As biocenoses microbianas encontradas no corpo de humanos e animais se formaram no processo de evolução e desempenham um papel importante na atividade funcional de vários órgãos humanos ou animais.
A formação da composição quantitativa e qualitativa da microflora no macroorganismo é regulada por complexas relações antagônicas e sinérgicas entre seus representantes individuais na composição das bioceoses, e também é controlada pelos fatores fisiológicos do macroorganismo na dinâmica de seu desenvolvimento.
A microflora do corpo de humanos e animais pode ser dividida em dois grupos: constante normal (obrigatório) e aleatório (opcional).
O grupo normal e normal inclui microrganismos que são adaptados ao máximo para a existência no corpo do hospedeiro e são encontrados naturalmente em suas cavidades e órgãos. Esses microrganismos são representados por espécies saprófitas (não patogênicas) e condicionalmente patogênicas.
A microflora facultativa (transitória) é temporária e opcional. Sua presença é determinada pela entrada de micróbios de meio Ambiente e o estado do sistema imunológico do hospedeiro. A composição de espécies da microflora normal de humanos e animais (biocenose) foi formada como resultado da interação de micro e macroorganismos no processo de evolução. Uma consequência lógica desse processo foi que a totalidade das espécies microbianas características de órgãos e cavidades individuais do corpo tornou-se uma condição necessária para o funcionamento normal do corpo. A violação da biocenose, o aparecimento de microrganismos incomuns, causa o desenvolvimento da doença.
O feto de uma pessoa ou animal durante o desenvolvimento fetal é estéril.
O organismo humano e animal, desde os primeiros minutos de vida terrena, constantemente entra em contato com o meio ambiente e é povoado por microrganismos que vivem nesse meio.
Imediatamente após o nascimento, na pele e mucosas do recém-nascido, bem como nas cavidades em contato com ambiente externo uma grande variedade de microrganismos. Em primeiro lugar, eles caem das mãos da equipe médica e do ar. Alguns deles morrem rapidamente ou são removidos do corpo, outros se enraízam em certos órgãos ou partes do corpo e começa a formação da microflora normal do corpo.
Durante a vida de uma pessoa ou animal, a natureza dessa microflora muda, mas em geral é constante e característica de órgãos individuais.
Os tecidos e órgãos internos de humanos e animais (sangue, cérebro, líquido cefalorraquidiano, fígado, útero, cavidade vesical) são geralmente estéreis. Os mesmos órgãos e tecidos que se comunicam com o ambiente contêm microrganismos.
Muitos micróbios vivem na pele e na linha do cabelo - aqui você pode encontrar quase todos os representantes da microflora do ambiente. Entre eles, cocos, Escherichia, difteróides, bacilos formadores de esporos, várias bactérias oportunistas e até patogênicas, fungos leveduriformes e radiantes, etc.
O número total de micróbios na superfície da pele atinge o número 1010 graus.
Microrganismos que caíram sobre a pele limpa e saudável geralmente morrem pela ação de substâncias bactericidas secretadas pela pele, bem como de bactérias antagonistas que vivem constantemente na pele. A poluição da pele contribui para o acúmulo de microrganismos patogênicos nela. Seu substrato nutritivo são as secreções das glândulas sebáceas e sudoríparas, células mortas, produtos de decomposição.
É muito importante manter a pele constantemente limpa, porque a pele limpa e sem danos, por um lado, impede mecanicamente a penetração de microrganismos no corpo do macrorganismo. Por outro lado, contribui para a morte de células microbianas como resultado da liberação de substâncias bactericidas pela pele. Quando a pele está contaminada, a liberação de substâncias bactericidas diminui ou cessa completamente.
Com a primeira respiração de um recém-nascido, os micróbios são introduzidos no trato respiratório e criam raízes lá. A maioria deles está na cavidade nasal, muito menos na laringe, menos ainda na traqueia e grandes brônquios. Os brônquios pequenos estão livres de microorganismos, mas se células microbianas individuais chegarem lá, elas morrerão rapidamente.
Os habitantes permanentes do trato respiratório superior (cavidade nasal, laringe e brônquios) são principalmente cocos (estafilococos, estreptococos, pneumococos). Existem difteróides e outros microrganismos, na maioria das vezes comensais inofensivos (coabitantes).
Os microrganismos obrigatórios do trato respiratório mucoso em animais são estafilococos e estreptococos, sarcinas, pneumococos, pasteurella, micoplasmas.
O epitélio ciliado da membrana mucosa do trato respiratório superior desempenha um papel importante na proteção dos órgãos respiratórios de microrganismos.
A microflora da membrana mucosa do olho é muito pobre, devido à ação da lisozima contida nas lágrimas. Na membrana mucosa do olho, na maioria das vezes você pode encontrar cocos não patogênicos, menos frequentemente esporos de fungos leveduriformes e fungos, bem como B. xerose, morfologicamente muito semelhante às verdadeiras bactérias da difteria.
A microflora do trato digestivo de humanos e animais é extremamente abundante e diversificada.
Já com as primeiras porções do leite materno, os micróbios entram na cavidade oral e depois penetram no estômago e nos intestinos.
A cavidade oral é um reservatório muito bom para o desenvolvimento de microrganismos. Há tudo o que é necessário para o seu desenvolvimento - uma temperatura medida, a presença de umidade, uma abundância nutrientes, pH salivar alcalino.
Em locais onde os restos de comida se acumulam - entre os dentes, nas gengivas, há muitos micróbios. Uma grande variedade de microrganismos vive na cavidade oral humana - cocos, bactérias lácticas, difteróides, anaeróbios, actinomicetos, fungos leveduriformes, espiroquetas e protozoários não patogênicos, etc. 1 ml de saliva contém milhões de células microbianas. E embora a saliva contenha a substância bactericida lisozima, que tem um efeito prejudicial sobre os microorganismos, muitos tipos de bactérias se enraizaram na cavidade oral, adquiriram resistência à lisozima e se multiplicaram bem em sua presença.
A placa mucosa de cor branca, amarela, vermelha ou marrom, que geralmente aparece na superfície dos dentes, consiste inteiramente de micróbios, que são os principais culpados da cárie dentária.
Entre os habitantes da cavidade oral dos animais estão micrococos, espiroquetas, micoplasmas, bactérias do ácido lático.
A microflora do trato gastrointestinal é diferente em diferentes departamentos. Os sucos das glândulas digestivas entram em diferentes seções do trato gastrointestinal e os alimentos entram em diferentes estágios da digestão, o que causa a criação de seu próprio ambiente específico em cada seção. Cada seção do canal digestivo tem seus próprios micróbios, acostumados a existir nessas condições.
No estômago de humanos e animais, apenas microorganismos resistentes a ácidos sobrevivem, incluindo microorganismos de ácido lático, bem como esporos de bactérias, fungos e actinomicetos. Somente com uma diminuição da acidez do suco gástrico no estômago, leveduras, sarcinas, bacilos formadores de esporos Bac.subtilis, Bac.mesentericus, putrefativos e outras bactérias começam a se multiplicar.
No proventrículo de ruminantes são encontrados ciliados, cocos, bactérias que degradam fibras e carboidratos, sintetizam vitaminas e proteínas.
No intestino delgado, apesar do pH alcalino do ambiente, existem poucos microrganismos, assim como no estômago. Isso se deve à ação desfavorável das enzimas para os microrganismos. Aqui apenas aqueles que são resistentes à ação da bile podem manifestar sua atividade vital. Estes incluem alguns tipos de bactérias de ácido lático e esporos, leveduras e fungos radiantes.
No intestino grosso, os resíduos de alimentos semi-digeridos permanecem por mais tempo do que no intestino delgado. A ação bactericida dos sucos digestivos não é afetada aqui, e os micróbios se multiplicam livre e abundantemente. Até 260 espécies de microorganismos foram encontrados no intestino grosso.
Todos os microrganismos encontrados no intestino grosso podem ser divididos em habitantes casuais e permanentes.
Os habitantes permanentes do intestino grosso incluem micróbios que quebram a celulose e hidrolisam o amido, bactérias do ácido lático. Nesta seção do intestino, variedades de Escherichia coli (E.coli), clostrídios (Cl.perfringens, Cl.sporogenes) são amplamente representadas, enterococos, estreptococos e estafilococos, bactérias do gênero Citrobacter. São encontradas bactérias putrefativas (Proteus vulgaris), leveduras, protozoários, campylobacter, esporos de bacilos, atinomycetes e fungos imperfeitos, vírus e outros microrganismos.
A microflora do intestino grosso de humanos e animais está mudando.
Assim, as bactérias do ácido láctico predominam em crianças, em adultos na maioria dos casos são encontrados bacteróides, bifidobactérias, Escherichia coli, estreptococos, etc.
Na área dos órgãos geniturinários, a microflora é encontrada apenas em suas partes externas. Entre os micróbios comuns das partes externas dos órgãos geniturinários, encontram-se cocos, bactérias resistentes a ácidos, difteróides, sarcinas, micoplasmas, bactérias fusimórficas, listeria, espiroquetas não patogênicas, Escherichia, Klebsiella, Proteus, andids, campylobacter, micobactérias.
A cavidade da bexiga e do útero, tanto em humanos quanto em animais, em seu estado normal, são estéreis.
A microflora da vagina muda ao longo da vida. Nas meninas, a flora coccal predomina. Em mulheres adultas - bacilo vaginal gram-positivo acidófilo - Bact.doderleini.
A microflora normal do corpo de humanos e animais foi e está sendo estudada por muitos cientistas, mas até agora seu significado para o macroorganismo não foi totalmente divulgado.
Microflora normal de humanos e animais Condição necessaria manter a saúde do macroorganismo. A violação de biocenoses microbianas em diferentes órgãos e sistemas do corpo leva ao desenvolvimento de processos patológicos, diminuição da atividade das defesas do corpo e desenvolvimento de disbacteriose. Se um recém-nascido é criado em condições estéreis, alimentado com alimentos estéreis, ou seja, privá-lo da microflora normal, ele se desenvolverá mal, ficará para trás no crescimento e poderá morrer.
Muitos dos microrganismos que vivem no corpo humano ou animal representam a microflora normal e são não patogênicos ou condicionalmente patogênicos em termos de patogenicidade. Representantes da microflora saprófita e condicionalmente patogênica que habitam o corpo de uma pessoa ou animal foram menos estudados no passado, uma vez que essa microflora era considerada inofensiva ao macroorganismo e a atenção principal era direcionada aos representantes da microflora patogênica.
Atualmente, a importância de micróbios não patogênicos na ocorrência e desenvolvimento de doenças em humanos aumentou para um problema que dificilmente pode ser superestimado.
Micróbios saprófitos e condicionalmente patogênicos que estão no corpo, ou penetrados do ambiente, sob certas condições no contexto de infecção, beribéri, excesso de trabalho físico e mental constante, hipotermia, Situações estressantes, a exposição à radiação, a depleção de proteínas e outros fatores podem causar tanto em humanos quanto em animais podem causar doenças infecciosas, que muitas vezes terminam em morte. A microflora residente da cavidade oral pode desempenhar um papel significativo em doenças de origem infecciosa (por exemplo, com agranulocitose), enquanto bacteróides, bactérias fusiformes, estreptococos, Ps.aeruginosa, C.albicans, St.aueus, E.cjli são encontrados .
Microrganismos como E.coli, Kl.pneumoniae, Pr.vulgaris, Cl.perfringens, St.aureus, que fazem parte da microflora intestinal normal, podem causar o desenvolvimento de processos inflamatórios e, muitas vezes, abscessos. Representantes da microflora residente podem se tornar agentes causadores de bacteremia e sepse. Microrganismos saprófitos e condicionalmente patogênicos podem causar o desenvolvimento de choque bacteriano, que se desenvolve como resultado da entrada simultânea no sangue de uma quantidade significativa de indivíduos microbianos e suas toxinas, ou mesmo apenas toxinas microbianas. O choque bacteriano ocorre após um início súbito de bacteremia em massa devido à infecção focal crônica que superou as barreiras protetoras, intervenção cirúrgica no contexto de um foco séptico. Muitas vezes, o choque bacteriano se desenvolve durante as manipulações do sistema geniturinário durante o período de infecção, durante a transfusão de sangue contaminado com micróbios, com infusões intravenosas prolongadas de medicamentos e nutrientes, com os quais as bactérias entram na corrente sanguínea. Os patógenos mais comuns do choque bacteriano são E.coli, Ps.aeruginosa, Proteus vulgaris, St.epidermidis, St.aureus, Kl. Pneumoniae, representantes do gênero Bacteroides, Cl.perfringens, estreptococo hemolítico, meningococo, pneumococo.
O choque bacteriano mais grave ocorre com uma infecção causada por Pseudomonas, Proteus, Escherichia. Quando o corpo está enfraquecido (hipotermia, lesões, exaustão, etc.), microorganismos que são residentes permanentes do trato respiratório superior podem causar várias doenças(bronquite, pneumonia, etc.), afetando o trato respiratório inferior. A microflora residente dos órgãos urogenitais, que inclui St.aureus, St.epidermidis, E.coli, Klebsiella sp., Cl.perfringens, candida, difteróides, vibrios, bacteróides, micoplasmas e outros microrganismos, pode causar o desenvolvimento de vulvite, uretrite, doença do útero, próstata, apêndices. Nas últimas décadas, em hospitais de instituições médicas, o número de pacientes nos quais representantes da microflora residente, patógenos oportunistas muitas vezes exigem processos inflamatórios purulentos graves, aumentou significativamente. Nos últimos anos, o número de pacientes com processos inflamatórios purulentos na região maxilofacial aumentou significativamente, principalmente em indivíduos com atividade reduzida de fatores de defesa naturais.
Entre os sorotipos enteropatogênicos de Escherichia coli, foram identificados agentes causadores de doenças gastrointestinais em bovinos jovens.
Fungos semelhantes a leveduras do gênero Candida são amplamente distribuídos na natureza e são habitantes permanentes do tegumento externo, membranas mucosas e trato gastrointestinal de humanos e animais. O papel etiológico de Candida albikans, C.tropicalis na ocorrência de abortos em vacas, coelhos, gatos, camundongos, cobaias. No estudo de preparações histológicas dos órgãos afetados (rins, baço, pulmões, fígado), são encontradas não apenas formas leveduriformes, mas também miceliais do fungo que cresce nos tecidos. Isso indica o desenvolvimento ativo do fungo no corpo. Espiroquetas patogênicas em porcos adultos causam leptospirose, e E. coli patogênica em leitões causa coli - bacteriose. Muitas vezes as infecções em animais são causadas por vírus. As pessoas, em contato direto com animais doentes ou com diversos substratos contaminados com micróbios secretados por esses animais, se infectam e adoecem.
As infecções antropozoonóticas mais perigosas são antraz, mormo, brucelose, tuberculose, peste, tripanossomíase, raiva e muitos outros.
Pesquisas realizadas por cientistas de todos os continentes ao longo de muitas décadas permitiram compreender o papel dos microrganismos não apenas na circulação de substâncias, mas também na ocorrência de doenças infecciosas em humanos, animais e plantas. Por milhões de anos, macro e micro-organismos se adaptaram mutuamente e se tornaram necessários uns aos outros. Micróbios - habitantes normais de um organismo animal ou vegetal tornaram-se companheiros integrais do macroorganismo e desempenham um papel significativo em sua vida.
Pseudomonas aeruginosa é uma bactéria Gram-negativa em forma de bastonete que é um aeróbio obrigatório. As dimensões deste microrganismo em espessura atingem até 0,8 mícrons e em comprimento até 3 mícrons. O microrganismo patogênico mais móvel que vive no ambiente aquático. Capaz muito tempo para ser e reproduzir com sucesso em uma atmosfera úmida e na água. A temperatura adequada para o desenvolvimento desse microrganismo é de 37 graus. Para humanos, esse microrganismo é condicionalmente patogênico, pois nunca afeta tecidos saudáveis.
Hepatite E - foi primeiramente estudada e descrita em 1983. É um microrganismo em forma de esfera com uma hélice de RNA. A hepatite E é transmitida principalmente pela água suja, pela via fecal-oral. A hepatite E é sazonal e é especialmente agravada no período outono-inverno.
Aeromonas spp. - pertence à família de bactérias gram-negativas que são em forma de bastonete, capazes de crescer tanto em um ambiente livre de oxigênio quanto em um ambiente com oxigênio. Quando infectado com este patógeno, ocorrem infecções agudas de dois tipos: tipo cólera, que é acompanhada de diarréia aquosa; uma infecção semelhante à disenteria, que é acompanhada por fezes com sangue. A infecção ocorre através da água contaminada, mas às vezes é transmitida através dos alimentos. Uma pessoa só pode ser infectada quando tem feridas abertas.
Shigella ou Shigella são bactérias aeróbicas gram-negativas não móveis expressas na forma de uma haste. Eles podem causar infecções intestinais em humanos. O nome comum para esta doença é disenteria. É transmitida através de água contaminada, alimentos sujos e utensílios domésticos sujos.
Vibrio cholerae, em tradução - cholera vibrio. Bastão Gram-negativo, pequeno em tamanho, em forma de vírgula. Pode desenvolver-se perfeitamente em temperaturas de 30 a 40 graus Celsius. Eles causam uma doença chamada cólera. Você pode se infectar muito facilmente através da água potável comum, que pegou essa bactéria. Ao tomar banho em corpos d'água poluídos e engolir essa água, a probabilidade de infecção também é alta.
Yersinia enterocolitica são bactérias gram-negativas que não formam esporos. São anaeróbios. Resistente às influências ambientais e pode ser armazenado por um longo tempo. A infecção com esta bactéria causa uma doença aguda chamada yersiniose em humanos. Eles danificam o trato gastrointestinal e levam à intoxicação do corpo, como resultado, o sistema musculoesquelético ou o fígado podem ser afetados.
Os enterovírus são vírus pequenos, de formato hexaédrico, que não possuem membrana, contêm uma única hélice de RNA e vivem por muito tempo em resíduos e água clorada. A doença mais grave que os enterovírus podem causar em humanos é a poliomielite.
Salmonella, ou salmonela, são aeróbios móveis Gram-negativos. Eles causam uma doença infecciosa chamada salmonelose.
Adenovírus - hoje existem cerca de 100 tipos desses vírus, 49 dos quais podem causar doenças em humanos. Afetam principalmente o sistema respiratório, olhos e linfonodos. Menos frequentemente afeta os intestinos e a bexiga.
44. Variabilidade fenotípica e genotípica de procariontes. O significado das mutações. Perspectivas para a engenharia genética.
Conceitos gerais.
Hereditariedade- a capacidade dos organismos vivos de manter certas características por muitas gerações. Variabilidade- a aquisição de novas características que os distinguem de outras gerações sob a influência de fatores ambientais. A ciência que estuda a hereditariedade e a variação é chamada de genética.
Fenótipo- o complexo geral de propriedades morfológicas e fisiológicas de cada indivíduo, e serve como uma manifestação externa do genótipo.
Genótipoé a quantidade total de genes que uma célula possui. Ele define todo um grupo de propriedades de um organismo que são específicas para uma determinada espécie.
Aproximadamente 500 espécies de microrganismos vivem no corpo humano, que compõem sua microflora normal. . O macroorganismo e sua microflora em condições normais estão em estado de equilíbrio dinâmico. eubiose), que se desenvolveu ao longo da evolução.
Sistemas biológicos abertos ( biótopos) que se comunicam com o ambiente são - pele, partes do trato respiratório localizadas até a glote, cavidade oral, trato gastrointestinal, membranas mucosas do gás, uretra anterior, vagina. Eles são colonizados por microorganismos, entre os quais as bactérias dominam. Protozoários e vírus são representados por um número muito menor de espécies.
Normalmente livre de microrganismos - sangue, líquido cefalorraquidiano, líquido sinovial, medula óssea, cavidade abdominal, cavidade pleural, útero .
A microflora natural de qualquer biótopo é dividida em residente(ou permanente) e transitório(ou aleatório).
Se constante microflora contém representantes específicos para um determinado biótopo, então aleatório consiste em indivíduos trazidos de fora. Assim, no trato gastrointestinal pode haver microrganismos estranhos que foram ingeridos com alimentos ou bebidas. A pele é mais frequentemente contaminada com microflora aleatória do ambiente. Na traqueia, brônquios, pulmões, esôfago microflora transitória também pode ser detectada.
Microflora permanente biótopo específico é relativamente estável em composição. Ao mesmo tempo, a composição e o papel fisiológico de seus microrganismos constituintes estão longe de ser equivalentes. Portanto, duas frações são distinguidas na microflora permanente: obrigar e opcional.
Microflora obrigatóriaé o principal componente de qualquer microbiocenose, neutraliza a colonização do biótopo por microorganismos aleatórios, participa dos processos de fermentação, imunoestimulação, ou seja, desempenha funções protetoras e várias outras funções fisiológicas.
Microflora facultativa constitui uma parte menor dos habitantes permanentes do biótopo. Se a microflora permanente se manifesta principalmente como uma atividade fermentativa (ou seja, a quebra de carboidratos com a formação de produtos ácidos), a fração facultativa está muito envolvida nos processos de putrefação (a quebra de substâncias proteicas com a formação de produtos alcalinos) .
Animais. O corpo de um animal mais ou menos grande representa um mundo inteiro para microrganismos com muitos nichos ecológicos. Em condições naturais, o corpo de qualquer animal é habitado por muitos microorganismos. Entre eles pode haver formas aleatórias, mas para muitas espécies o corpo do animal é o principal ou único habitat para eles. A natureza e os mecanismos de interação entre microrganismos e um macroorganismo são diversos e desempenham um papel decisivo na vida e evolução de muitos tipos de microrganismos. Para um animal, os microrganismos são um importante fator ecológico que determina muitos aspectos de suas mudanças evolutivas. A partir de posições modernas, a microflora normal é considerada como um conjunto de microbiocenoses que ocupam numerosos nichos ecológicos na pele e membranas mucosas de todas as cavidades do corpo abertas ao ambiente externo. Em uma parte significativa, a microflora é a mesma em todos os animais nos biótopos comparados, mas existem diferenças individuais na composição da microbiocenose. A automicroflora de um animal saudável permanece constante e é mantida pela homeostase. Tecidos e órgãos que não se comunicam com o meio externo são estéreis. O organismo e sua microflora normal constituem um único sistema ecológico: a microflora serve como uma espécie de "órgão extracorpóreo" que desempenha um papel importante na vida do animal. Sendo um fator biológico de proteção, a microflora normal é a barreira, após o rompimento da qual é induzida a inclusão de mecanismos de defesa não específicos.
Antagonismo microorganismos - um tipo de relação não simbiótica de microorganismos, em que uma cepa suprime completamente ou retarda o crescimento de outra. Pode ser observado tanto em condições naturais quanto em condições artificiais (laboratório). Microrganismos-antagonistas podem pertencer a qualquer grupo taxonômico. Via de regra, o antagonismo ocorre quando um microrganismo libera substâncias químicas com propriedades antibióticas que inibem o crescimento e a atividade vital de outros microrganismos. Nesse caso, o microrganismo que libera o produto químico ganha vantagem competitiva. Outros mecanismos também são possíveis. O antagonismo de microrganismos é generalizado no solo, onde há constante competição por espaço e nutrientes, Exemplo: supressão do bacilo da peste com Pseudomonas aeruginosa.
Comensalismo(de lat. com- "com", "juntos" e mensa- "mesa", "refeição"; literalmente "à mesa", "à mesma mesa"; anteriormente - companhia) - uma forma de coexistência (simbiose) de dois tipos diferentes organismos vivos, em que um dos parceiros desse sistema (o comensal) confia ao outro (o hospedeiro) a regulação de suas relações com o meio externo, mas não estabelece relações estreitas com ele. Exemplo: Um peixe preso a um tubarão.
Alguns microrganismos são habitantes permanentes do corpo animal. Outros temporários - vêm com água, ração, ar.
M / f pele. Pós-s: estafilococos, estreptococos, actinomicetos, sarcinas, kish-aya e Pseudomonas aeruginosa. Gravetos. Depende das condições de detenção.
M / f respiração. caminhos. Em um recém-nascido não. Estreptococos, estafilococos, actinomicetos, micoplasmas, fungos. e estremecer. cogumelos.
M / f estômago. Pobre devido ao suco gástrico e ambiente ácido. Sarcinas, bactérias lácticas, actinomicetos, enterococos.
M/f cicatriz. É mais rico devido a epífitas e solo m/f. Origem bioquímica complexa. e microbiol. processos envolvendo bactérias celulósicas. Bactérias putrefativas e fermentação.
M / f fino. Mais pobre. Enterococos, acidófilos, micróbios de esporos. actina, Escherichia coli.
M/f de espessura. O mais rico. Enterococos, staf, estreptococos, levedura, mofo, actina, putrefativo m/o. Tenha perebol-los nas fezes das reuniões. patógeno. m / o, que pode infectar pessoas saudáveis (convalescentes).
M/f trato urinário. órgãos. Em pessoas saudáveis apenas nas áreas externas. estafilococos, estreptococos, micrococos, micobactérias..
O papel do m / f: a formação da atividade imunológica, o antagonismo do m / f patogênico, afeta as funções do trato alimentar, leva em consideração os componentes da bile na circulação, a quebra de fibras e outros componentes da alimentação.
A distribuição é facilitada pelo tamanho pequeno, peso insignificante, uma enorme taxa de reprodução e a capacidade de adaptação às mudanças no ambiente. ambiente, fator de temperatura.
Na água a profundidade 10-100 cm mais povoada. Acima estão UFL. Auto-purificação do reservatório: corrente rápida, UFL, mineralização org. compostos por microorganismos, t. Na vida cotidiana - filtros. Nas águas limpas predominam os cocos, nas águas poluídas - os bacilos. Pode ser patogênico: antraz, brucelose, erisipela, pasteurelose .. Coli-título - mínimo (GOST 333) V de água em que se encontra 1 Escherichia coli. If-index - o número de Escherichia coli em 1 litro de água (GOST 2-3).
Ar - ambiente hostil para m/o. Mas uma curta permanência de microrganismos no ar é suficiente para a transmissão de patógenos dos pacientes. Depende da ventilação das instalações e das normas sanitárias e higiénicas. Saprófitas: micrococos, bastonetes, bolores e leveduras, actinomicetos. Condicionalmente patogênico: esporos de fungos. Patogênicos: micobactérias, pneumococos, estreptococos.
Determinação da microflora do ar e da água:
1. MCH: Para água - pegue uma amostra de água usando garrafas, faça diluições de 1:10, 1:100, despeje MPA, coloque em um termostato por 24 horas 37 graus, depois conte as colônias crescidas. A norma para água potável não é superior a 100 UFC (unidades formadoras de colônias).
Para o ar, o método de sedimentação (placa de Petri com MPA, termostato, contagem), o método de aspiração usando o aparelho Krotov (o dispositivo suga o ar, se instala em uma placa de Petri com um meio denso, contando), o método de filtração, incluindo o Método Dyakov (o ar é passado pelo MPA e as contas de vidro são preenchidas com um meio especial para estafilococos e estreptococos, contados)
2. Micróbios sanitários-indicativos: Para água - bactérias coliformes comuns (OKB 37 graus) e termotolerantes (TCB 44 graus) - bactérias do grupo Escherichia coli (CGB). O título de coli e o índice de coli também são determinados pelos métodos de filtros de membrana (os filtros de membrana são colocados em um filtro de amianto Seitz, a água é filtrada, transferida para Endo em uma placa de Petri com pinça, incubada, contada BGKP (Gr-, oxidase-, esporos-, lactose +) ), método de fermentação (inoculação em meio de Kessler com lactose, incubação, transferência para Endo, BGKP é calculado). Enterococos - ambiente alcalino-polimixina. Cl. Perfringens - meio Wilson-Blair, ágar sulfito de ferro.
Para ar - estreptococos hemolíticos, estafilococos (meios de sal - Chistovich).
3. Microrganismos patogênicos.
Intizarov Mikhail Mikhailovich, acadêmico da Academia Russa de Ciências Agrárias, prof..
PREFÁCIO
Ao considerar maneiras de combater muitas doenças infecciosas de etiologia bacteriana e viral, eles geralmente se concentram em microrganismos patogênicos - os agentes causadores dessas doenças e, com menos frequência, prestam atenção à microflora normal que acompanha o corpo do animal. Mas, em alguns casos, é a microflora comum que adquire grande importância na ocorrência ou desenvolvimento da doença, contribuindo ou impedindo sua manifestação. Às vezes, a microflora usual torna-se uma fonte daqueles agentes infecciosos patogênicos ou oportunistas que causam infecção endógena, manifestação de infecções secundárias, etc. um processo infeccioso causado por alguns microrganismos patogênicos. Portanto, conhecer a composição, propriedades, características quantitativas, significado biológico grupos diferentes e representantes da microflora normal do corpo (mamíferos, incluindo domésticos, animais de fazenda e humanos) devem ser médicos, biólogos, pecuaristas, professores universitários e cientistas.
Introdução
A microflora do organismo dos mamíferos, incluindo animais agrícolas, domésticos e humanos, começou a ser estudada juntamente com o desenvolvimento da microbiologia como ciência, com o advento das grandes descobertas de L. Pasteur, R. Koch, I. I. Mechnikov, seus alunos e funcionários. Assim, em 1885, T. Escherich isolou das fezes de crianças um representante obrigatório da microflora intestinal - Escherichia coli, encontrada em quase todos os mamíferos, aves, peixes, répteis, anfíbios, insetos, etc. Após 7 anos, os primeiros dados apareceu sobre a importância das varas intestinais para a atividade vital, saúde do macroorganismo. S. O. Jensen (1893) estabeleceu que tipos diferentes e cepas de Escherichia coli podem ser tanto patogênicas para animais (causando doença séptica e diarreia em bezerros) quanto não patogênicas, ou seja, habitantes completamente inofensivos e até benéficos dos intestinos de animais e humanos. Em 1900, G. Tissier descobriu nas fezes de recém-nascidos bifizhbakter "e - cal: e representantes obrigatórios da microflora intestinal normal do corpo em todos os períodos de sua vida. Bastões de ácido lático (L. acidophilus) foram isolados por Moreau em 1900.
Definições, terminologia
A microflora normal é uma biocenose aberta de microrganismos encontrados em pessoas e animais saudáveis (V. G. Petrovskaya, O. P. Marko, 1976). Esta biocenose deve ser característica de um organismo completamente saudável; é fisiológico, ou seja, ajuda a manter o estado saudável do macroorganismo, a administração correta de suas funções fisiológicas normais. Toda a microflora do corpo do animal também pode ser chamada de automicroflora (de acordo com o significado da palavra "auto"), ou seja, a microflora de qualquer composição (O.V. Chakhava, 1982) de um determinado organismo em condições normais e patológicas.
Microflora normal associada apenas a estado saudável organismo, vários autores subdividem em duas partes:
1) obrigar, parte permanente, formado na filogênese e ontogênese dentro o processo de evolução, que também é chamado de indígena (ou seja, local), autóctone (indígena), residente, etc.;
2) opcional ou transitório.
Microrganismos patogênicos que penetram acidentalmente no macroorganismo podem ser incluídos periodicamente na composição da automicroflora.
Composição de espécies e características quantitativasmicroflora das áreas mais importantes do corpo animal
Como regra, dezenas e centenas de espécies de vários microrganismos estão associadas ao organismo animal. Eles são , como V. G. Petrovskaya e O. P. Marko (1976) escrevem, eles são obrigatórios para o organismo como um todo. Muitos tipos de microrganismos são encontrados em muitas áreas do corpo, mudando apenas quantitativamente. Variações quantitativas são possíveis na mesma microflora dependendo do tipo de mamífero. A maioria dos animais é caracterizada por médias gerais para várias áreas de seu corpo. Por exemplo, as partes distais inferiores do trato gastrointestinal são caracterizadas pelos seguintes grupos microbianos detectados no conteúdo do intestino ou nas fezes (Tabela 1).
No topo da mesa 1. apenas microrganismos anaeróbicos obrigatórios são administrados - representantes da flora intestinal. Foi agora estabelecido que as espécies estritamente anaeróbicas no intestino representam 95-99%, enquanto as espécies totalmente aeróbicas e anaeróbicas facultativas representam os restantes 1-5%.
Apesar do fato de que dezenas e centenas (até 400) espécies conhecidas Assim, no ceco e cólon de alguns roedores, nas últimas décadas, estabeleceu-se a presença das chamadas bactérias filamentosas segmentadas, que estão intimamente associadas à superfície (glicocalix, borda em escova ) das células epiteliais da mucosa intestinal. A extremidade fina dessas bactérias longas e filamentosas está rebaixada entre as microvilosidades da borda em escova das células epiteliais e parece estar fixada ali de tal forma que pressiona as membranas celulares. Essas bactérias podem ser tão numerosas que, como a grama, cobrem a superfície da membrana mucosa. Estes também são anaeróbios estritos (representantes obrigatórios da microflora intestinal de roedores), espécies úteis para o corpo, normalizando amplamente as funções intestinais. No entanto, essas bactérias foram detectadas apenas por métodos bacterioscópicos (usando microscopia eletrônica de varredura de cortes da parede intestinal). Bactérias filamentosas não crescem em meios nutrientes conhecidos por nós, elas só podem sobreviver em meios densos de ágar por não mais que uma semana) J . P. Koopman et. ai., 1984).
A distribuição de microrganismos no trato gastrointestinal
Devido à alta acidez do suco gástrico, o estômago contém um pequeno número de microrganismos; Esta é principalmente uma microflora resistente a ácidos - lactobacilos, estreptococos, leveduras, sardinhas, etc. O número de micróbios é de 10 3 / g de conteúdo.
Microflora do duodeno e jejuno
Existem microorganismos no trato intestinal. Se eles não estivessem em nenhum departamento, a peritonite de etiologia microbiana não ocorreria quando o intestino fosse lesionado. Apenas nas partes proximais do intestino delgado existem menos tipos de microflora do que no intestino grosso. Estes são lactobacilos, enterococos, sardinhas, cogumelos, nas seções inferiores o número de bifidobactérias, Escherichia coli aumenta. Quantitativamente, esta microflora pode diferir em diferentes indivíduos. Um grau mínimo de contaminação é possível (10 1 - 10 3 / g de conteúdo), e um significativo - 10 3 - 10 4 / g A quantidade e composição da microflora do intestino grosso são apresentadas na Tabela 1.
Microflora da pele
Os principais representantes da microflora da pele são difterias (corinebactérias, bactérias propiônicas), fungos, levedura, esporos bacilos aeróbicos (bacilos), estafilococos (principalmente S. epidermidis predomina, mas S. aureus está presente em pequenas quantidades na pele saudável).
A microflora do trato respiratório
Nas membranas mucosas do trato respiratório, a maioria dos microrganismos está na nasofaringe, atrás da laringe seu número é muito menor, ainda menos nos grandes brônquios e nas profundezas dos pulmões corpo saudável sem microflora.
Nas passagens nasais existem difteróides, principalmente bactérias da raiz, estafilococos constantes (S. epidermidis residentes), Neisseria, bactérias hemofílicas, estreptococos (alfa-hemolíticos); na nasofaringe - corinebactérias, estreptococos (S. mitts, S. salivarius, etc.), estafilococos, neisseoii, vayloNella, bactérias hemofílicas, enterobactérias, bacteróides, fungos, enterococos, lactobacilos, Pseudomonas aeruginosa, bacilos aeróbios tipo B. subtil são mais transitório é etc.
A microflora das partes mais profundas do trato respiratório tem sido menos estudada (A - Halperin - Scott et al., 1982). Em humanos, isso se deve às dificuldades de obtenção de material. Em animais, o material é mais acessível para pesquisa (pode-se usar animais abatidos). Estudamos a microflora do trato respiratório médio em suínos saudáveis, incluindo sua variedade em miniatura (laboratório); os resultados são apresentados na Tabela 1. 2.
Os primeiros quatro representantes foram detectados constantemente (100%), menos residentes (1/2-1/3 casos) foram estabelecidos: lactobacilos (10 2 -10 3), E. coli (10 2 -III 3), fungos de mofo ( 10 2 -10 4), levedura. Outros autores notaram o transporte transitório de Proteus, Pseudomonas aeruginosa, Clostridia, representantes de bacilos aeróbicos. No mesmo plano, identificamos uma vez Bacteroides melaninoge - nicus.
Microflora do canal de nascimento de mamíferos
Pesquisar anos recentes, principalmente autores estrangeiros (Boyd, 1987; A. B. Onderdonk et al., 1986; J. M. Miller et al., 1986; A. N. Masfari et al., 1986; H. Knothe u. a. 1987), mostraram que a microflora que coloniza (ou seja, habita) as membranas mucosas do canal do parto são muito diversas e ricas em espécies. Os componentes da microflora normal são amplamente representados; ela contém muitos microrganismos estritamente anaeróbios (Tabela 3).
Se compararmos as espécies microbianas do canal do parto com a microflora de outras áreas do corpo, descobrimos que a microflora do canal do parto da mãe é semelhante a esse respeito aos principais grupos de habitantes microbianos do corpo. do futuro organismo jovem, ou seja, os representantes obrigatórios de sua microflora normal, o animal recebe ao passar pelo canal de parto da mãe. O estabelecimento posterior do corpo de um animal jovem ocorre a partir dessa ninhada de uma microflora evolutivamente fundamentada obtida da mãe. Deve-se notar que em uma mulher saudável, o feto no útero é estéril até o início do parto.
No entanto, a microflora normal corretamente formada (selecionada no processo de evolução) do organismo animal em na íntegra habita seu corpo não imediatamente, mas em poucos dias, conseguindo se multiplicar em certas proporções. V. Brown dá a seguinte seqüência de sua formação nos primeiros 3 dias de vida de um recém-nascido: as bactérias são encontradas nas primeiras amostras retiradas do corpo de um recém-nascido imediatamente após o nascimento. Assim, na mucosa nasal, os estafilococos coagulase-negativos (S. epidermidis) predominaram inicialmente; na membrana mucosa da faringe - os mesmos estafilococos e estreptococos, bem como uma pequena quantidade de epterobactérias. No reto no 1º dia, E. coli, enterococos, os mesmos estafilococos já foram encontrados e, no terceiro dia após o nascimento, uma biocenose microbiana foi estabelecida, principalmente normal para a microflora normal do intestino grosso (W. Braun, F. Spenckcr u.a., 1987).
Diferenças na microflora do corpo de diferentes espécies animais
Os representantes obrigatórios acima da microflora são característicos da maioria dos mamíferos domésticos, agrícolas e do corpo humano. Dependendo do tipo de animal, o número de grupos microbianos pode mudar, mas não sua composição de espécies. Em cães, o número de Escherichia coli e lactobacilos no intestino grosso é o mesmo mostrado na Tabela. 1. No entanto, as bifidobactérias foram uma ordem de magnitude menor (10 8 por 1 g), uma ordem de magnitude maior foram estreptococos (S. lactis, S. mitis, enterococos) e clostrídios. Em ratos e camundongos (laboratório), o número de bacilos lácticos (lactobacilos) foi aumentado na mesma quantidade, mais estreptococos e clostrídios. Esses animais têm microflora intestinal havia poucas Escherichia coli e o número de bifidobactérias foi reduzido. O número de Escherichia coli também é reduzido em cobaias (de acordo com V. I. Orlovsky). Nas fezes de cobaias, de acordo com nossa pesquisa, Escherichia coli estavam contidas na faixa de 10 3 -10 4 por 1 g. 2 em 1 g) e lactobacilos.
Em suínos saudáveis (de acordo com nossos dados), a microflora da traqueia e dos grandes brônquios nem quantitativa nem qualitativamente diferiu significativamente dos indicadores médios e é muito semelhante à microflora humana. Sua microflora intestinal também foi caracterizada por uma certa semelhança.
A microflora do rúmen de ruminantes é caracterizada por características específicas. Isso se deve em grande parte à presença de bactérias - quebradores de fibras. No entanto, bactérias celulolíticas (e bactérias fibrolíticas em geral), características do trato digestivo de ruminantes, não são de forma alguma simbiontes desses animais isoladamente. Assim, no ceco de suínos e de muitos herbívoros, tais divisores de fibras de celulose e hemicelulose, comuns em ruminantes, como Bacteroides succinogenes, Ruminococcus flavefaciens, Bacteroides ruminicola e outros desempenham um papel importante (V. H. Varel, 1987).
Microflora normal do corpo e microorganismos patogênicos
Os macroorganismos obrigatórios, listados acima, são principalmente representantes da microflora pepatogênica. Muitas das espécies incluídas nesses grupos são até chamadas de simbiontes do macroorganismo (lactobacilos, bifeldobactérias) e são úteis para isso. Certas funções benéficas foram identificadas em muitas espécies não patogênicas de clostrídios, bacteróides, eubactérias, enterococos, Escherichia coli não patogênicas, etc. Esses e outros representantes da microflora do corpo são chamados de microflora "normal". Mas microorganismos menos inofensivos, oportunistas e altamente patogênicos são incluídos na microbiocenose fisiológica para um macroorganismo de tempos em tempos. No futuro, esses patógenos podem:
a) existem mais ou menos por muito tempo no corpo
como parte de todo o complexo de sua automicroflora; em tais casos, o transporte de micróbios patogênicos é formado, mas quantitativamente, no entanto, a microflora normal prevalece;
b) ser expulso (rapidamente ou um pouco mais tarde) do macroorganismo por representantes simbióticos úteis da microflora normal e eliminado;
c) multiplicam-se expulsando a microflora normal de tal forma que, com certo grau de colonização do macroorganismo, podem causar a doença correspondente.
Nos intestinos de animais e humanos, por exemplo, além de certos tipos de clostrídios não patogênicos, C. perfringens vive em pequeno número. Como parte de toda a microflora de um animal saudável, a quantidade de C. perfringens não excede 10-15 milhões por 1 g. No entanto, se houver certas condições associadas, possivelmente, a violações na microflora normal, C. perfrtngens patogênico se multiplica na mucosa intestinal em grande número (10 7 -10 9 ou mais), causando infecção anaeróbica. Nesse caso, chega a deslocar a microflora normal e pode ser detectado na cata escarificada da mucosa do íleo em cultura quase pura. De maneira semelhante, o desenvolvimento da infecção intestinal por coli ocorre no intestino delgado em animais jovens, apenas os tipos patogênicos de Escherichia coli se multiplicam com a mesma rapidez; na cólera, a superfície da mucosa intestinal é colonizada por Vibrio cholerae, etc.
Papel biológico (valor funcional) da microflora normal
Microrganismos patogênicos e condicionalmente patogênicos durante a vida de um animal entram em contato e penetram periodicamente em seu corpo, sendo incluídos na composição do complexo geral da microflora. Se esses microrganismos não podem causar doenças imediatamente, eles coexistem com outra microflora do corpo por algum tempo, mas são mais frequentemente transitórios. Assim, para a cavidade oral, de microrganismos patogênicos e oportunistas facultativos transitórios, P, aeruginosa, C. perfringens, C. albicans, representantes (dos gêneros Esoherichia, Klebsiella, Proteus) podem ser típicos; para os intestinos, também são enterobactérias mais patogênicas, bem como B fragilis, C. tetani, C. sporogenes, Fusobacterium necrophorum, alguns representantes do gênero Campylobacter, espiroquetas intestinais (incluindo patogênicas, condicionalmente patogênicas) e muitas outras. aureus; para o trato respiratório - também é pneumococo, etc.
No entanto, o papel e o significado da microflora normal simbiótica útil do corpo é que ela não permite facilmente que esses microrganismos patogênicos facultativos transitórios entrem em seu ambiente, nos nichos ecológicos espaciais já ocupados por ele. Os representantes acima da parte autóctone da microflora normal foram os primeiros, mesmo durante a passagem do recém-nascido pelo canal de parto da mãe, a ocupar seu lugar no corpo do animal, ou seja, colonizaram sua pele, e tratos respiratórios, genitais e outras áreas do corpo.
Mecanismos que impedem a colonização (assentamento) da microflora patogênica do corpo do animal
Foi estabelecido que as maiores populações de autóctones, parte obrigatória da microflora normal ocupam lugares característicos no intestino, uma espécie de território no microambiente intestinal (D. Savage, 1970). Estudamos essa característica ecológica das bifidobactérias, bacteróides e descobrimos que elas não estão distribuídas uniformemente no quimo por toda a cavidade do tubo intestinal, mas se espalham em tiras e camadas de muco (mucinas) seguindo todas as curvas da superfície da mucosa membrana do intestino delgado. Em parte, eles são adjacentes à superfície das células epiteliais da mucosa. Como as bifidobactérias, bacteróides e outros colonizam essas sub-regiões do microambiente intestinal primeiro, eles criam obstáculos para que muitos patógenos que mais tarde entram no intestino se aproximem e se fixem (adesão) na mucosa. E este é um dos fatores principais, uma vez que foi estabelecido que, para realizar sua patogenicidade (a capacidade de causar uma doença), quaisquer microrganismos patogênicos, incluindo aqueles que causam infecções intestinais, devem aderir à superfície das células epiteliais intestinais, em seguida, multiplique-se ou, tendo penetrado mais profundamente, colonize as mesmas sub-regiões ou próximas, em cuja área já se formaram enormes populações, por exemplo, bifidobactérias. Acontece que, neste caso, a bifidoflora de um organismo saudável protege a mucosa intestinal de alguns patógenos, limitando seu acesso à superfície dos epiteliócitos da membrana e aos receptores nas células epiteliais, nas quais os micróbios patogênicos precisam ser fixados.
Para muitos representantes da parte autóctone da microflora normal, são conhecidos vários outros mecanismos de antagonismo em relação à microflora patogênica e condicionalmente patogênica:
Produção de ácidos graxos voláteis com uma cadeia curta de átomos de carbono (são formados por uma parte estritamente anaeróbica da microflora normal);
Formação de metabólitos biliares livres (lactobacilos, bifidobactérias, bacteróides, enterococos e muitos outros podem formá-los por desconjugação de sais biliares);
Produção de lisozima (típica de lactobacilos, bifidobactérias);
Acidificação do meio ambiente, durante a produção de ácidos orgânicos;
Produção de colicinas e bacteriocinas (estreptococos, estafilococos, Escherichia coli, Neisseria, bactérias propiônicas, etc.);
Síntese de várias substâncias semelhantes a antibióticos por muitos microrganismos do ácido lático - Streptococcus lactis, L. acidophilus, L. fermentum, L. breve, L. helveticus, L. pjantarum, etc.;
Competição de microrganismos não patogênicos relacionados a espécies patogênicas com espécies patogênicas pelos mesmos receptores nas células do macroorganismo, aos quais seus parentes patogênicos também devem ser fixados;
Absorção por micróbios simbióticos da composição da microflora normal de alguns componentes e elementos importantes dos recursos nutricionais (por exemplo, ferro) necessários para a vida dos micróbios patogênicos.
Muitos desses mecanismos e fatores que existem em representantes da microflora do corpo do animal, combinados e interagindo, criam uma espécie de efeito barreira - um obstáculo à reprodução de microrganismos oportunistas e patogênicos em determinadas áreas do corpo do animal. A resistência de um macroorganismo à colonização por patógenos, criada por sua microflora usual, é chamada de resistência à colonização. Essa resistência à colonização pela microflora patogênica é criada principalmente por um complexo de espécies úteis de microrganismos estritamente anaeróbios que fazem parte da microflora normal: vários representantes dos gêneros - Bifidobacterium, Bacteroides, Eubacterium, Fusobacterium, Clostridium (não patogênico), como bem como anaeróbios facultativos, por exemplo, o gênero Lactobacil - lus , E. coli não patogênica , S. faecalis, S. faecium e outros. É esta parte dos representantes estritamente anaeróbicos da microflora normal do corpo que domina em termos do número de populações em toda a microflora intestinal em 95-99%. Por essas razões, a microflora normal do corpo é frequentemente considerada como um fator adicional na resistência inespecífica do corpo de um animal e humano saudável.
É muito importante criar e observar as condições sob as quais o assentamento do recém-nascido com microflora normal é formado direta ou indiretamente. Especialistas veterinários, trabalhadores administrativos e econômicos, criadores de gado devem preparar adequadamente as mães para o parto, realizar o parto, garantir colostro e alimentação de leite aos recém-nascidos. É necessário tratar cuidadosamente o estado da microflora normal do canal do parto.
Os veterinários devem ter em mente que a microflora normal do canal de parto de fêmeas saudáveis é aquela criação fisiologicamente baseada de microrganismos benéficos, que determinará o desenvolvimento correto de toda a microflora do corpo do futuro animal. Se o nascimento não for complicado, a microflora não deve ser perturbada por influências terapêuticas, preventivas e outras injustificadas; não introduza antissépticos no canal do parto sem evidências suficientemente convincentes, use antibióticos deliberadamente.
conceitocerca dedisbacteriose
Há casos em que a proporção de espécies evolutivamente estabelecida na microflora normal é violada, ou as proporções quantitativas entre os grupos de microrganismos mais importantes na automicroflora do corpo mudam, ou a qualidade dos próprios representantes microbianos muda. Neste caso, ocorre disbacteriose. E isso abre caminho para representantes patogênicos e oportunistas da automicroflora, que podem invadir ou se multiplicar no corpo e causar doenças, disfunções, etc. A estrutura correta da microflora normal que se desenvolveu no processo de evolução, seu estado eubiótico, conter a parte oportunista dentro de certos limites automicroflora do organismo animal.
Papel morfofuncional e função metabólica da automicroflora do corpo
A automicroflora afeta o macroorganismo após seu nascimento de tal maneira que, sob sua influência, a estrutura e as funções de vários órgãos em contato com o ambiente externo amadurecem e se formam. Desta forma, os tratos gastrointestinal, respiratório, urogenital e outros órgãos adquirem sua aparência morfofuncional em um animal adulto. Nova área aranhas biológicas - a gnotobiologia, que vem se desenvolvendo com sucesso desde a época de L. Pasteur, permitiu entender muito claramente que muitas características imunobiológicas de um organismo animal adulto e normalmente desenvolvido são formadas sob a influência da automicroflora de seu corpo. Animais livres de microrganismos (gnotobiotas) obtidos por cesariana e depois mantidos por muito tempo em isoladores gnotobibológicos especiais estéreis sem nenhum acesso a eles de qualquer microflora viável têm características do estado embrionário das mucosas que se comunicam com o ambiente externo do órgãos. Seu status imunobiológico também mantém características embrionárias. Observar hipoplasia do tecido linfóide em primeiro lugar desses órgãos. Animais livres de microrganismos têm menos elementos celulares imunocompetentes e imunoglobulinas. No entanto, é característico que o organismo de tal animal gnotobiótico permaneça potencialmente capaz de desenvolver capacidades imunobiológicas, e somente devido à ausência de estímulos antigênicos provenientes da automicroflora em animais comuns (a partir do nascimento), ele não sofreu uma reação natural. desenvolvimento que afeta todo o sistema imunológico em geral, e acúmulos linfóides locais das membranas mucosas de órgãos como o intestino, trato respiratório, olho, nariz, ouvido, etc. Assim, no processo desenvolvimento individual do organismo animal, é de sua automicroflora que decorrem os efeitos, inclusive os estímulos antigênicos, que determinam o estado imunomorfofuncional normal de um animal adulto comum.
A microflora do corpo animal, em particular a microflora do trato gastrointestinal, desempenha importantes funções metabólicas para o corpo: afeta a absorção no intestino delgado, suas enzimas estão envolvidas na degradação e metabolismo dos ácidos biliares no intestino e forma ácidos graxos incomuns no trato digestivo. Sob a influência da microflora, há um catabolismo de algumas enzimas digestivas do macroorganismo no intestino; enteroquinase, fosfatase alcalina são inativadas, se decompõem, algumas imunoglobulinas do trato digestivo que cumpriram sua função são decompostas no intestino grosso, etc. A microflora do trato gastrointestinal está envolvida na síntese de muitas vitaminas necessárias para o macroorganismo. Seus representantes (por exemplo, vários tipos de bacteróides, estreptococos anaeróbicos, etc.) com suas enzimas são capazes de quebrar fibras, substâncias pectina que são indigeríveis pelo corpo animal por conta própria.
Alguns métodos de monitoramento do estado da microflora do corpo animal
Monitorar o estado da microflora em animais específicos ou seus grupos permitirá a correção oportuna de alterações indesejáveis em uma importante parte autóctone da microflora normal, corrigir violações devido à introdução artificial de representantes bacterianos benéficos, como bifidobactérias ou lactobacilos, etc., e prevenir o desenvolvimento de disbacteriose em formas muito graves. Tal controle é viável se, no momento oportuno, forem realizados estudos microbiológicos de composição de espécies e proporções quantitativas, principalmente na microflora autóctone estritamente anaeróbia de algumas áreas do corpo do animal. Para o exame bacteriológico, o muco é retirado das membranas mucosas, do conteúdo dos órgãos ou mesmo do tecido do próprio órgão.
Levando material. Para o estudo do intestino grosso, podem ser utilizadas fezes coletadas especialmente com o auxílio de tubos estéreis - cateteres - ou de outras formas em pratos estéreis. Às vezes é necessário tomar o conteúdo de diferentes partes do trato gastrointestinal ou de outros órgãos. Isso é possível principalmente após o abate dos animais. Desta forma, o material pode ser obtido do jejuno, duodeno, estômago, etc. A coleta de segmentos do intestino junto com seu conteúdo permite determinar a microflora tanto da cavidade do canal alimentar quanto da parede intestinal através da preparação de raspados, homogenatos de mucosa ou parede intestinal. A coleta de material de animais após o abate também permite determinar de forma mais completa e abrangente a microflora normal do trato respiratório superior e médio genérico (traqueia, brônquios, etc.).
Pesquisa quantitativa. Para determinar as quantidades de microrganismos diferentes, o material retirado do animal de uma forma ou de outra é usado para preparar diluições de 9-10 vezes (de 10 1 a 10 10) em uma solução salina estéril ou alguma (correspondente ao tipo de micróbio) meio nutriente líquido estéril. Em seguida, a partir de cada diluição, começando da menos para a mais concentrada, são semeadas nos meios nutrientes apropriados.
Uma vez que as amostras estudadas são substratos biológicos com microflora mista, é necessário selecionar os meios para que cada um satisfaça as necessidades de crescimento do gênero ou espécie microbiana desejada e simultaneamente iniba o crescimento de outras microfloras acompanhantes. Portanto, é desejável que a mídia seja seletiva. De acordo com o papel biológico e significado na microflora normal, sua parte autóctone estritamente anaeróbica é mais importante. As técnicas para sua detecção são baseadas no uso de meios nutrientes apropriados e métodos especiais de cultivo anaeróbio; a maioria dos microrganismos estritamente anaeróbios listados acima podem ser cultivados em um meio nutriente novo, enriquecido e universal No. 105 por A. K. Baltrashevich et al. (1978). Este meio tem uma composição complexa e, portanto, pode satisfazer as necessidades de crescimento de uma ampla variedade de microflora. A receita para este ambiente pode ser encontrada no manual "Fundamentos teóricos e práticos da gnotobiologia" (M.: Kolos, 1983). Várias opções Este meio (sem adição de sangue estéril, com sangue, denso, semilíquido, etc.) de meio No. 105 em tubos de ensaio.
As bifidobactérias também crescem neste meio se 1% de lactose for adicionado a ele. No entanto, devido ao número extremamente grande de componentes nem sempre disponíveis e à composição complexa do meio nº 105, podem surgir dificuldades na sua fabricação. Portanto, é mais conveniente usar o meio de Blaurock, que não é menos eficaz quando se trabalha com bifidobactérias, mas é mais simples e mais acessível de fabricar (Goncharova G.I., 1968). Sua composição e preparação: caldo de fígado - 1000 ml, ágar-ágar - 0,75 g, peptona - 10 g, lactose - 10 g, cistina - 0,1 g, sal de mesa (x / h) - 5 g. decocção: 500 g de fresco fígado bovino cortado em pedaços pequenos, despeje 1 litro de água destilada e deixe ferver por 1 hora; defender e filtrar através de um filtro de gaze de algodão, completar com água destilada até o volume original. Agar-agar derretido, peptona e cistina são adicionados a esta decocção; ajustar pH = 8,1-8,2 com hidróxido de sódio a 20% e ferver por 15 minutos; deixe repousar 30 min e filtro. O filtrado é levado até 1 litro com água destilada e a lactose é adicionada a ele. Em seguida, é derramado em tubos de ensaio de 10-15 ml e esterilizado com fluxo de vapor fracionado (Blokhina I.N., Voronin E.S. et al., 1990).'
Para conferir propriedades seletivas a esses meios, é necessário introduzir agentes apropriados que inibam o crescimento de outras microfloras. Para detectar bacteróides - é neomicina, canamicina; para bactérias curvadas em espiral (por exemplo, espiroquetas intestinais) - espectinomicina; para cocos anaeróbicos do gênero Veillonella - vancomicina. Para isolar bifidobactérias e outros anaeróbios gram-positivos de populações mistas de microflora, azida sódica é adicionada ao meio.
Para determinar o conteúdo quantitativo de lactobacilos no material, é aconselhável usar o ágar sal Rogosa. Propriedades seletivas são conferidas a ele pela adição de ácido acético, que cria pH = 5,4 neste meio.
Um meio não seletivo para lactobacilos pode ser um hidrolisado de leite com giz: a um litro de leite desnatado pasteurizado (pH -7,4-7,6) que não contém impurezas antibióticas, adicione 1 g de pancreatina em pó e 5 ml de clorofórmio; agite periodicamente; colocar por 72 horas em um termostato a 40 ° C. Em seguida, filtrar, definir pH = 7,0-7,2 e esterilizar a 1 atm. 10 min. O hidrolisado resultante é diluído com água 1:2, 45 g de pó de giz esterilizado por calor e 1,5-2% de ágar-ágar são adicionados, aquecidos até o ágar derreter e esterilizados novamente em autoclave. O meio é inclinado antes do uso. Opcionalmente, qualquer agente de seleção pode ser adicionado ao meio.
É possível identificar e determinar o nível de estafilococos em um meio nutriente bastante simples - ágar carne-peptona de sal de glicose (MPA com 10% de sal e 1-2% de glicose); enterobactérias - no meio Endo e outros meios, cujas prescrições podem ser encontradas em quaisquer manuais de microbiologia; leveduras e fungos - em meio de Sabouraud. É aconselhável detectar actinomicetos em meio SR-1 de Krasilnikov, consistindo em 0,5 fosfato de potássio dibásico. 0,5 g de sulfato de magnésio, 0,5 g de cloreto de sódio, 1,0 g de nitrato de potássio, 0,01 g de sulfato de ferro, 2 g de carbonato de cálcio, 20 g de amido, 15-20 g de ágar-ágar e até 1 litro de destilado água. Dissolver todos os ingredientes, misturar, aquecer até o ágar derreter, ajustar pH = 7, filtrar, despejar em tubos de ensaio, esterilizar em autoclave a 0,5 atm. 15 minutos, corte antes de semear.
Para detectar enterococos, um meio seletivo (ágar-M) é desejável em uma versão simplificada da seguinte composição: a 1 litro de MPA estéril fundido adicionar 4 g de fosfato dissubstituído dissolvido em uma quantidade mínima de água destilada estéril 400 mg de também dissolvido aeido de sódio; 2 g de glicose dissolvida (ou solução estéril preparada de glicose a 40% - 5 ml). Mova tudo. Depois que a mistura esfriar a cerca de 50 ° C, adicione TTX (cloreto de 2,3,5-trifeniltetrazólio) - 100 mg dissolvidos em água destilada estéril. Misture, não esterilize o meio, despeje imediatamente em placas de Petri estéreis ou tubos de ensaio. Entero cocos crescem neste meio como pequenas colônias cinza-esbranquiçadas. Mas mais frequentemente, devido à mistura de TTX, as colônias de euterococos adquirem uma cor cereja escura (toda a colônia ou seu centro).
Bastões de esporos aeróbicos (B. subtilis e outros) são facilmente identificados após aquecimento do material de teste a 80°C por 30 minutos. Em seguida, o material aquecido é semeado sem MPA ou 1MPB, e após a incubação usual (37°C com acesso ao oxigênio), a presença desses bacilos é determinada pelo seu crescimento na superfície do meio na forma de um filme ( na MPB).
O número de corinebactérias em materiais de diferentes áreas do corpo do animal pode ser determinado usando o meio de Buchin (disponível em forma pronta pelo Instituto de Meios Nutrientes Secos do Daguestão). Pode ser enriquecido com até 5% de sangue estéril. Neisseria é detectada em meio de Bergea com ristomicina: adicionar 1% de maltose estéril dissolvida em água destilada a 1 litro de ágar Hottinger fundido (MPA menos desejável) (10 g de maltose podem ser dissolvidos em uma quantidade mínima de água e fervidos em banho-maria ), 15 ml 2% de uma solução de azul aquoso (azul de anilina solúvel em água), uma solução de ristomicina; cálculo 6,25 unidades. por 1 ml de meio. Misture, não esterilize, despeje em placas de Petri estéreis ou tubos de ensaio. Os cocos Gram-negativos do gênero Neisseria crescem na forma de pequenas e médias colônias de cor azul ou azul. As bactérias Hemophilus podem ser isoladas em meio de ágar chocolate (de sangue de cavalo) com bacitracina como agente seletivo. .
Métodos para detecção de microrganismos condicionalmente patogênicos (Pseudomonas aeruginosa, Proteus, Klebsiella, etc.). Bem conhecido ou pode ser encontrado na maioria dos manuais bacteriológicos.
REFERÊNCIAS
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