose) em vários órgãos e tecidos, onde o patógeno entra com o fluxo sanguíneo e linfático. Com boa resistência corporal, a doença fica latente e pode não se manifestar ao longo da vida. A probabilidade da doença depende do estado imunológico do corpo humano. A lepromatosa é considerada uma forma grave da doença.
Manifestações clínicas. O período de incubação é de 3 a 5 anos, às vezes dura até 20 anos. No início da doença, os sintomas gerais de intoxicação são: febre, fraqueza, dores ósseas, etc. As lesões cutâneas aparecem na forma de erupções cutâneas que aparecem como manchas claramente definidas (lerídeos) de diferentes cores e tamanhos. Depois surgem outros sintomas: falta de sensibilidade à temperatura alta ou baixa, à dor.
Se as lesões estiverem localizadas na face, os pacientes apresentam perda de sobrancelhas e cílios, e infiltrados contínuos dão a aparência de uma “cara de leão” e o paciente perde a voz.
Diagnóstico laboratorial. O material do paciente é obtido por raspagem vigorosa da mucosa nasal e punção de linfonodos aumentados. Diagnóstico realizado
é revelado pela microscopia. Os esfregaços são corados de acordo com Ziehl-Neelsen. Também para o diagnóstico utiliza-se um falso teste com o alérgeno M. leprae (teste da lepromina), que é sempre negativo para lesões faciais. Isto é devido à falta de respostas imunes celulares.
Tratamento. Nos círculos médicos, existem lendas sobre cientistas que se vacinaram contra a lepra para testar os meios de salvação que estavam sendo testados. No entanto, os experimentos não tiveram sucesso: ainda não existe um medicamento que possa derrotar a hanseníase. A quimioterapia intensiva é frequentemente administrada durante toda a vida do paciente com hanseníase. Os principais medicamentos são sulfonas, rifampicina, clofazilina.
1. Tipos de conexões ecológicas entre m/o em associações: tipos de simbiose e antagonismo, aplicação na prática
A vida dos microrganismos depende intimamente das condições ambientais. Tanto as plantas, os macroorganismos e o microcosmo são significativamente influenciados por vários fatores ambientais. Eles podem ser divididos em três grupos: químicos, físicos e biológicos.
2. Cooperação intercelular de células imunocompetentes usando o exemplo do anticorpo hepesis (como um dos
formas de resposta imunológica
3. Vírus da raiva
O agente causador da raiva pertence à família dos Rhabdovírus. Esta família inclui vírus da raiva, estomatite vesicular e outros vírus que causam doenças em animais e insetos.
Durante milhares de anos, toda a humanidade sofreu com esta terrível doença - a raiva. A menção desta doença é encontrada na Ilíada de Homero, nas obras de Aristóteles e Avicena. No século I AC. O cientista romano Celsky sugeriu queimar as áreas picadas com ferro quente. Esse evento doloroso salvou apenas se o ferimento fosse pequeno e a cauterização fosse realizada imediatamente após a picada. Havia outros meios, mas todos se revelaram ineficazes.
A raiva foi estudada pela primeira vez por L. Pasteur em 1880.
Em 1886, um grupo de médicos de Odessa, às suas próprias custas, enviou N.F. Gamaleya a Pasteur, em Paris, para se familiarizar com o método de preparação de uma vacina contra a raiva. Após seu retorno, foi inaugurado um laboratório em Odessa onde foi produzida uma vacina antirrábica.
Estrutura morfológica. O agente causador da raiva tem formato de bastão (em forma de bala), com uma extremidade plana e a outra alongada. Tamanho 80-180nm. O vírion contém RNA de fita simples rodeado por um capsídeo. A parte externa do capsídeo é coberta por uma concha, que inclui glicoproteínas e glicolipídios. A concha contém formações em forma de furador (peplômeros).
No citoplasma das células infectadas por vírus, formam-se inclusões específicas, descritas por Babes (1892) e Né-gris (1903). É por isso que são chamados de corpos Babesha-Negri. O tamanho desses corpos é de 3-4 a 20 mícrons. Eles têm formatos diferentes, geralmente esféricos, mas podem ser ovais e poligonais.
Noé. Os corantes ácidos os colorem de vermelho rubi.
Os corpos de Babes-Negri estão localizados no citoplasma das células nervosas do cérebro. A detecção desses corpos tem valor diagnóstico.
Cultivo. O vírus da raiva é cultivado no tecido cerebral de camundongos, galinhas, coelhos, em embriões de galinha, embriões de bezerros, ovelhas e em culturas de células de vários tipos de animais.
