Microflora do trato gastrointestinal de animais. Microflora normal de humanos e animais. Papel biológico, formas de estudar

Intizarov Mikhail Mikhailovich, acadêmico da Academia Russa de Ciências Agrárias, prof..

PREFÁCIO

Ao considerar maneiras de combater muitas doenças infecciosas de etiologia bacteriana e viral, eles geralmente se concentram em microrganismos patogênicos - os agentes causadores dessas doenças e, com menos frequência, prestam atenção à microflora normal que acompanha o corpo do animal. Mas, em alguns casos, é a microflora comum que adquire grande importância na ocorrência ou desenvolvimento da doença, contribuindo ou impedindo sua manifestação. Às vezes, a microflora usual torna-se uma fonte daqueles agentes infecciosos patogênicos ou oportunistas que causam infecção endógena, manifestação de infecções secundárias, etc. um processo infeccioso causado por alguns microrganismos patogênicos. Portanto, conhecer a composição, propriedades, características quantitativas, significado biológico grupos diferentes e representantes da microflora normal do corpo (mamíferos, incluindo domésticos, animais de fazenda e humanos) devem ser médicos, biólogos, pecuaristas, professores universitários e cientistas.

Introdução

A microflora do organismo dos mamíferos, incluindo animais agrícolas, domésticos e humanos, começou a ser estudada juntamente com o desenvolvimento da microbiologia como ciência, com o advento das grandes descobertas de L. Pasteur, R. Koch, I. I. Mechnikov, seus alunos e funcionários. Assim, em 1885, T. Escherich isolou das fezes de crianças um representante obrigatório da microflora intestinal - Escherichia coli, encontrada em quase todos os mamíferos, aves, peixes, répteis, anfíbios, insetos, etc. Após 7 anos, os primeiros dados apareceu sobre a importância das varas intestinais para a atividade vital, saúde do macroorganismo. S. O. Jensen (1893) estabeleceu que tipos diferentes e cepas de Escherichia coli podem ser tanto patogênicas para animais (causando doença séptica e diarreia em bezerros) quanto não patogênicas, ou seja, habitantes completamente inofensivos e até benéficos dos intestinos de animais e humanos. Em 1900, G. Tissier descobriu nas fezes de recém-nascidos bifizhbakter "e - cal: e representantes obrigatórios da microflora intestinal normal do corpo em todos os períodos de sua vida. Bastões de ácido lático (L. acidophilus) foram isolados por Moreau em 1900.

Definições, terminologia

A microflora normal é uma biocenose aberta de microrganismos encontrados em pessoas e animais saudáveis (V. G. Petrovskaya, O. P. Marko, 1976). Esta biocenose deve ser característica de um organismo completamente saudável; é fisiológico, ou seja, ajuda a manter o estado saudável do macroorganismo, a administração correta de suas funções fisiológicas normais. Toda a microflora do corpo do animal também pode ser chamada de automicroflora (de acordo com o significado da palavra "auto"), ou seja, a microflora de qualquer composição (O.V. Chakhava, 1982) de um determinado organismo em condições normais e patológicas.

Microflora normal associada apenas a estado saudável organismo, vários autores subdividem em duas partes:

1) obrigar, parte permanente, formado na filogênese e ontogênese dentro o processo de evolução, que também é chamado de indígena (ou seja, local), autóctone (indígena), residente, etc.;

2) opcional ou transitório.

Microrganismos patogênicos que penetram acidentalmente no macroorganismo podem ser incluídos periodicamente na composição da automicroflora.

Composição de espécies e características quantitativasmicroflora das áreas mais importantes do corpo animal

Como regra, dezenas e centenas de espécies de vários microrganismos estão associadas ao organismo animal. Eles são , como V. G. Petrovskaya e O. P. Marko (1976) escrevem, eles são obrigatórios para o organismo como um todo. Muitos tipos de microrganismos são encontrados em muitas áreas do corpo, mudando apenas quantitativamente. Variações quantitativas são possíveis na mesma microflora dependendo do tipo de mamífero. A maioria dos animais é caracterizada por médias gerais para várias áreas de seu corpo. Por exemplo, as partes distais inferiores do trato gastrointestinal são caracterizadas pelos seguintes grupos microbianos detectados no conteúdo do intestino ou nas fezes (Tabela 1).

No topo da mesa 1. apenas microrganismos anaeróbicos obrigatórios são administrados - representantes da flora intestinal. Foi agora estabelecido que as espécies estritamente anaeróbicas no intestino representam 95-99%, enquanto as espécies totalmente aeróbicas e anaeróbicas facultativas representam os restantes 1-5%.

Apesar do fato de que dezenas e centenas (até 400) espécies conhecidas Assim, no ceco e cólon de alguns roedores, nas últimas décadas, estabeleceu-se a presença das chamadas bactérias filamentosas segmentadas, que estão intimamente associadas à superfície (glicocalix, borda em escova ) das células epiteliais da mucosa intestinal. A extremidade fina dessas bactérias longas e filamentosas está rebaixada entre as microvilosidades da borda em escova das células epiteliais e parece estar fixada ali de tal forma que pressiona as membranas celulares. Essas bactérias podem ser tão numerosas que, como a grama, cobrem a superfície da membrana mucosa. Estes também são anaeróbios estritos (representantes obrigatórios da microflora intestinal de roedores), espécies úteis para o corpo, normalizando amplamente as funções intestinais. No entanto, essas bactérias foram detectadas apenas por métodos bacterioscópicos (usando microscopia eletrônica de varredura de cortes da parede intestinal). Bactérias filamentosas não crescem em meios nutrientes conhecidos por nós, elas só podem sobreviver em meios densos de ágar por não mais que uma semana) J . P. Koopman et. ai., 1984).

A distribuição de microrganismos no trato gastrointestinal

Devido à alta acidez do suco gástrico, o estômago contém um pequeno número de microrganismos; Esta é principalmente uma microflora resistente a ácidos - lactobacilos, estreptococos, leveduras, sardinhas, etc. O número de micróbios é de 10 3 / g de conteúdo.

Microflora do duodeno e jejuno

Existem microorganismos no trato intestinal. Se eles não estivessem em nenhum departamento, a peritonite de etiologia microbiana não ocorreria quando o intestino fosse lesionado. Apenas nas partes proximais do intestino delgado existem menos tipos de microflora do que no intestino grosso. Estes são lactobacilos, enterococos, sardinhas, cogumelos, nas seções inferiores o número de bifidobactérias, Escherichia coli aumenta. Quantitativamente, esta microflora pode diferir em diferentes indivíduos. Um grau mínimo de contaminação é possível (10 1 - 10 3 / g de conteúdo), e um significativo - 10 3 - 10 4 / g A quantidade e composição da microflora do intestino grosso são apresentadas na Tabela 1.

Microflora da pele

Os principais representantes da microflora da pele são difterias (corinebactérias, bactérias propiônicas), fungos, levedura, esporos bacilos aeróbicos (bacilos), estafilococos (principalmente S. epidermidis predomina, mas não na pele saudável em grande número S também está presente. aureus).

A microflora do trato respiratório

Nas membranas mucosas do trato respiratório, a maioria dos microrganismos está na nasofaringe, atrás da laringe seu número é muito menor, ainda menos nos grandes brônquios e nas profundezas dos pulmões corpo saudável sem microflora.

Nas passagens nasais existem difteróides, principalmente bactérias da raiz, estafilococos constantes (S. epidermidis residentes), Neisseria, bactérias hemofílicas, estreptococos (alfa-hemolíticos); na nasofaringe - corinebactérias, estreptococos (S. mitts, S. salivarius, etc.), estafilococos, neisseoii, vayloNella, bactérias hemofílicas, enterobactérias, bacteróides, fungos, enterococos, lactobacilos, Pseudomonas aeruginosa, bacilos aeróbios tipo B. subtil são mais transitório é etc.

A microflora das partes mais profundas do trato respiratório tem sido menos estudada (A - Halperin - Scott et al., 1982). Em humanos, isso se deve às dificuldades de obtenção de material. Em animais, o material é mais acessível para pesquisa (pode-se usar animais abatidos). Estudamos a microflora do trato respiratório médio em suínos saudáveis, incluindo sua variedade em miniatura (laboratório); os resultados são apresentados na Tabela 1. 2.

Os primeiros quatro representantes foram detectados constantemente (100%), menos residentes (1/2-1/3 casos) foram estabelecidos: lactobacilos (10 2 -10 3), E. coli (10 2 -III 3), fungos de mofo ( 10 2 -10 4), levedura. Outros autores notaram o transporte transitório de Proteus, Pseudomonas aeruginosa, Clostridia, representantes de bacilos aeróbicos. No mesmo plano, identificamos uma vez Bacteroides melaninoge - nicus.

Microflora do canal de nascimento de mamíferos

Estudos recentes, principalmente de autores estrangeiros (Boyd, 1987; A. B. Onderdonk et al., 1986; J. M. Miller et al., 1986; A. N. Masfari et al., 1986; H. Knothe u A. 1987) mostraram que a microflora que coloniza (ou seja, habita) as membranas mucosas do canal do parto são muito diversas e ricas em espécies. Os componentes da microflora normal são amplamente representados; ela contém muitos microrganismos estritamente anaeróbios (Tabela 3).

Se compararmos as espécies microbianas do canal do parto com a microflora de outras áreas do corpo, descobrimos que a microflora do canal do parto da mãe é semelhante a esse respeito aos principais grupos de habitantes microbianos do corpo. do futuro organismo jovem, ou seja, os representantes obrigatórios de sua microflora normal, o animal recebe ao passar pelo canal de parto da mãe. O estabelecimento posterior do corpo de um animal jovem ocorre a partir dessa ninhada de uma microflora evolutivamente fundamentada obtida da mãe. Deve-se notar que em uma mulher saudável, o feto no útero é estéril até o início do parto.

No entanto, a microflora normal corretamente formada (selecionada no processo de evolução) do organismo animal em na íntegra habita seu corpo não imediatamente, mas em poucos dias, conseguindo se multiplicar em certas proporções. V. Brown dá a seguinte seqüência de sua formação nos primeiros 3 dias de vida de um recém-nascido: as bactérias são encontradas nas primeiras amostras retiradas do corpo de um recém-nascido imediatamente após o nascimento. Assim, na mucosa nasal, os estafilococos coagulase-negativos (S. epidermidis) predominaram inicialmente; na membrana mucosa da faringe - os mesmos estafilococos e estreptococos, bem como uma pequena quantidade de epterobactérias. No reto no 1º dia, E. coli, enterococos, os mesmos estafilococos já foram encontrados e, no terceiro dia após o nascimento, uma biocenose microbiana foi estabelecida, principalmente normal para a microflora normal do intestino grosso (W. Braun, F. Spenckcr u.a., 1987).

Diferenças na microflora do corpo tipos diferentes animais

Os representantes obrigatórios acima da microflora são característicos da maioria dos mamíferos domésticos, agrícolas e do corpo humano. Dependendo do tipo de animal, o número de grupos microbianos pode mudar, mas não sua composição de espécies. Em cães, o número de Escherichia coli e lactobacilos no intestino grosso é o mesmo mostrado na Tabela. 1. No entanto, as bifidobactérias foram uma ordem de magnitude menor (10 8 por 1 g), uma ordem de magnitude maior foram estreptococos (S. lactis, S. mitis, enterococos) e clostrídios. Em ratos e camundongos (laboratório), o número de bacilos lácticos (lactobacilos) foi aumentado na mesma quantidade, mais estreptococos e clostrídios. Esses animais têm microflora intestinal havia poucas Escherichia coli e o número de bifidobactérias foi reduzido. O número de Escherichia coli também é reduzido em cobaias (de acordo com V. I. Orlovsky). Nas fezes de cobaias, de acordo com nossa pesquisa, Escherichia coli estavam contidas na faixa de 10 3 -10 4 por 1 g. 2 em 1 g) e lactobacilos.

Em suínos saudáveis (de acordo com nossos dados), a microflora da traqueia e dos grandes brônquios nem quantitativa nem qualitativamente diferiu significativamente dos indicadores médios e é muito semelhante à microflora humana. Sua microflora intestinal também foi caracterizada por uma certa semelhança.

A microflora do rúmen de ruminantes é caracterizada por características específicas. Isso se deve em grande parte à presença de bactérias - quebradores de fibras. No entanto, bactérias celulolíticas (e bactérias fibrolíticas em geral), características do trato digestivo de ruminantes, não são de forma alguma simbiontes desses animais isoladamente. Assim, no ceco de suínos e de muitos herbívoros, tais divisores de fibras de celulose e hemicelulose, comuns em ruminantes, como Bacteroides succinogenes, Ruminococcus flavefaciens, Bacteroides ruminicola e outros desempenham um papel importante (V. H. Varel, 1987).

Microflora normal do corpo e microorganismos patogênicos

Os macroorganismos obrigatórios, listados acima, são principalmente representantes da microflora pepatogênica. Muitas das espécies incluídas nesses grupos são até chamadas de simbiontes do macroorganismo (lactobacilos, bifeldobactérias) e são úteis para isso. Certas funções benéficas foram identificadas em muitas espécies não patogênicas de clostrídios, bacteróides, eubactérias, enterococos, Escherichia coli não patogênicas, etc. Esses e outros representantes da microflora do corpo são chamados de microflora "normal". Mas microorganismos menos inofensivos, oportunistas e altamente patogênicos são incluídos na microbiocenose fisiológica para um macroorganismo de tempos em tempos. No futuro, esses patógenos podem:

a) existem mais ou menos por muito tempo no corpo
como parte de todo o complexo de sua automicroflora; em tais casos, o transporte de micróbios patogênicos é formado, mas quantitativamente, no entanto, a microflora normal prevalece;

b) ser expulso (rapidamente ou um pouco mais tarde) do macroorganismo por representantes simbióticos úteis da microflora normal e eliminado;

c) multiplicam-se expulsando a microflora normal de tal forma que, com certo grau de colonização do macroorganismo, podem causar a doença correspondente.

Nos intestinos de animais e humanos, por exemplo, além de certos tipos de clostrídios não patogênicos, C. perfringens vive em pequeno número. Como parte de toda a microflora de um animal saudável, a quantidade de C. perfringens não excede 10-15 milhões por 1 g. No entanto, sob certas condições, possivelmente associadas a distúrbios na microflora normal, C. perfringens patogênico se multiplica no mucosa intestinal em grande número (10 7 -10 9 ou mais), causando infecção anaeróbica. Nesse caso, chega a deslocar a microflora normal e pode ser detectado na cata escarificada da mucosa do íleo em cultura quase pura. De maneira semelhante, o desenvolvimento da infecção intestinal por coli ocorre no intestino delgado em animais jovens, apenas os tipos patogênicos de Escherichia coli se multiplicam com a mesma rapidez; na cólera, a superfície da mucosa intestinal é colonizada por Vibrio cholerae, etc.

Papel biológico (valor funcional) da microflora normal

Microrganismos patogênicos e condicionalmente patogênicos durante a vida de um animal entram em contato e penetram periodicamente em seu corpo, sendo incluídos na composição do complexo geral da microflora. Se esses microrganismos não podem causar doenças imediatamente, eles coexistem com outra microflora do corpo por algum tempo, mas são mais frequentemente transitórios. Assim, para a cavidade oral, de microrganismos patogênicos e oportunistas facultativos transitórios, P, aeruginosa, C. perfringens, C. albicans, representantes (dos gêneros Esoherichia, Klebsiella, Proteus) podem ser típicos; para os intestinos, também são enterobactérias mais patogênicas, bem como B fragilis, C. tetani, C. sporogenes, Fusobacterium necrophorum, alguns representantes do gênero Campylobacter, espiroquetas intestinais (incluindo patogênicas, condicionalmente patogênicas) e muitas outras. aureus; para o trato respiratório - também é pneumococo, etc.

No entanto, o papel e o significado da microflora normal simbiótica útil do corpo é que ela não permite facilmente que esses microrganismos patogênicos facultativos transitórios entrem em seu ambiente, nos nichos ecológicos espaciais já ocupados por ele. Os representantes acima da parte autóctone da microflora normal foram os primeiros, mesmo durante a passagem do recém-nascido pelo canal de parto da mãe, a ocupar seu lugar no corpo do animal, ou seja, colonizaram sua pele, e tratos respiratórios, genitais e outras áreas do corpo.

Mecanismos que impedem a colonização (assentamento) da microflora patogênica do corpo do animal

Foi estabelecido que as maiores populações de autóctones, parte obrigatória da microflora normal ocupam lugares característicos no intestino, uma espécie de território no microambiente intestinal (D. Savage, 1970). Estudamos essa característica ecológica das bifidobactérias, bacteróides e descobrimos que elas não estão distribuídas uniformemente no quimo por toda a cavidade do tubo intestinal, mas se espalham em tiras e camadas de muco (mucinas) seguindo todas as curvas da superfície da mucosa membrana do intestino delgado. Em parte, eles são adjacentes à superfície das células epiteliais da mucosa. Como as bifidobactérias, bacteróides e outros colonizam essas sub-regiões do microambiente intestinal primeiro, eles criam obstáculos para que muitos patógenos que mais tarde entram no intestino se aproximem e se fixem (adesão) na mucosa. E este é um dos fatores principais, uma vez que foi estabelecido que, para realizar sua patogenicidade (a capacidade de causar uma doença), quaisquer microrganismos patogênicos, incluindo aqueles que causam infecções intestinais, devem aderir à superfície das células epiteliais intestinais, em seguida, multiplique-se ou, tendo penetrado mais profundamente, colonize as mesmas sub-regiões ou próximas, em cuja área já se formaram enormes populações, por exemplo, bifidobactérias. Acontece que, neste caso, a bifidoflora de um organismo saudável protege a mucosa intestinal de alguns patógenos, limitando seu acesso à superfície dos epiteliócitos da membrana e aos receptores nas células epiteliais, nas quais os micróbios patogênicos precisam ser fixados.

Para muitos representantes da parte autóctone da microflora normal, são conhecidos vários outros mecanismos de antagonismo em relação à microflora patogênica e condicionalmente patogênica:

Produção de ácidos graxos voláteis com uma cadeia curta de átomos de carbono (são formados por uma parte estritamente anaeróbica da microflora normal);

Formação de metabólitos biliares livres (lactobacilos, bifidobactérias, bacteróides, enterococos e muitos outros podem formá-los por desconjugação de sais biliares);

Produção de lisozima (típica de lactobacilos, bifidobactérias);

Acidificação do meio ambiente, durante a produção de ácidos orgânicos;

Produção de colicinas e bacteriocinas (estreptococos, estafilococos, Escherichia coli, Neisseria, bactérias propiônicas, etc.);

Síntese de várias substâncias semelhantes a antibióticos por muitos microrganismos do ácido lático - Streptococcus lactis, L. acidophilus, L. fermentum, L. breve, L. helveticus, L. pjantarum, etc.;

Competição de microrganismos não patogênicos relacionados a espécies patogênicas com espécies patogênicas pelos mesmos receptores nas células do macroorganismo, aos quais seus parentes patogênicos também devem ser fixados;

Absorção por micróbios simbióticos da composição da microflora normal de alguns componentes e elementos importantes dos recursos nutricionais (por exemplo, ferro) necessários para a vida dos micróbios patogênicos.

Muitos desses mecanismos e fatores que existem em representantes da microflora do corpo do animal, combinados e interagindo, criam uma espécie de efeito barreira - um obstáculo à reprodução de microrganismos oportunistas e patogênicos em determinadas áreas do corpo do animal. A resistência de um macroorganismo à colonização por patógenos, criada por sua microflora usual, é chamada de resistência à colonização. Essa resistência à colonização pela microflora patogênica é criada principalmente por um complexo de espécies úteis de microrganismos estritamente anaeróbios que fazem parte da microflora normal: vários representantes dos gêneros - Bifidobacterium, Bacteroides, Eubacterium, Fusobacterium, Clostridium (não patogênico), como bem como anaeróbios facultativos, por exemplo, o gênero Lactobacil - lus , E. coli não patogênica , S. faecalis, S. faecium e outros. É esta parte dos representantes estritamente anaeróbicos da microflora normal do corpo que domina em termos do número de populações em toda a microflora intestinal em 95-99%. Por essas razões, a microflora normal do corpo é frequentemente considerada como um fator adicional na resistência inespecífica do corpo de um animal e humano saudável.

É muito importante criar e observar as condições sob as quais o assentamento do recém-nascido com microflora normal é formado direta ou indiretamente. Especialistas veterinários, trabalhadores administrativos e econômicos, criadores de gado devem preparar adequadamente as mães para o parto, realizar o parto, garantir colostro e alimentação de leite aos recém-nascidos. É necessário tratar cuidadosamente o estado da microflora normal do canal do parto.

Os veterinários devem ter em mente que a microflora normal do canal de parto de fêmeas saudáveis é aquela criação fisiologicamente baseada de microrganismos benéficos, que determinará o desenvolvimento correto de toda a microflora do corpo do futuro animal. Se o nascimento não for complicado, a microflora não deve ser perturbada por influências terapêuticas, preventivas e outras injustificadas; não introduza antissépticos no canal do parto sem evidências suficientemente convincentes, use antibióticos deliberadamente.

conceitocerca dedisbacteriose

Há casos em que a proporção de espécies evolutivamente estabelecida na microflora normal é violada, ou as proporções quantitativas entre os grupos de microrganismos mais importantes na automicroflora do corpo mudam, ou a qualidade dos próprios representantes microbianos muda. Neste caso, ocorre disbacteriose. E isso abre caminho para representantes patogênicos e oportunistas da automicroflora, que podem invadir ou se multiplicar no corpo e causar doenças, disfunções, etc. A estrutura correta da microflora normal que se desenvolveu no processo de evolução, seu estado eubiótico, conter a parte oportunista dentro de certos limites automicroflora do organismo animal.

Papel morfofuncional e função metabólica da automicroflora do corpo

A automicroflora afeta o macroorganismo após seu nascimento de tal maneira que, sob sua influência, a estrutura e as funções de vários órgãos em contato com o ambiente externo amadurecem e se formam. Desta forma, os tratos gastrointestinal, respiratório, urogenital e outros órgãos adquirem sua aparência morfofuncional em um animal adulto. Um novo campo de aranhas biológicas - gnotobiologia, que vem se desenvolvendo com sucesso desde a época de L. Pasteur, tornou possível entender muito claramente que muitas características imunobiológicas de um organismo animal adulto e normalmente desenvolvido são formadas sob a influência da automicroflora de seu corpo. Animais livres de microrganismos (gnotobiotas) obtidos por cesariana e depois mantidos por muito tempo em isoladores gnotobibológicos especiais estéreis sem nenhum acesso a eles de qualquer microflora viável têm características do estado embrionário das mucosas que se comunicam com o ambiente externo do órgãos. Seu status imunobiológico também mantém características embrionárias. Observar hipoplasia do tecido linfóide em primeiro lugar desses órgãos. Animais livres de microrganismos têm menos elementos celulares imunocompetentes e imunoglobulinas. No entanto, é característico que o organismo de tal animal gnotobiótico permaneça potencialmente capaz de desenvolver capacidades imunobiológicas, e somente devido à ausência de estímulos antigênicos provenientes da automicroflora em animais comuns (a partir do nascimento), ele não sofreu uma reação natural. desenvolvimento que afeta todo o sistema imunológico em geral, e acúmulos linfóides locais das membranas mucosas de órgãos como o intestino, trato respiratório, olho, nariz, ouvido, etc. Assim, no processo desenvolvimento individual do organismo animal, é de sua automicroflora que decorrem os efeitos, inclusive os estímulos antigênicos, que determinam o estado imunomorfofuncional normal de um animal adulto comum.

A microflora do corpo animal, em particular a microflora do trato gastrointestinal, desempenha importantes funções metabólicas para o corpo: afeta a absorção no intestino delgado, suas enzimas estão envolvidas na degradação e metabolismo dos ácidos biliares no intestino e forma ácidos graxos incomuns no trato digestivo. Sob a influência da microflora, há um catabolismo de algumas enzimas digestivas do macroorganismo no intestino; enteroquinase, fosfatase alcalina são inativadas, se decompõem, algumas imunoglobulinas do trato digestivo que cumpriram sua função são decompostas no intestino grosso, etc. A microflora do trato gastrointestinal está envolvida na síntese de muitas vitaminas necessárias para o macroorganismo. Seus representantes (por exemplo, vários tipos de bacteróides, estreptococos anaeróbicos, etc.) com suas enzimas são capazes de quebrar fibras, substâncias pectina que são indigeríveis pelo corpo animal por conta própria.

Alguns métodos de monitoramento do estado da microflora do corpo animal

Monitorar o estado da microflora em animais específicos ou seus grupos permitirá a correção oportuna de alterações indesejáveis em uma importante parte autóctone da microflora normal, corrigir violações devido à introdução artificial de representantes bacterianos benéficos, como bifidobactérias ou lactobacilos, etc., e prevenir o desenvolvimento de disbacteriose em formas muito graves. Tal controle é viável se, no momento oportuno, forem realizados estudos microbiológicos de composição de espécies e proporções quantitativas, principalmente na microflora autóctone estritamente anaeróbia de algumas áreas do corpo do animal. Para o exame bacteriológico, o muco é retirado das membranas mucosas, do conteúdo dos órgãos ou mesmo do tecido do próprio órgão.

Levando material. Para o estudo do intestino grosso, podem ser utilizadas fezes coletadas especialmente com o auxílio de tubos estéreis - cateteres - ou de outras formas em pratos estéreis. Às vezes é necessário tomar o conteúdo de diferentes partes do trato gastrointestinal ou de outros órgãos. Isso é possível principalmente após o abate dos animais. Desta forma, o material pode ser obtido do jejuno, duodeno, estômago, etc. A coleta de segmentos do intestino junto com seu conteúdo permite determinar a microflora tanto da cavidade do canal alimentar quanto da parede intestinal através da preparação de raspados, homogenatos de mucosa ou parede intestinal. A coleta de material de animais após o abate também permite determinar de forma mais completa e abrangente a microflora normal do trato respiratório superior e médio genérico (traqueia, brônquios, etc.).

Pesquisa quantitativa. Para determinar as quantidades de microrganismos diferentes, o material retirado do animal de uma forma ou de outra é usado para preparar diluições de 9-10 vezes (de 10 1 a 10 10) em uma solução salina estéril ou alguma (correspondente ao tipo de micróbio) meio nutriente líquido estéril. Em seguida, a partir de cada diluição, começando da menos para a mais concentrada, são semeadas nos meios nutrientes apropriados.

Uma vez que as amostras estudadas são substratos biológicos com microflora mista, é necessário selecionar os meios para que cada um satisfaça as necessidades de crescimento do gênero ou espécie microbiana desejada e simultaneamente iniba o crescimento de outras microfloras acompanhantes. Portanto, é desejável que a mídia seja seletiva. De acordo com o papel biológico e significado na microflora normal, sua parte autóctone estritamente anaeróbica é mais importante. As técnicas para sua detecção são baseadas no uso de meios nutrientes apropriados e métodos especiais de cultivo anaeróbio; a maioria dos microrganismos estritamente anaeróbicos listados acima pode ser cultivada em um meio nutriente novo, enriquecido e universal No. 105 por A. K. Baltrashevich et al. (1978). Este meio tem uma composição complexa e, portanto, pode satisfazer as necessidades de crescimento de uma ampla variedade de microflora. A receita para este ambiente pode ser encontrada no manual "Fundamentos teóricos e práticos da gnotobiologia" (M.: Kolos, 1983). Várias opções Este meio (sem adição de sangue estéril, com sangue, denso, semilíquido, etc.) de meio No. 105 em tubos de ensaio.

As bifidobactérias também crescem neste meio se 1% de lactose for adicionado a ele. No entanto, devido ao número extremamente grande de componentes nem sempre disponíveis e à composição complexa do meio nº 105, podem surgir dificuldades na sua fabricação. Portanto, é mais conveniente usar o meio de Blaurock, que não é menos eficaz quando se trabalha com bifidobactérias, mas é mais simples e mais acessível de fabricar (Goncharova G.I., 1968). Sua composição e preparação: caldo de fígado - 1000 ml, ágar-ágar - 0,75 g, peptona - 10 g, lactose - 10 g, cistina - 0,1 g, sal de mesa (x / h) - 5 g. decocção: 500 g de fresco fígado bovino cortado em pedaços pequenos, despeje 1 litro de água destilada e deixe ferver por 1 hora; defender e filtrar através de um filtro de gaze de algodão, completar com água destilada até o volume original. Agar-agar derretido, peptona e cistina são adicionados a esta decocção; ajustar pH = 8,1-8,2 com hidróxido de sódio a 20% e ferver por 15 minutos; deixe repousar 30 min e filtro. O filtrado é levado até 1 litro com água destilada e a lactose é adicionada a ele. Em seguida, é derramado em tubos de ensaio de 10-15 ml e esterilizado com fluxo de vapor fracionado (Blokhina I.N., Voronin E.S. et al., 1990).'

Para conferir propriedades seletivas a esses meios, é necessário introduzir agentes apropriados que inibam o crescimento de outras microfloras. Para detectar bacteróides - é neomicina, canamicina; para bactérias curvadas em espiral (por exemplo, espiroquetas intestinais) - espectinomicina; para cocos anaeróbicos do gênero Veillonella - vancomicina. Para isolar bifidobactérias e outros anaeróbios gram-positivos de populações mistas de microflora, azida sódica é adicionada ao meio.

Para determinar o conteúdo quantitativo de lactobacilos no material, é aconselhável usar o ágar sal Rogosa. Propriedades seletivas são conferidas a ele pela adição de ácido acético, que cria pH = 5,4 neste meio.

Um meio não seletivo para lactobacilos pode ser um hidrolisado de leite com giz: a um litro de leite desnatado pasteurizado (pH -7,4-7,6) que não contém impurezas antibióticas, adicionar 1 g de pancreatina em pó e 5 ml de clorofórmio; agite periodicamente; colocar por 72 horas em um termostato a 40 ° C. Em seguida, filtrar, definir pH = 7,0-7,2 e esterilizar a 1 atm. 10 min. O hidrolisado resultante é diluído com água 1:2, 45 g de pó de giz esterilizado por calor e 1,5-2% de ágar-ágar são adicionados, aquecidos até o ágar derreter e esterilizados novamente em autoclave. O meio é inclinado antes do uso. Opcionalmente, qualquer agente de seleção pode ser adicionado ao meio.

É possível identificar e determinar o nível de estafilococos em um meio nutriente bastante simples - ágar carne-peptona de sal de glicose (MPA com 10% de sal e 1-2% de glicose); enterobactérias - no meio Endo e outros meios, cujas prescrições podem ser encontradas em quaisquer manuais de microbiologia; leveduras e fungos - em meio de Sabouraud. É aconselhável detectar actinomicetos em meio SR-1 de Krasilnikov, consistindo em 0,5 fosfato de potássio dibásico. 0,5 g de sulfato de magnésio, 0,5 g de cloreto de sódio, 1,0 g de nitrato de potássio, 0,01 g de sulfato de ferro, 2 g de carbonato de cálcio, 20 g de amido, 15-20 g de ágar-ágar e até 1 litro de destilado água. Dissolver todos os ingredientes, misturar, aquecer até o ágar derreter, ajustar pH = 7, filtrar, despejar em tubos de ensaio, esterilizar em autoclave a 0,5 atm. 15 minutos, corte antes de semear.

Para detectar enterococos, um meio seletivo (ágar-M) é desejável em uma versão simplificada da seguinte composição: a 1 litro de MPA estéril fundido adicionar 4 g de fosfato dissubstituído dissolvido em uma quantidade mínima de água destilada estéril 400 mg de também dissolvido aeido de sódio; 2 g de glicose dissolvida (ou solução estéril preparada de glicose a 40% - 5 ml). Mova tudo. Depois que a mistura esfriar a cerca de 50 ° C, adicione TTX (cloreto de 2,3,5-trifeniltetrazólio) - 100 mg dissolvidos em água destilada estéril. Misture, não esterilize o meio, despeje imediatamente em placas de Petri estéreis ou tubos de ensaio. Entero cocos crescem neste meio como pequenas colônias cinza-esbranquiçadas. Mas mais frequentemente, devido à mistura de TTX, as colônias de euterococos adquirem uma cor cereja escura (toda a colônia ou seu centro).

Bastões de esporos aeróbicos (B. subtilis e outros) são facilmente identificados após aquecimento do material de teste a 80°C por 30 minutos. Em seguida, o material aquecido é semeado sem MPA ou 1MPB, e após a incubação usual (37°C com acesso ao oxigênio), a presença desses bacilos é determinada pelo seu crescimento na superfície do meio na forma de um filme ( na MPB).

O número de corinebactérias em materiais de diferentes áreas do corpo do animal pode ser determinado usando o meio de Buchin (disponível em forma pronta pelo Instituto de Meios Nutrientes Secos do Daguestão). Pode ser enriquecido com até 5% de sangue estéril. Neisseria é detectada em meio de Bergea com ristomicina: adicionar 1% de maltose estéril dissolvida em água destilada a 1 litro de ágar Hottinger fundido (MPA menos desejável) (10 g de maltose podem ser dissolvidos em uma quantidade mínima de água e fervidos em banho-maria ), 15 ml 2% de uma solução de azul aquoso (azul de anilina solúvel em água), uma solução de ristomicina; cálculo 6,25 unidades. por 1 ml de meio. Misture, não esterilize, despeje em placas de Petri estéreis ou tubos de ensaio. Os cocos Gram-negativos do gênero Neisseria crescem na forma de pequenas e médias colônias de cor azul ou azul. As bactérias Hemophilus podem ser isoladas em meio de ágar chocolate (de sangue de cavalo) com bacitracina como agente seletivo. .

Métodos para detecção de microrganismos condicionalmente patogênicos (Pseudomonas aeruginosa, Proteus, Klebsiella, etc.). Bem conhecido ou pode ser encontrado na maioria dos manuais bacteriológicos.

REFERÊNCIAS

Básico

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Recentemente, o interesse pela microflora indígena (própria) de animais agrícolas e domésticos e métodos para sua correção aumentou significativamente. A questão da possibilidade da existência de animais e do homem na ausência de microorganismos foi levantada pela primeira vez por Louis Pasteur (citado em 10). De acordo com ideias modernas, em um habitat natural, é necessária uma simbiose de um macroorganismo com a microflora que o habita. Animais não microbianos (e plantas) podem viver e se desenvolver apenas em condições de isolamento artificial (ambiente estéril). A microflora normal de animais e humanos persiste constantemente no organismo de um hospedeiro saudável e interage com ele de acordo com o princípio da simbiose. A flora indígena é representada por microbiocenoses (certas comunidades de microrganismos) que se formam em nichos naturais (biótopos) dos sistemas fisiológicos do macroorganismo (trato digestivo, aparelho respiratório e urogenital, pele, etc.) em contato com o meio externo. Em qualquer microbiocenose, uma característica para uma determinada espécie (obrigatória, residente) e uma microflora ocasional (facultativa, temporária, transitória) são distinguidas. Em cada um dos biótopos, próprios, diferentes dos demais, formam-se condições para a existência e interação dos microrganismos que os habitam. Portanto, as espécies e a composição quantitativa da flora em diferentes biocenoses apresentam diferenças significativas. A este respeito, existem conceitos como a microecologia dos intestinos, pele, genitais, trato respiratório superior, cavidade oral, etc. Um organismo vivo contém um grande número de células de microrganismos simbiontes (chega a 1014). Sua diversidade de espécies (mais de 400 espécies) garante a participação da microflora normal em uma ampla variedade de funções fisiológicas do macroorganismo (13, 14). Uma das funções mais importantes da microflora normal é garantir a resistência à colonização (RC) tanto em relação a microrganismos estranhos que penetram no organismo hospedeiro quanto em limitar a reprodução de seus representantes individuais fora de seus habitats. Com a diminuição do CR, ocorre um desequilíbrio na composição qualitativa e quantitativa da flora indígena. Devido ao aumento no crescimento de populações individuais de microrganismos, estes últimos colonizam a pele e as membranas mucosas do macroorganismo, e também observam a expansão da área de distribuição de representantes da microflora oportunista (condicionalmente patogênica), incluindo aeróbios e anaeróbios, sua translocação em órgãos internos . Isso leva a processos inflamatórios purulentos, septicemia. A transmissão de fatores de resistência a antibióticos e patogenicidade entre comunidades bacterianas está aumentando (1, 8, 16). As microbiocenoses mais complexas dos mamíferos são a microflora do intestino grosso, boca e nasofaringe. Composição qualitativa e quantitativa da microflora da superfície da pele, bem como das membranas mucosas da cavidade nasal, genitais, etc. mais escasso. Portanto, a microflora indígena do intestino tem um impacto significativo no estado das microbiocenoses de outros biótopos de um organismo vivo. A composição da flora normal do trato gastrointestinal de um cão adulto saudável (Tabela 1) é estável e, na ausência de alterações significativas nas condições de alimentação, alojamento, situações estressantes, bem como doenças com o uso de preparações farmacológicas , oscila ligeiramente. Devido à alta acidez, a microbiocenose do estômago é bastante pobre. Microrganismos capazes de manter sua atividade vital em meio ácido e na presença de pepsina (bacilos acidophilus e outros lactobacilos, enterococos, fungos, bacilos, sarcinas) localizam-se principalmente em sua parte pilórica. O número específico de microrganismos no duodeno e jejuno varia de 102-105 bactérias por 1 g de seu conteúdo. A inibição do seu crescimento nesta parte do intestino delgado é proporcionada por um ambiente mais ácido, que é mantido pela entrada do quimo (conteúdo do estômago) e pela liberação de ácidos biliares. Peristalse ativa, imunoglobulinas secretoras (IgA, IgE) e enzimas estão diretamente envolvidas na regulação do número de microrganismos. Os principais habitantes - lactobacilos, enterococos, enterobactérias, steptococci, em sua representação quantitativa são ligeiramente inferiores às bifidobactérias, às vezes são encontradas candida. Uma situação semelhante é observada na parte cranial do íleo, enquanto a microbiocenose caudal é muito mais diversificada e muitas vezes inclui espécies que vivem predominantemente no intestino grosso (bacteróides, clostrídios, eubactérias, fusobactérias, etc.). O conteúdo específico de microrganismos nesta área pode chegar a 107 por 1 g de conteúdo intestinal. Deve-se dizer que a flora microbiosenosindigênica do intestino grosso em comparação com o intestino delgado predomina significativamente tanto em termos qualitativos quanto quantitativos. Além dos citados na Tabela 1, há quase sempre representantes de Veiolonella, Peptococcus, Peptostreptococcus, Actinomycetes, Pseudomonas, Alkaligenes e outros gêneros (11). À medida que você se move em direção ao reto, o conteúdo específico de bactérias aumenta (1010-1012 células microbianas por 1 g de conteúdo). Dependendo da umidade das fezes, a porcentagem da massa bacteriana em relação ao peso total do material de teste varia de 15 a 30%. Este artigo propõe principalmente os resultados de um estudo de microecologia intestinal em cães de 2 a 7 anos, onde Atenção especial foram dadas à microflora normal. Nos próximos números, pretendemos apresentar materiais sobre a dinâmica etária da flora indígena do intestino, as causas do desenvolvimento da disbacteriose (diminuição da RC) e as formas de corrigi-las também serão consideradas. Os resultados obtidos mostram que a microflora intestinal normal em cães, como em outros animais, é baseada em microrganismos anaeróbios obrigatórios não formadores de esporos. A proporção de representantes da flora intestinal anaeróbica-aeróbica é normalmente de aproximadamente 1000:1, respectivamente. Os representantes mais importantes da flora residente do trato gastrointestinal são bifido e lactobacilos, bacteróides, enterococos, Escherichia e fungos leveduriformes (9). BifidobactériasAs bifidobactérias constituem a maioria da flora intestinal normal (de 60 a 90% ou mais) em cães saudáveis, assim como em outros animais monogástricos (Fig. 1). Normalmente, a partir de 1 g do conteúdo do intestino grosso dos cães (dependendo da idade, tipo de alimentação, etc.), eles foram semeados até 1012. Os veterinários devem prestar atenção ao fato de que o exame microscópico das fezes usando coloração especial de esfregaço os métodos só podem dar uma ideia aproximada da proporção dos principais grupos de populações de microrganismos (presença de cocos, bactérias gram-positivas e gram-negativas, fungos, etc.). A presença ou ausência de bifidoflora não pode ser estabelecida por este método, porque tem semelhanças morfológicas com várias outras bactérias - microrganismos intestinais obrigatórios (Apêndice 1). A determinação do teor quantitativo de bifidoflora é realizada pelo método de semeadura de diluições sucessivas de dez vezes do material de teste em meios nutrientes semi-líquidos eletivos (especiais), que são despejados em um alto (pelo menos dois terços da altura do tubo de ensaio) ) coluna e regenerado (aquecido) antes da semeadura. O material submetido à análise bacteriológica é cuidadosamente colocado na parte inferior do tubo de ensaio, cujo conteúdo é levemente misturado, observando as condições de anaerobiose, e depois incubado na temperatura ideal por 1 a 3 dias. Esse tipo de pesquisa requer alta qualificação e habilidades práticas de um bacteriologista. Levando em conta a posição dominante da bifidoflora nos intestinos de indivíduos saudáveis, bem como os dados de estudos clínicos e microbiológicos, muitos autores concluíram que representantes do gênero bifidobactérias são o principal grupo taxonômico da microflora do trato gastrointestinal, que é um indicador de saúde (4). De fato, com a diminuição da RC, a bifidoflora é a primeira a desaparecer do trato gastrointestinal. A predominância desses microrganismos no intestino, via de regra, impede a reprodução de bactérias patogênicas e oportunistas, normalizando a microbiocenose como um todo. A atividade antagônica das bifidobactérias contra patógenos relacionados a Canterobacteria (Escherichia, Klebsiella, Salmonella, Proteus, Shigella, etc.), cocos (Srepto-, Staphylococcus), Vibrios, Campylobacter, Clostridia e outros microrganismos é assegurada pela formação de acetato de carboidrato e lactato, produção de ácidos graxos voláteis (AGV), lisozimas e outras substâncias com atividade antibacteriana, bem como a capacidade de suprimir a formação de toxinas ou destruir toxinas de bactérias patogênicas, etc. Deve ser dada particular ênfase à sua participação na simbiose com o macroorganismo ao nível da digestão parietal, que é determinada por propriedades adesivas bem pronunciadas. Este é um dos principais elementos de competitividade no desenvolvimento de um nicho alimentar em relação a outros representantes da flora nativa e patógenos. As bifidobactérias estão diretamente envolvidas na regulação das funções imunes do macroorganismo. Estimulam a proliferação de células do tecido linfóide, aumentam a atividade fagocitária de macrófagos, monócitos e granulócitos, aumentam a imunidade humoral específica, a síntese de citocinas (produção de interferon gama, JL-6, TNF, ALPHA) e também estimulam mecanismos imunológicos no nível celular. nível, incluindo proteção antitumoral (7, quinze). Como outros representantes da flora indígena, as bifidobactérias são capazes de causar a desconjugação dos ácidos biliares. Eles também estão ativamente envolvidos no metabolismo da água-sal, proteínas, gorduras, nucleotídeos, vitaminas, manutenção do pH e anaerobiose no intestino. Eles sintetizam aminoácidos como lisina, arginina, valina, metionina, leucina, tirosina e ácido glutâmico. A parcela de aminoácidos essenciais é responsável por cerca de 40% de sua quantidade total. As bifidobactérias intracelulares acumulam vitaminas B1, B2, B6, B12, C, nicotínico, ácido fólico e biotina, e também produzem B6, B12 e ácido fólico no meio de cultura. Com uma deficiência de representantes deste gênero, a síntese da formação endógena de vitamina K diminui, o que leva à interrupção dos processos de coagulação do sangue. A breve descrição das bifidobactérias indica que elas, como uma das variedades da flora normal do macroorganismo, dominam não apenas quantitativamente, mas também qualitativamente (fisiologicamente). Na identificação de nossa espécie de bifidobactérias isoladas de fezes de cães, foi demonstrado que B.adolescentis foi a espécie predominante (41,7% das cepas), B.globosum foi a segunda maior (16,7%), B.termophilum foi a terceira (8, 3%). Em nenhum dos casos foi possível isolar de cães as bifidobactérias da espécie B. bifidum, características do intestino humano e utilizadas para a fabricação de preparações probióticas na medicina humanitária. Lactobacilos O segundo maior e, obviamente, o mais importante grupo da flora residente do trato gastrointestinal de cães são as bactérias lácticas, representantes do gênero Lactobacterium (Apêndice 2). De acordo com nossos estudos, a quantidade de lactobacilos em cães saudáveis é de 106-109/g do conteúdo do intestino grosso (Fig. 1). Com a diminuição da RC (disbacteriose), os lactobacilos são semeados em quantidades muito menores ou não podem ser detectados (Fig. 2). As bactérias do ácido lático, como representantes obrigatórios do trato gastrointestinal, participam ativamente dos processos que ocorrem nele. Eles fermentam uma grande quantidade de carboidratos e álcoois, alguns representantes deste gênero causam hidrólise de amido e sintetizam proteínas. A atividade antagônica das bactérias lácticas contra a microflora putrefativa, patogênica e oportunista se deve à sua capacidade de sintetizar inúmeras substâncias antibióticas. Alguns deles pertencem a proteínas de baixo peso molecular. Eles foram classificados como bacteriocinas, semelhantes em seu mecanismo de ação aos antibióticos, mas diferindo deles pela baixa atividade contra tipos de microrganismos intimamente relacionados (Apêndice 3). A caracterização das propriedades físico-químicas das bacteriocinas de bactérias acidófilas permitiu combiná-las sob o termo "Lactacina B". Além disso, os lactobacilos produzem substâncias antimicrobianas chamadas lantabióticos. São menos sensíveis à ação de amilases e proteinases e contêm aminoácidos normalmente não encontrados em bacteriocinas. Além de bacteriocinas e lantabióticos, os lactobacilos sintetizam substâncias não identificadas com efeito semelhante à bacteriocina. Estes de baixo peso molecular compostos orgânicos natureza não proteica mostram sua atividade na presença de ácido ou peróxido de hidrogênio. Eles inibem o crescimento e desenvolvimento de pseudomanias, salmonela, shigella, estreptococos, estafilococos, bem como bactérias anaeróbicas , incluindo clostrídios, bifidobactérias e bacteróides. Um dos produtos metabólicos mais importantes das bactérias lácticas é o peróxido de hidrogênio. A capacidade de produzi-lo é determinada por uma característica geneticamente determinada e não depende do ambiente principal e do contato com o oxigênio. O efeito inibitório do peróxido de hidrogênio no intestino é mais importante no controle da abundância da flora aeróbica do que o efeito dos ácidos orgânicos produzidos por ele. O efeito bactericida do peróxido de hidrogênio está associado ao seu forte efeito oxidante nas células bacterianas e à destruição da estrutura molecular básica das proteínas celulares. Os lactobacilos desempenham um papel importante no desenvolvimento da imunidade em recém-nascidos com baixa atividade da imunidade celular e humoral e baixa atividade fagocitária de macrófagos mononucleares. Um aumento na atividade fagocítica dos macrófagos, a captura e o catabolismo de antígenos por eles é observado com a administração oral, subcutânea e intraperitoneal de lactobacilos vivos, sobrenadantes, culturas mortas ou fragmentos de suas paredes. Sob condições in vitro e in vivo, as bactérias lácticas estimulam a produção de interferons e interleucinas (3, 7). Além das propriedades listadas, que proporcionam um efeito imunoestimulante e antagônico contra patógenos, os lactobacilos também possuem outras importantes funções fisiológicas. Eles estão ativamente envolvidos no metabolismo de carboidratos, proteínas, lipídios, ácidos nucleicos. Eles, assim como as bifidobactérias, desempenham um papel importante na regulação do metabolismo água-sal, manutenção do pH e anaerobiose no intestino, desconjugação de ácidos biliares, síntese de vitaminas, aminas e outros compostos biologicamente ativos. A maioria das cepas de lactobacilos que estudamos, isoladas de fezes de cães, foram atribuídas à espécie L.acidophilum (56%), a segunda maior foi a espécie L.plantarum (16%), a terceira - L.helveticum (12% ). Escherichia são saprófitas que normalmente fazem parte da flora intestinal residente. Eles estão distribuídos de forma aleatória e uniforme por toda a cavidade intestinal, localizados principalmente no lúmen e apenas parcialmente adjacentes ao epitélio de suas vilosidades. Assim como os bifido e os lactobacilos, a Escherichia está ativamente envolvida em processos enzimáticos no intestino, enquanto forma ácidos orgânicos, vitaminas e outras substâncias biologicamente ativas. Em 1905, H. Conrad descobriu que, como resultado da vida da Escherichia, substâncias bactericidas se acumulam no meio nutriente, impedindo o crescimento de outras bactérias. Sabe-se agora que a Escherichia produz tanto in vitro quanto in vivo até 24 tipos de tais substâncias, chamadas colicinas. Talvez a flora intestinal deva ser chamada não saprófita, mas condicionalmente patogênica, pois, em comparação com outros representantes pertencentes a essa categoria de microrganismos, é a mais agressiva: Escherichia estão entre as primeiras a habitar o corpo após o nascimento e são mais frequentes do que outros encontrados no sangue de animais com diminuição da imunidade natural, por exemplo, após irradiação. Assim, segundo os autores (2, 5), em mais de 50% dos casos são a causa da septicemia em animais irradiados. Deve ser lembrado que um grande número de Escherichia são patógenos com alta virulência constantemente pronunciada (Apêndice 4). Em várias secções do intestino de cães saudáveis, o número de Escherichia varia de 102 a 109 unidades formadoras de colónias por 1 g de material de teste. Estudos próprios realizados em cães saudáveis mostram que o número de Escherichia oscila entre 106-109 por grama de fezes. Bacteróides A composição da microflora normal do trato gastrointestinal, bem como da cavidade oral, trato respiratório superior, órgãos geniturinários, inclui bacteróides. O gênero Bacteroides inclui mais de 20 espécies, a maioria delas isoladas de humanos e animais. Em condições ácidas, os bacteróides apresentam atividade antagônica contra Salmonella, Escherichia e outros microrganismos e, aparentemente, desempenham um papel significativo na resistência do organismo a infecções. No entanto, os resultados de estudos recentes indicam sua participação na etiologia de muitos processos patológicos: enterite, hepatite necrótica, peritonite, meningite, etc. e) O estudo da patogenicidade de representantes deste gênero em animais indica sinergismo no desenvolvimento de processos infecciosos, que se nota em relação a borrélia, micoplasmas, estreptococos, estafilococos, pasteurella e em humanos - cólera vibrio (6). Em 1 g do conteúdo do intestino grosso de cães saudáveis, seu número varia de 107 a 1010. Enterococos Estreptococos fecais ou enterococos são amplamente distribuídos na natureza. Eles são encontrados nos intestinos e fezes de humanos e animais, bem como no solo e na água. Os enterococos são representantes obrigatórios da microflora normal do trato gastrointestinal e alguns deles (principalmente Ent. faecium) são incluídos na composição de preparações probióticas para normalizar a microflora intestinal. As funções antagônicas desses microrganismos estão principalmente associadas às suas propriedades formadoras de ácido e à capacidade de produzir bacteriocinas. Ao mesmo tempo, os enterococos são microrganismos anaeróbios facultativos condicionalmente patogênicos que podem causar gastroenterite, pneumonia, mastite, endocardite, meningite, septicemia e outras doenças em animais e humanos. Como é típico de todos os microrganismos condicionalmente patogênicos, seu impacto negativo se manifesta em indivíduos com diminuição da resistência geral. O conteúdo de representantes deste tipo de microorganismos em cães saudáveis é 104-108 / g de fezes (pesquisa própria). Clostridia Até 35 espécies de Clostridium são encontradas em animais e humanos. O indicador quantitativo de espécies individuais (Cl.clostridiforme, Cl.innocuum, Cl.ramosum) pode chegar a 108-109/g de fezes (11). De acordo com nossa própria pesquisa, a frequência de isolamento de Clostridium do intestino de cães variou de 75 a 100% dos casos. Seu conteúdo específico em diferentes seções variou de 0 a 104/g do material em estudo. característica clostridia é a sua capacidade de saprófita existência no solo e no trato gastrointestinal de humanos e animais. O papel dos representantes deste gênero para o macroorganismo (excluindo espécies patogênicas) não foi suficientemente estudado. Existem dados na literatura indicando a síntese de vitaminas clostridiais: ácidos nicotínico, fólico, pantotênico e riboflavina (12). Portanto, é natural supor que os clostrídios também estejam envolvidos na manutenção da normobiose intestinal de seu hospedeiro. Além disso, alguns autores acreditam que os clostrídios, especialmente aquelas espécies cujo número pode atingir grandes números, são o sistema regulador mais antigo da microecologia humana e animal, proporcionando relações homeostáticas entre o hospedeiro e sua microflora. Fungos do gênero Candida Os fungos semelhantes a leveduras do gênero Candida constituem um gênero independente e incluem mais de 80 espécies. Eles fazem parte da flora normal que habita as membranas mucosas do aparelho respiratório e do trato gastrointestinal, bem como os órgãos genitais e a pele. Das fezes de cães saudáveis, nós as semeamos em quantidades de até 103, raramente - 104/g. Os fungos do gênero Candida também pertencem a microrganismos condicionalmente patogênicos, e todos os fatores que reduzem a resistência geral ou de colonização do macroorganismo e inibem a defesa imunológica inespecífica criam condições para ativar seu crescimento e o desenvolvimento de uma doença específica - candidíase. Experimentos em macacos e cães mostraram que esses microrganismos podem entrar no organismo hospedeiro através das membranas mucosas do trato intestinal e entrar na corrente sanguínea. A endotoxina, que causa danos aos órgãos parenquimatosos, tem importância significativa na patogênese da doença. Os grupos de microrganismos listados acima constituem a parte principal da microflora residente mais ou menos estudada para o trato gastrointestinal dos animais. Ao mesmo tempo, deve-se notar que apenas as bifidobactérias e os lactobacilos são microrganismos cuja participação em processos patológicos (diretos e indiretos) não foi estabelecida até o momento. Além da microflora residente no trato gastrointestinal, outros microrganismos, denominados transitórios, são encontrados esporadicamente, os quais são mais frequentemente semeados em doenças do trato gastrointestinal de animais, embora espécies microbianas saprófitas também sejam encontradas entre eles. Em primeiro lugar, são Klebsiella, Pseudomonas, Proteus, Staphylococcus, Spirochetes, Citrobacter, Enterobacter, fungos de mofo e outros. A diversidade quantitativa da microflora residente de cães, a proporção numérica na microbiocenose de um biótopo particular da microflora residente e transitória é influenciada principalmente pela idade, tipo de alimentação e vários fatores ambientais, incluindo o uso medicamentos. Enquanto representantes da microflora normal predominam nas microbiocenoses, a RC e a saúde do macroorganismo como um todo são preservadas. Se as influências externas (medicamentos quimioterápicos, pesticidas e outros venenos, estresse, microorganismos virulentos, etc.) excedem em sua intensidade os mecanismos compensatórios do sistema ecológico "macroorganismo - sua microflora normal", a microflora transitória começa a predominar nas microbiocenoses, o que leva ao desenvolvimento de processos infecciosos locais, ou mesmo infecção generalizada e outras complicações. Assim, é óbvio que o organismo animal e a microflora que o habita são partes interdependentes e coexistentes de um único sistema. Do ponto de vista ecológico, a interação entre macro e micro-organismos é um caso especial de simbiose universalmente difundida no mundo vivo com seus várias formas(comensalismo, mutualismo, parasitismo, predação, etc.). Com base no exposto, conclui-se que a interação entre a microflora normal e o organismo hospedeiro é predominantemente realizada no nível do mutualismo. Os microrganismos intestinais, fazendo parte da normoflora, representam simultaneamente um complexo sistema aberto autorregulador, onde as suas várias populações têm relações diversas tanto ao nível das suas comunidades como com o organismo hospedeiro. A maioria papel de destaque desempenham suas propriedades antagônicas competitivas, que, basicamente, determinam o funcionamento normal de um único sistema ecológico: um organismo animal é seu ambiente

Intizarov Mikhail Mikhailovich, acadêmico da Academia Russa de Ciências Agrárias, prof..

PREFÁCIO

Ao considerar maneiras de combater muitas doenças infecciosas de etiologia bacteriana e viral, eles geralmente se concentram em microrganismos patogênicos - os agentes causadores dessas doenças e, com menos frequência, prestam atenção à microflora normal que acompanha o corpo do animal. Mas, em alguns casos, é a microflora comum que tem grande importância na ocorrência ou desenvolvimento da doença, contribuindo ou impedindo sua manifestação. Às vezes, a microflora usual torna-se uma fonte daqueles agentes infecciosos patogênicos ou oportunistas que causam infecção endógena, manifestação de infecções secundárias, etc. um processo infeccioso causado por alguns microrganismos patogênicos. Portanto, médicos, biólogos, pecuaristas, professores universitários e cientistas devem conhecer a composição, propriedades, características quantitativas, significado biológico de diferentes grupos e representantes da microflora normal do corpo (mamíferos, incluindo domésticos, animais de fazenda e humanos).

Introdução

A microflora do organismo dos mamíferos, incluindo animais agrícolas, domésticos e humanos, começou a ser estudada juntamente com o desenvolvimento da microbiologia como ciência, com o advento das grandes descobertas de L. Pasteur, R. Koch, I. I. Mechnikov, seus alunos e funcionários. Assim, em 1885, T. Escherich isolou das fezes de crianças um representante obrigatório da microflora intestinal - Escherichia coli, encontrada em quase todos os mamíferos, aves, peixes, répteis, anfíbios, insetos, etc. Após 7 anos, os primeiros dados apareceu sobre a importância das varas intestinais para a atividade vital, saúde do macroorganismo. S. O. Jensen (1893) descobriu que diferentes tipos e cepas de E. coli podem ser tanto patogênicos para animais (causando doença séptica e diarréia em bezerros) quanto não patogênicos, ou seja, completamente inofensivos e até mesmo benéficos habitantes dos intestinos de animais e de uma pessoa . Em 1900, G. Tissier descobriu nas fezes de recém-nascidos bifizhbakter "e - cal: e representantes obrigatórios da microflora intestinal normal do corpo em todos os períodos de sua vida. Bastões de ácido lático (L. acidophilus) foram isolados por Moreau em 1900.

Definições, terminologia

A microflora normal, associada apenas ao estado saudável do corpo, é dividida por vários autores em duas partes:

1) uma parte obrigatória e permanente que se desenvolveu na filogênese e na ontogênese dentro o processo de evolução, que também é chamado de indígena (ou seja, local), autóctone (indígena), residente, etc.;

2) opcional ou transitório.

Microrganismos patogênicos que penetram acidentalmente no macroorganismo podem ser incluídos periodicamente na composição da automicroflora.

Composição de espécies e características quantitativasmicroflora das áreas mais importantes do corpo animal

Apesar de dezenas e centenas (até 400) de tipos conhecidos de micro-organismos viverem no intestino, micro-organismos completamente desconhecidos também podem existir. , que está intimamente associada à superfície (glicocálice, borda em escova) das células epiteliais da mucosa intestinal. A extremidade fina dessas bactérias longas e filamentosas está rebaixada entre as microvilosidades da borda em escova das células epiteliais e parece estar fixada ali de tal forma que pressiona as membranas celulares. Essas bactérias podem ser tão numerosas que, como a grama, cobrem a superfície da membrana mucosa. Estes também são anaeróbios estritos (representantes obrigatórios da microflora intestinal de roedores), espécies úteis para o corpo, normalizando amplamente as funções intestinais. No entanto, essas bactérias foram detectadas apenas por métodos bacterioscópicos (usando microscopia eletrônica de varredura de cortes da parede intestinal). Bactérias filamentosas não crescem em meios nutrientes conhecidos por nós, elas só podem sobreviver em meios densos de ágar por não mais que uma semana) J . P. Koopman et. ai., 1984).

A distribuição de microrganismos no trato gastrointestinal

Microflora do duodeno e jejuno

Microflora da pele

Os principais representantes da microflora da pele são difteria (corinebactérias, bactérias propiônicas), fungos, leveduras, esporos de bacilos aeróbicos (bacilos), estafilococos (principalmente S. epidermidis prevalece, mas S. aureus também está presente na pele saudável em pequenas quantidades) .

A microflora do trato respiratório

Nas membranas mucosas do trato respiratório, a maioria dos microrganismos está na nasofaringe, atrás da laringe seu número é muito menor, ainda menos nos grandes brônquios, e não há microflora nas profundezas dos pulmões de um corpo saudável.

Microflora do canal de nascimento de mamíferos

No entanto, a microflora normal adequadamente formada (selecionada no processo de evolução) do corpo do animal habita integralmente seu corpo não imediatamente, mas em poucos dias, tendo tempo para se multiplicar em determinadas proporções. V. Brown dá a seguinte seqüência de sua formação nos primeiros 3 dias de vida de um recém-nascido: as bactérias são encontradas nas primeiras amostras retiradas do corpo de um recém-nascido imediatamente após o nascimento. Assim, na mucosa nasal, os estafilococos coagulase-negativos (S. epidermidis) predominaram inicialmente; na membrana mucosa da faringe - os mesmos estafilococos e estreptococos, bem como uma pequena quantidade de epterobactérias. No reto no 1º dia, E. coli, enterococos, os mesmos estafilococos já foram encontrados e, no terceiro dia após o nascimento, uma biocenose microbiana foi estabelecida, principalmente normal para a microflora normal do intestino grosso (W. Braun, F. Spenckcr u.a., 1987).

Diferenças na microflora do corpo de diferentes espécies animais

Os representantes obrigatórios acima da microflora são característicos da maioria dos mamíferos domésticos, agrícolas e do corpo humano. Dependendo do tipo de animal, o número de grupos microbianos pode mudar, mas não sua composição de espécies. Em cães, o número de Escherichia coli e lactobacilos no intestino grosso é o mesmo mostrado na Tabela. 1. No entanto, as bifidobactérias foram uma ordem de magnitude menor (10 8 por 1 g), uma ordem de magnitude maior foram estreptococos (S. lactis, S. mitis, enterococos) e clostrídios. Em ratos e camundongos (laboratório), o número de bacilos lácticos (lactobacilos) foi aumentado na mesma quantidade, mais estreptococos e clostrídios. Nesses animais, havia poucas Escherichia coli na microflora intestinal e o número de bifidobactérias foi reduzido. O número de Escherichia coli também é reduzido em cobaias (de acordo com V. I. Orlovsky). Nas fezes de cobaias, de acordo com nossa pesquisa, Escherichia coli estavam contidas na faixa de 10 3 -10 4 por 1 g. 2 em 1 g) e lactobacilos.

Microflora normal do corpo e microorganismos patogênicos

b) ser expulso (rapidamente ou um pouco mais tarde) do macroorganismo por representantes simbióticos úteis da microflora normal e eliminado;

c) multiplicam-se expulsando a microflora normal de tal forma que, com certo grau de colonização do macroorganismo, podem causar a doença correspondente.

Papel biológico (valor funcional) da microflora normal

Mecanismos que impedem a colonização (assentamento) da microflora patogênica do corpo do animal

Para muitos representantes da parte autóctone da microflora normal, são conhecidos vários outros mecanismos de antagonismo em relação à microflora patogênica e condicionalmente patogênica:

Produção de ácidos graxos voláteis com uma cadeia curta de átomos de carbono (são formados por uma parte estritamente anaeróbica da microflora normal);

Formação de metabólitos biliares livres (lactobacilos, bifidobactérias, bacteróides, enterococos e muitos outros podem formá-los por desconjugação de sais biliares);

Produção de lisozima (típica de lactobacilos, bifidobactérias);

Acidificação do meio ambiente, durante a produção de ácidos orgânicos;

Produção de colicinas e bacteriocinas (estreptococos, estafilococos, Escherichia coli, Neisseria, bactérias propiônicas, etc.);

conceitocerca dedisbacteriose

Papel morfofuncional e função metabólica da automicroflora do corpo

A automicroflora afeta o macroorganismo após seu nascimento de tal maneira que, sob sua influência, a estrutura e as funções de vários órgãos em contato com o ambiente externo amadurecem e se formam. Desta forma, os tratos gastrointestinal, respiratório, urogenital e outros órgãos adquirem sua aparência morfofuncional em um animal adulto. Um novo campo de aranhas biológicas - gnotobiologia, que vem se desenvolvendo com sucesso desde a época de L. Pasteur, tornou possível entender muito claramente que muitas características imunobiológicas de um organismo animal adulto e normalmente desenvolvido são formadas sob a influência da automicroflora de seu corpo. Animais livres de microrganismos (gnotobiotas) obtidos por cesariana e depois mantidos por muito tempo em isoladores gnotobibológicos especiais estéreis sem nenhum acesso a eles de qualquer microflora viável têm características do estado embrionário das mucosas que se comunicam com o ambiente externo do órgãos. Seu status imunobiológico também mantém características embrionárias. Observar hipoplasia do tecido linfóide em primeiro lugar desses órgãos. Animais livres de microrganismos têm menos elementos celulares imunocompetentes e imunoglobulinas. No entanto, é característico que o organismo de tal animal gnotobiótico permaneça potencialmente capaz de desenvolver capacidades imunobiológicas, e somente devido à ausência de estímulos antigênicos provenientes da automicroflora em animais comuns (a partir do nascimento), ele não sofreu uma reação natural. desenvolvimento que afeta todo o sistema imunológico em geral, e acúmulos linfóides locais das membranas mucosas de órgãos como intestino, trato respiratório, olho, nariz, ouvido, etc. Assim, no processo de desenvolvimento individual do organismo animal, é de sua automicroflora que se seguem os efeitos, inclusive os estímulos antigênicos, que determinam o estado imunomorfofuncional normal de um animal adulto comum.

Alguns métodos de monitoramento do estado da microflora do corpo animal

Uma vez que as amostras estudadas são substratos biológicos com microflora mista, é necessário selecionar os meios para que cada um satisfaça as necessidades de crescimento do gênero ou espécie microbiana desejada e simultaneamente iniba o crescimento de outras microfloras acompanhantes. Portanto, é desejável que a mídia seja seletiva. De acordo com o papel biológico e significado na microflora normal, sua parte autóctone estritamente anaeróbica é mais importante. As técnicas para sua detecção são baseadas no uso de meios nutrientes apropriados e métodos especiais de cultivo anaeróbio; a maioria dos microrganismos estritamente anaeróbicos listados acima pode ser cultivada em um meio nutriente novo, enriquecido e universal No. 105 por A. K. Baltrashevich et al. (1978). Este meio tem uma composição complexa e, portanto, pode satisfazer as necessidades de crescimento de uma ampla variedade de microflora. A receita para este ambiente pode ser encontrada no manual "Fundamentos teóricos e práticos da gnotobiologia" (M.: Kolos, 1983). Várias variantes deste meio (sem adição de sangue estéril, com sangue, denso, semi-líquido, etc.) -versão líquida do meio nº 105 em tubos de ensaio.

REFERÊNCIAS

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Após o nascimento, o corpo do animal entra em contato com diversos microrganismos que penetram pelo trato respiratório e digestivo e colonizam o trato gastrointestinal, genital e outros órgãos. Habitantes permanentes do corpo dos animais são microorganismos, alguns dos quais são microflora obrigatória, outros estão no corpo temporariamente, obtendo do solo, ar, água e alimentos.

Microflora da pele. Habitantes permanentes da pele - estafilococos, estreptococos, sarcinas, actinomicetos, micrococos, causando processos supurativos: furúnculos, abscessos, fleuma, etc.

De formas em forma de bastonete, encontram-se intestinais, pseudomonas, pseudodifteria. Micróbios do grupo de aeróbios e anaeróbios também entram na pele. O número de micróbios na pele depende das condições em que os animais são mantidos: com pouco cuidado, até 1-2 bilhões de corpos microbianos podem ser encontrados por 1 cm de superfície da pele.

Microflora do úbere. A microflora do úbere consiste principalmente em micrococos (M. luteus, M. flavus, M. candidus, M. caseolyticus), estafilococos, estreptococos, corinebactérias, em particular Corynebacterium bovis. Devido à presença de dobras ásperas e pequenas, a pele externa do úbere é um local de acúmulo de quase todos os micróbios que vivem em construções pecuárias, pastagens, camas, rações, nas mãos de uma leiteira e outros objetos ambientais. Com limpeza e desinfecção insuficientes das instalações, geralmente são encontrados mais de 10 micróbios por 1 cm de pele do úbere, pelo que o úbere pode se tornar uma das principais fontes de contaminação do leite produzido.

Dos micróbios patogênicos na pele do úbere, os patógenos da mastite (Str. agalactiae, Str. uberis, Staph. aurcus) e colimastite (Escherichia coli, Klebsiella aerogenes, Corynebacterium pyogencs, Vas. subtilis, Pseudomonas aerugynosa, etc.) são frequentemente encontrados. encontrado. Str. é de particular importância. agalactiae, que causa 70-80% de todas as mastites bacterianas.

Microflora da conjuntiva. Um número relativamente pequeno de micróbios é encontrado na conjuntiva. Como regra, são estafilococos, estreptococos, sardinhas, micoplasmas, micrococos, actinomicetos, leveduras e fungos são menos comuns.

A microflora do trato respiratório. Em animais recém-nascidos, não há microrganismos no trato respiratório. Ao respirar nas membranas mucosas do trato respiratório superior, eles são depositados no ar várias bactérias, actinomicetos, bolores e leveduras, micoplasmas, etc. Os habitantes permanentes das membranas mucosas da nasofaringe, garganta são principalmente formas coccal de bactérias - estreptococos, estafilococos, micrococos.

Microflora do canal alimentar. Ela é a mais abundante. Em animais recém-nascidos, o trato gastrointestinal não contém micróbios. Após algumas horas, o corpo do animal é povoado pela microflora, que pode mudar durante a vida, mas basicamente permanece estável até o final da vida do animal. A microflora do canal digestivo costuma ser dividida em facultativa, que pode variar de acordo com a alimentação, condições de manutenção e operação, e obrigatória, ou seja. constante, adaptado às condições ambientais do trato gastrointestinal. A microflora constante inclui estreptococos de ácido lático (Sir. lactis), bastões de ácido lático (Bad. acidophilum), Escherichia coli (E. coli).

Microflora da cavidade oral. É o mais abundante e variado. Mais de 100 tipos de microrganismos já foram encontrados na cavidade oral. Habitantes permanentes da cavidade oral incluem diplococos, estafilococos, sardinhas, micrococos, difteróides, anaeróbios e aeróbios, bactérias destruidoras de celulose, espiroquetas, fungos, leveduras, etc.

A diversidade de microrganismos depende do tipo de animal, do tipo de alimentação e de como são utilizados. Por exemplo, ao alimentar com leite, prevalecem os micróbios do ácido lático e a microflora do leite. Ao alimentar volumosos para herbívoros, o número de micróbios na cavidade oral é pequeno, ao fornecer alimentos suculentos, aumenta 10 vezes.

Microflora do estômago. É relativamente pobre em composição quantitativa e qualitativa. Isso é explicado pela ação bactericida do suco gástrico ácido. No conteúdo do estômago, Bactérias do tipo esporo sobrevivem. subtilis, micobactérias resistentes a ácidos (M. bovis, M. avium), bem como alguns representantes de sarcina (Sarcina ve; ntriculi), bactérias do ácido lático, actinomicetos, enterococos, etc.

Com uma diminuição da acidez, bem como com uma doença do estômago, uma rica microflora de bactérias putrefativas, leveduras, fungos, fungos e outros microrganismos é encontrada em seu conteúdo.

No estômago de um porco, os principais representantes da microflora são bactérias do ácido lático, vários cocos fermentando carboidratos, actinomicetos, leveduras, aeróbios formadores de esporos; Cl são encontrados. perfringens. A microflora do estômago do cavalo é mais numerosa e variada: mais perto do piloro, é pobre, no vestíbulo do estômago, os micróbios concentram-se em grande número; no fundo do estômago há muitas bactérias lácticas, não putrefativas.

A microflora do rúmen de ruminantes é mais rica. Existem muitas bactérias putrefativas, agentes causadores de várias fermentações. Com os alimentos, um grande número de vários tipos de microflora epífita e do solo entra no rúmen. Eles estão contidos principalmente na forma vegetativa, seu número é de 1 mil a 10 milhões de corpos microbianos e, segundo algumas fontes, até várias dezenas de bilhões em 1 ml do conteúdo da cicatriz.

No rúmen de ruminantes, ocorrem processos microbiológicos e bioquímicos complexos associados à quebra de nutrientes. Micróbios destruidores de celulose são de particular interesse: Ruminococcus flavcfaciens, R. albus, Bact. succinogenes, Cl. cellobioparum, Cl. cellolyticum, etc. Esses microrganismos digerem a fibra com a ajuda da enzima celulose em glicose, que é facilmente absorvida pelo organismo do animal. As pectinas quebram você. macerans, V. asterosporus, Amylobacter, Granulobacter pectinovorum. Estreptococos (Str. bovis, Str. faecalis, etc.) fermentam amido, glicose com a formação de ácido lático. Bactérias do ácido propiônico (Propionipcctinovorum, VeilloneUa, Peptosfreptococcus elsdenii, Butyribacterium, E. coli, etc.) fermentam lactatos com a formação de ácido propiônico, parcialmente butírico e ácido acético, produzem vitaminas do complexo B. Os micróbios que habitam o rúmen degradam proteínas, nitratos, ureia sintetiza todas as vitaminas, exceto A, E, D.

Microflora do intestino delgado. Ela é a mais pobre. No duodeno e jejuno, a atividade dos microrganismos celulósicos é enfraquecida. Aqui, na maioria das vezes, vivem enterococos resistentes à bile, acidófilos, micróbios de esporos (Bac. retiformis, Cl. perfringens), actinomicetos, E. coli, etc. A composição quantitativa e qualitativa da microflora do intestino delgado depende do tipo de animais e a natureza de sua alimentação.

Microflora do intestino grosso. Ela é a mais rica. Habitantes permanentes - enterococos, estafilococos, estreptococos, bactérias celulósicas, actinomicetos, acidófilos, termófilos, formas de esporos, leveduras, bolores, bactérias putrefativas. A abundância de microrganismos no cólon se deve à presença de grandes volumes de alimentos digeridos neles. Foi estabelecido que um terço da matéria seca da matéria fecal humana consiste em micróbios. Os processos microbiológicos no intestino grosso não param, vários produtos da atividade microbiana são absorvidos pelo macroorganismo. Em diferentes espécies de animais, incluindo pássaros, abelhas, a microflora do intestino grosso é representada por uma variedade de associações de micróbios, que podem ser constantes e não permanentes.

Em animais saudáveis, juntamente com a microflora normal, em alguns casos, são encontrados microrganismos patogênicos - agentes causadores de tétano, aborto infeccioso de éguas, antraz, erisipela suína, passadosrelose, salmonelose, infecções anaeróbicas e outras.

Microflora dos órgãos urinários. Na membrana mucosa dos órgãos genitais são encontrados estafilococos, estreptococos, micrococos, difteróides, micobactérias resistentes a ácidos (Mus. smegmae), etc.. O principal habitante da mucosa vaginal é o Bact. vaginale vulgare, que tem um antagonismo pronunciado a outros microrganismos. No estado fisiológico do trato urinário, a microflora é encontrada apenas em suas partes externas.

O útero, ovários, testículos, bexiga urinária são estéreis em estado fisiológico. Nas doenças dos órgãos geniturinários (metrite, endometrite), a microflora vaginal muda.

Assim, a superfície do corpo dos animais, suas cavidades abertas e fechadas contêm constantemente uma variedade de microflora, principalmente inofensiva, mas às vezes patogênica. Em condições normais, uma certa microbiocenose benéfica é mantida no corpo. Com a diminuição da resistência de um macroorganismo, microrganismos condicionalmente patogênicos, em rápido desenvolvimento, causam doenças (pneumonia, enterite, etc.).

RELAÇÕES DE MICRORGANISMOS COM HUMANOS E ANIMAIS

RELAÇÕES DE MICRORGANISMOS COM PLANTAS

Microflora da rizosfera. As plantas são isoladas em ambiente externo vários compostos orgânicos - açúcares, ácidos orgânicos, nucleotídeos, aminoácidos, vitaminas, estimulantes de crescimento, que são um substrato de fácil acesso e muito diversificado para a nutrição microbiana. Portanto, não é coincidência que o sistema radicular e os órgãos do solo das plantas sejam abundantemente povoados por microrganismos. Por sua vez, a microflora da rizosfera, participando dos processos de transformação de substâncias orgânicas no solo, fornece às plantas os elementos necessários de nutrição mineral, bem como algumas substâncias biologicamente ativas. Além disso, os microrganismos da rizosfera decompõem muitos compostos tóxicos para as plantas, desinfetando o solo. O grau de influência mútua de plantas e bactérias é determinado por seu contato.

Microrganismos fitopatogênicos. Quase todos os grupos de microrganismos contêm patógenos de plantas. O primeiro lugar entre os micróbios fitopatogênicos pertence aos fungos, o segundo lugar é ocupado por vírus e bactérias, e apenas uma pequena porcentagem das doenças das plantas é causada por actinomicetos.

A maioria dos microrganismos fitopatogênicos sintetiza ativamente enzimas hidrolíticas (pectipases, celulases, proteases, etc.), que causam maceração dos tecidos vegetais e destruição das membranas celulares, o que leva à penetração do patógeno na célula. Tendo penetrado na célula, os micróbios fitopatogênicos interrompem o curso normal dos processos fisiológicos, principalmente a fotossíntese e a respiração. As toxinas liberadas pelo patógeno inativam as enzimas da célula vegetal, o que acaba levando à sua morte.

A totalidade de microrganismos que se adaptaram à vida no corpo humano e animal e não causam qualquer distúrbio nas funções fisiológicas do macroorganismo é chamada de microflora normal.

A microflora normal de humanos e animais é dividida em obrigar e opcional. A microflora obrigatória inclui microrganismos saprófitos e condicionalmente patogênicos relativamente constantes que são adaptados ao máximo para existir no organismo hospedeiro. A microflora facultativa é aleatória e temporária. É determinado pela ingestão de microrganismos do ambiente, bem como pelo estado do sistema imunológico do macroorganismo.

Na cavidade oral de humanos e animais, a maior parte das bactérias está localizada na placa. 1 g de massa seca de placa contém pelo menos 250 milhões de células microbianas.

Os microrganismos estão quase ausentes no estômago humano, o que se deve à ação bactericida do suco gástrico e do pH ácido.

Relativamente poucas bactérias (10 2 -10 ^) vivem no intestino delgado, principalmente formas aeróbicas. Mas no intestino grosso existe um número colossal de micróbios, incluindo mais de 260 tipos diferentes de anaeróbios facultativos e obrigatórios.

Do ar circundante, juntamente com a poeira, muitos micróbios entram no trato respiratório de humanos e animais. Devido à função protetora do epitélio e à ação bactericida da lisozima e mucina da mucosa nasal, a maioria dos microrganismos fica retida no trato respiratório superior. Os brônquios e alvéolos dos pulmões são praticamente estéreis. A composição da microflora do trato respiratório superior contém micróbios relativamente constantes, representados por estafilococos, corinebactérias, estreptococos, bacteróides, capsular Bactérias Gram negativas, etc.

O substrato para alimentar as bactérias na superfície da pele são as secreções das glândulas sudoríparas e sebáceas, bem como as células epiteliais que estão morrendo. A pele das partes abertas do corpo - mãos, rosto, pescoço - é mais rica em microrganismos. A massa esmagadora de microrganismos da pele é representada por bactérias saprófitas - estafilococos, bacilos, micobactérias, corinebactérias e fungos de levedura, e apenas 5% das análises revelam um micróbio condicionalmente patogênico - Staphylococcus aureus.

A microflora normal em humanos e animais desempenha um papel importante na formação da imunidade natural. Foi estabelecido que microorganismos obrigatórios que produzem substâncias como antibióticos, ácido lático, álcoois, peróxido de hidrogênio e outros compostos têm propriedades antagônicas pronunciadas contra muitas bactérias patogênicas. Distúrbios qualitativos e quantitativos na composição de micro-boyenoses no corpo humano são chamados disbacteriose. Este último ocorre com mais frequência como resultado do uso prolongado de antibióticos, além de infecções crônicas, radiação e ação de fatores extremos. O desenvolvimento da disbacteriose é explicado pela supressão da microflora obrigatória do macroorganismo e, consequentemente, pela reprodução ativa de bactérias oportunistas (Proteus, Pseudomonas) e fungos de levedura Candida albicans.