Definição de anaeróbios.  Ambiente aeróbico.  Anaeróbios e aeróbios.  culturas de bactérias anaeróbicas

Definição de anaeróbios. Ambiente aeróbico. Anaeróbios e aeróbios. culturas de bactérias anaeróbicas

As bactérias estão presentes em todos os lugares, seu número é enorme, as espécies são diferentes. bactérias anaeróbicas- os mesmos tipos de microrganismos. Eles podem se desenvolver e viver de forma independente, se houver oxigênio em seus ambientes de alimentação ou não existir.

Bactérias anaeróbicas obtêm energia da fosforilação do substrato. Existem aeróbios facultativos, obrigatórios ou outras variedades de bactérias anaeróbicas.

Espécies facultativas de bactérias estão em quase toda parte. A razão de sua existência é a mudança de uma via metabólica para uma completamente diferente. Esta espécie inclui E. coli, estafilococos, shigella e outros. Estas são bactérias anaeróbicas perigosas.

Se não houver oxigênio livre, as bactérias obrigatórias morrem.

Organizado por classe:

  1. Clostrídios- tipos obrigatórios de bactérias aeróbicas, podem formar esporos. Estes são os agentes causadores do botulismo ou tétano.
  2. bactérias anaeróbicas não clostridiais. Variedades da microflora de organismos vivos. Eles desempenham um papel significativo na formação de várias doenças purulentas e inflamatórias. Tipos de bactérias não formadoras de esporos vivem na cavidade oral, no trato gastrointestinal. Na pele, nos genitais das mulheres.
  3. anaeróbios capneístas. Eles vivem com um acúmulo exagerado de dióxido de carbono.
  4. Bactérias aerotolerantes. Na presença de oxigênio molecular, esse tipo de microrganismo não tem respiração. Mas ele também não morre.
  5. Tipos moderadamente estritos de anaeróbios. Em um ambiente com oxigênio, eles não morrem, não se multiplicam. As bactérias desta espécie requerem um ambiente nutricional com pressão reduzida para viver.

Anaeróbios - Bacteróides


Considerada a bactéria aeróbica mais importante. Eles compõem 50% de todos os tipos inflamatórios e purulentos. Seus agentes causadores são bactérias anaeróbicas ou bacteróides. Estes são tipos obrigatórios de bactérias gram-negativas.

Bastões com coloração bipolar e tamanhos de 0,5 a 1,5, em áreas de aproximadamente 15 mícrons. Eles podem produzir a produção de enzimas, toxinas, causar virulência. dependente da resistência aos antibióticos. Eles podem ser persistentes ou apenas sensíveis. Todos os microrganismos anaeróbios são muito resistentes.

A formação de energia para anaeróbios obrigatórios gram-negativos é realizada em tecidos humanos. Alguns dos tecidos dos organismos aumentaram a resistência ao oxigênio reduzido no ambiente alimentar.

Sob as condições do padrão, a síntese de trifosfato de adenosina é realizada apenas aerobicamente. Isso ocorre com o aumento do esforço físico, inflamação, onde atuam os anaeróbios.

ATPé adenosina trifosfato ou ácido, que aparece durante a formação de energia no corpo. Existem diversas variações da síntese desta substância. Uma delas é aeróbica, ou seja, existem três variações de anaeróbios.

Mecanismos anaeróbicos para a síntese de trifosfato de adenosina:

  • refosforilação, que é realizada entre trifosfato de adenosina e fosfato de creatina;
  • a formação de transfosforilação de moléculas de trifosfato de adenosina;
  • degradação anaeróbica de componentes do sangue de glicose, glicogênio.

Formação de anaeróbios


O objetivo dos microbiologistas é o cultivo de bactérias anaeróbicas. Para fazer isso, é necessária uma microflora especializada e a concentração de metabólitos. Geralmente é usado em pesquisas de natureza diferente.

Existem métodos especiais para o cultivo de anaeróbios. Ocorrem ao substituir o ar por uma mistura de gases. Há uma ação em termostatos com vedação. É assim que os anaeróbios crescem. Outro método é o cultivo de microrganismos com adição de agentes redutores.

Esfera de nutrição


Existe uma esfera da nutrição com visão geral ou diagnóstico diferencial. A base - para o tipo de Wilson-Blair é o ágar-ágar, que possui algum teor de glicose, 2-x cloreto de ferro, sulfito de sódio entre seus componentes. Entre eles existem colônias que são chamadas de pretas.

A esfera de Ressel é usada no estudo das qualidades bioquímicas de bactérias chamadas Salmonella ou Shigella. Este meio pode conter glicose e ágar-ágar.

O ambiente de Ploskirev é tal que pode inibir o crescimento de certos microrganismos. Eles formam uma multidão. Por esta razão, é utilizado para a possibilidade de diagnóstico diferencial. Aqui, patógenos de disenteria, febre tifóide e outros anaeróbios patogênicos podem ser produzidos com sucesso.

A direção principal do meio de ágar bismuto-sulfito é o isolamento de Salmonella por este método. Isso é feito com a capacidade da Salmonella de produzir sulfeto de hidrogênio.

No corpo de cada indivíduo vivo, vivem muitos anaeróbios. Eles causam vários tipos de doenças infecciosas neles. A infecção por uma infecção pode ocorrer apenas com um sistema imunológico enfraquecido ou interrupção da microflora. Existe a possibilidade de a infecção entrar em um organismo vivo a partir do ambiente. Pode ser no outono, no inverno. Tal golpe de infecções salva-se durante os períodos listados. A doença causada às vezes dá complicações.

As infecções causadas por microrganismos - bactérias anaeróbicas, estão diretamente ligadas à flora das mucosas dos indivíduos vivos. Com lugares de vida anaeróbios. Cada infecção tem vários patógenos. Seu número geralmente chega a dez. Um número absolutamente especificado de doenças que causam anaeróbios não pode ser determinado com precisão.

Devido à difícil seleção de materiais destinados ao estudo do transporte de amostras, a determinação de bactérias. Portanto, esse tipo de componente é frequentemente encontrado apenas com inflamação já crônica em humanos. Este é um exemplo de uma atitude descuidada com a saúde.

As infecções anaeróbicas são expostas periodicamente a absolutamente todas as pessoas com diferentes idades. Em crianças pequenas, o grau de inflamação infecciosa é muito maior do que em pessoas de outras idades. Os anaeróbios geralmente causam doenças dentro do crânio em humanos. Abscessos, meningites, outros tipos de doenças. A disseminação de anaeróbios é realizada com o fluxo sanguíneo.

Se uma pessoa tem uma doença crônica, os anaeróbios podem formar anomalias no pescoço ou na cabeça. Por exemplo: abscessos, otite ou linfadenite. As bactérias são perigosas para o trato gastrointestinal, pulmões dos pacientes.

Se uma mulher tem doenças do sistema geniturinário, existe o risco de infecções anaeróbicas. Várias doenças da pele, articulações - isso também é uma consequência da vida dos anaeróbios. Este método é um dos primeiros a indicar a presença de uma infecção.

Razões para o aparecimento de doenças infecciosas


As infecções humanas são causadas por aqueles processos em que bactérias anaeróbicas energéticas entram no corpo. O desenvolvimento da doença pode ser acompanhado por suprimento sanguíneo instável, aparecimento de necrose tecidual. Estas podem ser lesões de natureza diferente, inchaço, tumores, distúrbios vasculares. O aparecimento de infecções na cavidade oral, doenças nos pulmões, inflamação dos órgãos pélvicos, outras doenças.

A infecção pode se desenvolver de forma peculiar para cada espécie. O desenvolvimento é influenciado pelo tipo de patógeno, a saúde do paciente. É difícil diagnosticar tais infecções. A seriedade dos diagnosticadores é muitas vezes baseada apenas em suposições. Há uma diferença nas características das infecções que surgem de anaeróbios não clostrídios.

Os primeiros sinais de infecção são a formação de gás, qualquer supuração, o aparecimento de tromboflebite. Às vezes, tumores ou neoplasias podem ser sinais como sinais. Podem ser neoplasias do trato gastrointestinal, uterino. Acompanhado pela formação de anaeróbios. Neste momento, um odor desagradável pode vir de uma pessoa. Mas, mesmo que o cheiro não exista, isso não significa que não existam anaeróbios como patógenos de infecção nesse organismo.

Recursos para obter amostras


O primeiro estudo para infecções causadas por anaeróbios é um exame externo da aparência geral de uma pessoa, sua pele. Porque a presença de doenças de pele em humanos é uma complicação. Eles indicam que a atividade vital das bactérias é a presença de gases nos tecidos infectados.

Em estudos de laboratório, determinando um diagnóstico refinado, é necessário obter corretamente uma amostra de matéria infectada. Muitas vezes é usado equipamento especializado. O melhor método de obtenção de amostras é considerado a aspiração realizada com agulha reta.

Tipos de amostras que não correspondem à possibilidade de continuar as análises:

  • escarro adquirido por auto-excreção;
  • amostras de broncoscopia;
  • tipos de esfregaços das abóbadas da vagina;
  • urina de micção livre;
  • tipos de fezes.

As amostras estão sujeitas a pesquisa:

  1. sangue;
  2. líquido pleural;
  3. aspirados transtraqueais;
  4. pus retirado de abscessos
  5. fluido do cérebro de volta;
  6. punções pulmonares.

As amostras devem ser movidas rapidamente para o seu destino. O trabalho é realizado em um recipiente especializado, às vezes em um saco plástico.

Deve ser projetado para condições anaeróbicas. Porque a interação das amostras com o oxigênio atmosférico pode causar a morte completa das bactérias. Os tipos líquidos de amostras são movidos em tubos de ensaio, às vezes diretamente em seringas.

Se os cotonetes são movidos para pesquisa, eles são transportados apenas em tubos de ensaio com a presença de dióxido de carbono, às vezes com substâncias pré-fabricadas.

Organismos aeróbicos são aqueles organismos que são capazes de viver e se desenvolver apenas na presença de oxigênio livre no ambiente, que eles usam como agente oxidante. Os organismos aeróbios incluem todas as plantas, a maioria dos protozoários e animais multicelulares, quase todos os fungos, ou seja, a grande maioria espécies conhecidas Criaturas vivas.

Nos animais, a vida na ausência de oxigênio (anaerobiose) ocorre como uma adaptação secundária. Os organismos aeróbicos realizam a oxidação biológica principalmente através da respiração celular. Em conexão com a formação de produtos tóxicos da redução incompleta do oxigênio durante a oxidação, os organismos aeróbicos têm várias enzimas (catalase, superóxido dismutase) que garantem sua decomposição e estão ausentes ou funcionando mal em anaeróbios obrigatórios, para os quais o oxigênio se torna tóxico como resultado.

A cadeia respiratória é mais diversa em bactérias que possuem não apenas citocromo oxidase, mas também outras oxidases terminais.

Um lugar especial entre os organismos aeróbicos é ocupado por organismos capazes de fotossíntese - cianobactérias, algas, plantas vasculares. O oxigênio liberado por esses organismos garante o desenvolvimento de todos os outros organismos aeróbicos.

Organismos que podem crescer em baixas concentrações de oxigênio (≤ 1 mg/l) são chamados de microaerófilos.

Os organismos anaeróbicos são capazes de viver e se desenvolver na ausência de oxigênio livre no ambiente. O termo "anaeróbios" foi introduzido por Louis Pasteur, que descobriu as bactérias de fermentação butírica em 1861. Eles são distribuídos principalmente entre os procariontes. Seu metabolismo se deve à necessidade de utilizar outros agentes oxidantes além do oxigênio.

Muitos organismos anaeróbicos que usam matéria orgânica(todos os eucariotos que recebem energia como resultado da glicólise) realizam vários tipos de fermentação, nos quais são formados compostos reduzidos - álcoois, ácidos graxos.

Outros organismos anaeróbios - desnitrificantes (alguns deles reduzem o óxido de ferro), bactérias redutoras de sulfato e formadoras de metano - usam oxidantes inorgânicos: nitrato, compostos de enxofre, CO 2.

Bactérias anaeróbicas são divididas em grupos de butíricas, etc. de acordo com o principal produto de troca. Um grupo especial de anaeróbios são bactérias fototróficas.

Em relação ao O 2, as bactérias anaeróbicas são divididas em títulos, que não podem usá-lo em troca, e opcional(por exemplo, desnitrificante), que pode ir da anaerobiose ao crescimento em ambiente com O 2 .

Por unidade de biomassa, os organismos anaeróbios formam muitos compostos reduzidos, dos quais são os principais produtores na biosfera.

A seqüência de formação de produtos reduzidos (N 2 , Fe 2+, H 2 S, CH 4) observada durante a transição para anaerobiose, por exemplo, em sedimentos de fundo, é determinada pelo rendimento energético das reações correspondentes.

Os organismos anaeróbios desenvolvem-se em condições em que o O 2 é completamente utilizado por organismos aeróbicos, por exemplo, em esgotos e lamas.

Influência da quantidade de oxigênio dissolvido na composição de espécies e abundância de hidrobiontes.

O grau de saturação da água com oxigênio é inversamente proporcional à sua temperatura. A concentração de O 2 dissolvido nas águas superficiais varia de 0 a 14 mg/le está sujeita a significativas flutuações sazonais e diárias, que dependem principalmente da relação entre a intensidade de seus processos de produção e consumo.

No caso de uma fotossíntese de alta intensidade, a água pode ser significativamente supersaturada com O 2 (20 mg/le mais). NO ambiente aquático O oxigênio é o fator limitante. O 2 está na atmosfera 21% (em volume) e cerca de 35% de todos os gases dissolvidos na água. Sua solubilidade em água do maré 80% da solubilidade em água doce. A distribuição de oxigênio em um reservatório depende da temperatura, do movimento das camadas de água, bem como da natureza e do número de organismos que vivem nele.

A resistência dos animais aquáticos ao baixo teor de oxigênio varia entre as espécies. Entre os peixes, quatro grupos foram estabelecidos de acordo com sua relação com a quantidade de oxigênio dissolvido:

1) 7 - 11 mg / l - truta, peixinho, escultura;

2) 5 - 7 mg / l - grayling, gudgeon, chub, burbot;

3) 4 mg/l - barata, rufo;

4) 0,5 mg / l - carpa, tenca.

Alguns tipos de organismos se adaptaram aos ritmos sazonais no consumo de O 2 associado às condições de vida.

Assim, no crustáceo Gammarus Linnaeus, verificou-se que a intensidade dos processos respiratórios aumenta com a temperatura e varia ao longo do ano.

Em animais que vivem em locais pobres em oxigênio (lodo costeiro, lodo de fundo), foram encontrados pigmentos respiratórios que servem como reserva de oxigênio.

Essas espécies são capazes de sobreviver passando a uma vida lenta, a anaerobiose, ou pelo fato de possuírem d-hemoglobina, que tem alta afinidade pelo oxigênio (dáfnias, oligoquetas, poliquetas, alguns moluscos lamelares).

Outros invertebrados aquáticos sobem à superfície em busca de ar. Estes são adultos de besouros nadadores e besouros aquáticos, peixes lisos, escorpiões aquáticos e percevejos, caracóis de lagoa e bobina (moluscos gastrópodes). Alguns besouros se cercam de uma bolha de ar presa por um fio de cabelo, e os insetos podem usar o ar das vias aéreas das plantas aquáticas.

Os anaeróbios são bactérias que apareceram no planeta Terra antes de outros organismos vivos.

Eles desempenham um papel importante no ecossistema, são responsáveis ​​pela atividade vital dos seres vivos, participam do processo de fermentação e decomposição.

Ao mesmo tempo, os anaeróbios causam o desenvolvimento de doenças perigosas e processos inflamatórios.

O que são anaeróbios

Sob anaeróbios, costuma-se entender micro e macro-organismos que são capazes de viver na ausência de oxigênio. Eles recebem energia como resultado do processo de fosforilação do substrato.

O desenvolvimento e reprodução de anaeróbios ocorre em focos inflamatórios purulentos, afetando pessoas com imunidade fraca.

Classificação dos anaeróbios

Existem dois tipos dessas bactérias:

  • Facultativos, que são capazes de viver, desenvolver e reproduzir em ambientes sem oxigênio e sem oxigênio. Tais microrganismos incluem estafilococos, Escherichia coli, estreptococos, shigella;
  • Obrigar viver apenas em um ambiente onde não há oxigênio. Se esse elemento aparecer no ambiente, os anaeróbios obrigatórios morrerão.

Por sua vez, os anaeróbios obrigatórios são divididos em dois grupos:

  • Clostrídios são bactérias que formam esporos; excitar o desenvolvimento de infecções - butulismo, ferida, tétano.
  • Não clostrídios - bactérias que não são capazes de formar esporos. Eles vivem na microflora de pessoas e animais, não são perigosos para os seres vivos. Estas bactérias incluem eubactérias, peillonella, peptococcus, bacterióides.

Muitas vezes, os anaeróbios não clostrídios causam processos purulentos e inflamatórios, incluindo peritonite, pneumonia, sepse, otite, etc. Todas as infecções causadas por esse tipo de bactéria ocorrem sob a influência causas internas. O principal fator no desenvolvimento de infecções é uma diminuição da imunidade e resistência do corpo a micróbios patogênicos. Isso geralmente acontece após operações, lesões, hipotermia.

Exemplos de anaeróbios

Procariotos e protozoários. Cogumelos. Algas marinhas. Plantas. Helmintos são vermes, tênias e lombrigas. Infecções - intra-abdominais, intracranianas, pulmonares, feridas, abscessos, no pescoço e na cabeça, tecidos moles, líquido cefalorraquidiano. Pneumonia aspirativa. Periodontite.

As infecções provocadas por bactérias anaeróbicas causam o desenvolvimento de necrose, formação de abscesso, sepse e formação de gás. Muitos anaeróbios criam enzimas nos tecidos que produzem toxinas paralíticas.

Bactérias anaeróbicas causam o desenvolvimento das seguintes doenças: Infecções da cavidade oral. Sinusite. Acne. Inflamação do ouvido médio. Gangrena. Botulismo. Tétano. Além dos perigos, os anaeróbios são benéficos para os seres humanos. Em particular, eles convertem açúcares tóxicos prejudiciais em enzimas benéficas no cólon.

Diferenças entre anaeróbios e aeróbios

Os anaeróbios vivem principalmente em um ambiente onde não há oxigênio, enquanto os aeróbios são capazes de viver, desenvolver e se multiplicar apenas na presença de oxigênio. Os anaeróbios incluem pássaros, fungos, vários tipos de fungos e animais. O oxigênio em anaeróbios participa de todos os processos da vida, o que contribui para a formação e produção de energia.

Recentemente, cientistas da Holanda descobriram que os anaeróbios que vivem no fundo dos corpos d'água podem oxidar o metano. Neste caso, a redução de nitratos e nitritos, que liberam nitrogênio molecular. Arqueobactérias e eubactérias participam da formação desta substância.

Microbiologistas estão envolvidos no cultivo de microrganismos anaeróbios. Este processo requer uma microflora específica e um certo grau de concentração de metabólitos.

Os anaeróbios são cultivados em nutrientes - glicose, sulfato de sódio, caseína.

Os anaeróbios têm um metabolismo diferente, o que nos permite distinguir vários subgrupos de bactérias com base nisso. São organismos que utilizam respiração anaeróbica, energia da radiação solar, catabolismo de compostos macromoleculares.

Processos anaeróbicos são usados ​​para decompor e descontaminar o lodo de esgoto, para fermentar açúcares para produzir álcool etílico.

conclusões

Os anaeróbios podem trazer benefícios e danos aos seres humanos, animais e plantas. Se as condições forem formadas para o desenvolvimento de processos patogênicos, os anaeróbios provocarão infecções e doenças que podem ser fatais. Na indústria e na microbiologia, os cientistas estão tentando usar as propriedades anaeróbicas das bactérias para obter enzimas úteis, purificar a água e o solo.

infecção anaeróbica

Etiologia, patogênese, antibioticoterapia.

Prefácio ................................................. ........................................................ .. 1

Introdução ......................................... . ............................................. 2

1.1 Definição e caracterização .............................................. ............ .... 2

1.2 Composição da microflora dos principais biótopos humanos .......... 5

2. Fatores de patogenicidade de microrganismos anaeróbios .......... 6

2.1. O papel da microflora endógena anaeróbica na patologia

pessoa ................................................. ......................................................... ……. oito

3. As principais formas de infecção anaeróbica .................................................................. 10

3.1. Infecção pleuropulmonar ............................................. .............. .... dez

3.2. Infecção do pé diabético .................................................. .............................. . dez

3.3. Bacteremia e sepse ............................................. ............... ......... onze

3.4. Tétano................................................. .................................... onze

3.5. Diarréia................................................. ......................................... 12

3.6. Infecção cirúrgica de feridas e tecidos moles ....................... 12

3.7. Infecção de tecidos moles por produção de gás ............................................. ... 12

3.8. Mionecrose Clostridial ............................................. ................... ... 12

3.9. Infecção de ferida necrótica de desenvolvimento lento…13

3.10. Infecção intraperitoneal ............................................. ………….. 13

3.11. Características de abscessos anaeróbios experimentais ..... 13

3.12. Colite pseudomembranosa................................................ ......... .......... catorze

3.13. Infecção obstétrica e ginecológica ............................................. .........14

3.14. Infecção anaeróbica em pacientes com câncer……………..15

4. Diagnóstico laboratorial ............................................. .................. ................quinze

4.1. Material de pesquisa ......................................... ......................... ..quinze

4.2. Etapas da pesquisa de materiais no laboratório .................................................. ....16

4.3. Estudo direto do material ............................................. ......... ..........16

4.4. Métodos e sistemas para a criação de condições anaeróbicas ....................... 16

4.5. Meios nutritivos e cultivo ............................................. 17

5. Terapia antibiótica para infecção anaeróbica ........................................ ... 21

5.1. Características dos principais antimicrobianos,

usado no tratamento de infecção anaeróbica ..............................21

5.2. Combinação de medicamentos beta-lactâmicos e inibidores

beta-lactamases .................................................... ......................................................... ..24

5.3. Significado clínico do teste de suscetibilidade anaeróbica

microorganismos a drogas antimicrobianas.........................................24

6. Correção da microflora intestinal ................................……………….26

  1. Conclusão................................................. .......................................27
  2. Autores……………………………………………………………….27

Prefácio

Os últimos anos têm sido caracterizados pelo desenvolvimento acelerado de muitas áreas da microbiologia geral e clínica, o que provavelmente se deve tanto à nossa compreensão mais adequada do papel dos microrganismos no desenvolvimento de doenças quanto à necessidade de os médicos utilizarem constantemente informações sobre a etiologia das doenças, as propriedades dos patógenos com o objetivo de manejo bem sucedido dos pacientes e obtenção de resultados satisfatórios de quimioterapia ou quimioprofilaxia. Uma dessas áreas da microbiologia em rápido desenvolvimento é a bacteriologia anaeróbica clínica. Em muitos países do mundo, esta seção da microbiologia recebe atenção considerável. Seções dedicadas a anaeróbios e infecções anaeróbicas estão incluídas nos programas de treinamento para médicos de várias especialidades. Infelizmente, em nosso país, esta seção da microbiologia, tanto em termos de formação de especialistas quanto no aspecto diagnóstico do trabalho dos laboratórios bacteriológicos, recebeu atenção insuficiente. O manual metodológico "Infecção anaeróbica" abrange as principais seções deste problema - a definição e classificação, as características dos microrganismos anaeróbios, os principais biótopos de anaeróbios no corpo, as características das formas de infecção anaeróbica, as direções e métodos de laboratório diagnóstico, bem como o complexo antibacteriano -rapia (agentes antimicrobianos, resistência/suscetibilidade microbiana, métodos para sua determinação e superação). É natural que Conjunto de ferramentas não pretende fornecer respostas detalhadas para todos os aspectos da infecção anaeróbica. É bastante claro que os microbiologistas que desejam trabalhar na área de bacteriologia anaeróbia precisam passar por um ciclo de treinamento especial, dominar mais profundamente as questões de microbiologia, equipamentos de laboratório, métodos de indicação, cultivo e identificação de anaeróbios. Além disso, uma boa experiência é adquirida durante a participação em seminários e simpósios especiais sobre infecções anaeróbicas em nível nacional e internacional. Essas recomendações metodológicas são dirigidas a bacteriologistas, médicos de várias especialidades (cirurgiões, terapeutas, endocrinologistas, ginecologistas-obstetras, pediatras), estudantes de faculdades de medicina e biologia, professores de universidades médicas e faculdades de medicina.

Introdução

As primeiras ideias sobre o papel dos microrganismos anaeróbios na patologia humana surgiram há muitos séculos. No século 4 aC, Hipócrates descreveu em detalhes a clínica do tétano e, no século 4 dC, Xenofonte descreveu casos de gengivite ulcerativa necrosante aguda em soldados gregos. O quadro clínico da actinomicose foi descrito por Langenbeck em 1845. No entanto, naquela época não estava claro quais microrganismos causavam essas doenças, quais eram suas propriedades, assim como o conceito de anaerobiose estava ausente até 1861, quando Louis Pasteur publicou o trabalho clássico sobre o estudo do Vibrio butiriga e chamou os organismos que vivem na ausência de ar "anaeróbios" (17). Posteriormente, Louis Pasteur (1877) isolou e cultivou Clostridium septicum , e Israel em 1878 ele descreveu actinomicetos. O agente causador do tétano é Clostridium tetani - identificado em 1883 por N. D. Monastyrsky, e em 1884 por A. Nikolayer. Os primeiros estudos de pacientes com infecção anaeróbica clínica foram realizados por Levy em 1891. O papel dos anaeróbios no desenvolvimento de uma variedade de patologias médicas foi descrito e discutido pela primeira vez por Veiloon. e Zuber em 1893-1898. Descreveram vários tipos de infecções graves causadas por microrganismos anaeróbios (gangrena do pulmão, apendicite, abscessos do pulmão, cérebro, pelve, meningite, mastoidite, otite média crônica, bacteremia, parametrite, bartolinite, artrite purulenta). Além disso, eles desenvolveram muitas abordagens metodológicas para o isolamento e cultivo de anaeróbios (14). Assim, no início do século XX, muitos dos microrganismos anaeróbios tornaram-se conhecidos, formou-se uma ideia do seu significado clínico e criou-se uma técnica adequada para cultivo e isolamento de microrganismos anaeróbios. Desde os anos 60 e até hoje, a urgência do problema das infecções anaeróbicas continua a crescer. Isso se deve tanto ao papel etiológico dos microrganismos anaeróbios na patogênese das doenças quanto ao desenvolvimento de resistência aos antibacterianos amplamente utilizados, bem como ao curso severo e alta mortalidade das doenças que causam.

1.1. Definição e caracterização

Na microbiologia clínica, os microrganismos são comumente classificados com base em sua relação com o oxigênio atmosférico e o dióxido de carbono. Isso é fácil de verificar ao incubar microrganismos em ágar sangue sob várias condições: a) em ar normal (21% de oxigênio); b) em condições de incubadora de CO 2 (15% de oxigênio); c) em condições microaerofílicas (5% de oxigênio) d) em condições anaeróbicas (0% de oxigênio). Usando esta abordagem, as bactérias podem ser divididas em 6 grupos: aeróbios obrigatórios, aeróbios microaerófilos, anaeróbios facultativos, anaeróbios aerotolerantes, anaeróbios microaerotolerantes, anaeróbios obrigatórios. Esta informação é útil para a identificação primária de aeróbios e anaeróbios.

Aeróbios. Para crescimento e reprodução, os aeróbios obrigatórios precisam de uma atmosfera contendo oxigênio molecular em uma concentração de 15-21% ou CO; incubadora. Micobactérias, Vibrio cholerae e alguns fungos são exemplos de aeróbios obrigatórios. Esses microrganismos obtêm a maior parte de sua energia através do processo de respiração.

microaerófilos(aeróbios microaerofílicos). Eles também precisam de oxigênio para se reproduzir, mas em concentrações inferiores às presentes na atmosfera da sala. Gonococos e Campylobacter são exemplos de bactérias microaerofílicas e preferem uma atmosfera com teor de O2 de cerca de 5%.

anaeróbios microaerofílicos. Bactérias capazes de crescer em condições anaeróbicas e microaerofílicas, mas incapazes de crescer em uma incubadora de CO2 ou ambiente aéreo.

Anaeróbios. Os anaeróbios são microrganismos que não precisam de oxigênio para viver e se reproduzir. Os anaeróbios obrigatórios são bactérias que crescem apenas em condições anaeróbicas, ou seja, em uma atmosfera livre de oxigênio.

Microrganismos aerotolerantes. Capazes de crescer em uma atmosfera contendo oxigênio molecular (ar, incubadora de CO2), mas crescem melhor em condições anaeróbicas.

Anaeróbios facultativos(aeróbios facultativos). Capaz de sobreviver na presença ou ausência de oxigênio. Muitas bactérias isoladas de pacientes são anaeróbias facultativas (enterobactérias, estreptococos, estafilococos).

capnófilos. Uma série de bactérias que crescem melhor na presença de concentrações elevadas de CO 2 são chamadas de capnófilos, ou organismos capnofílicos. Bacteroides, fusobacteria, bactérias hemoglobinofílicas são capnófilos, pois crescem melhor em uma atmosfera contendo 3-5% de CO 2 (2,

19,21,26,27,32,36).

Os principais grupos de microrganismos anaeróbios são apresentados na tabela 1. (42, 43,44).

MesaEU. Os microrganismos anaeróbios mais importantes

Gênero

Tipos

uma breve descrição de

Bacteroides

NO. frágil

NO. vulgar

NO. distância

NO. eggerthii

Esporos Gram-negativos, não formadores de bastonetes

Prevotella

P. melaninogenicus

P. bivia

P. bucalis

P. denticola

P. intermedia

Porphyromonas

P. asaccharolyticum

P. endodontalis

P. gingivalis

Esporos Gram-negativos, não formadores de bastonetes

Ctostridium

C. perfringens

C. ramosum

C. septicum

C. novyi

C. esporogenes

C. sordelii

C. tetani

C. botulinum

C. difficile

bacilos ou bacilos Gram-positivos formadores de esporos

Actinomyces

MAS. Israel

A. bovis

Pseudoramibacter *

P. alactolítico

Bastonetes Gram-positivos, não formadores de esporos

E. lentum

E.retal

E. limosum

Bastonetes Gram-positivos, não formadores de esporos

Bifidobactéria

B. eriksonii

B. adolescenteis

B.breve

Bastões Gram-positivos

Propionobactéria

P. acnes

P. avidum

P. granuloso

P. propiônica**

Gram-positivo. bastonetes não formadores de esporos

Lactobacillus

L. catenaforme

L. acidophilus

Bastões Gram-positivos

Peptococo

P. magnus

P. saccharolyticus

P. asaccharolyticus

Peptoestreptococo

P. anaeróbio

P. intermediário

P.micros

P. productus

Cocos Gram-positivos, não formadores de esporos

Veilonella

V. parvula

Cocos Gram-negativos não esporulados

Fusobacterium

F. nucleatum

F. necrophorum

F. vário

F. mortiferum

Fusiforme Gravetos

campylobacter

C. feto

C.jejuni

Bastonetes Gram-negativos, finos, espirais, não formadores de esporos

* Eubactéria alaclolyticum reclassificado como Pseudoramibacter alactolítico (43,44)

** anteriormente Aracnia propionica (44)

*** sinônimos F. pseudonecrophorum, F. necrophorum biovar A PARTIR DE(42,44)

1.2. A composição da microflora dos principais biótopos humanos

A etiologia das doenças infecciosas tem sofrido mudanças significativas nas últimas décadas. Como se sabe, antigamente o principal perigo para a saúde humana eram as infecções agudamente contagiosas: febre tifóide, disenteria, salmonelose, tuberculose e muitas outras, transmitidas principalmente por meios exógenos. Embora essas infecções ainda permaneçam socialmente importantes e agora seu significado médico está aumentando novamente, em geral, seu papel diminuiu significativamente. Ao mesmo tempo, há um aumento no papel de microrganismos oportunistas, representantes da microflora normal do corpo humano. A composição da microflora humana normal inclui mais de 500 espécies de microrganismos. A microflora normal que vive no corpo humano é amplamente representada por anaeróbios (Tabela 2).

Bactérias anaeróbias que habitam a pele e mucosas humanas, realizando a transformação microbiana de substratos de origem exógena e endógena, produzem uma ampla gama de diversas enzimas, toxinas, hormônios e outros compostos biologicamente ativos que são absorvidos e se ligam a receptores complementares e afetam o função das células e órgãos. O conhecimento da composição da microflora normal específica de certas regiões anatômicas é útil para a compreensão da etiologia dos processos infecciosos. A totalidade das espécies de microrganismos que habitam uma determinada região anatômica é chamada de microflora indígena. Além disso, a detecção de micro-organismos específicos em quantidade significativa à distância ou em local inusitado para habitação apenas enfatiza sua participação no desenvolvimento do processo infeccioso (11, 17,18, 38).

Trato respiratório. A microflora do trato respiratório superior é muito diversificada e inclui mais de 200 espécies de microrganismos que fazem parte de 21 gêneros. 90% das bactérias da saliva são anaeróbicas (10, 23). A maioria desses microrganismos não é classificada métodos modernos taxonomias e não são essenciais para a patologia. O trato respiratório de pessoas saudáveis ​​é mais comumente colonizado pelos seguintes microrganismos - Estreptococo pneumoniae- 25-70%; H aemófilo influenzae- 25-85%; Estreptococo pyogenes- 5-10%; Neisseria meningitidis- 5-15%. Microrganismos anaeróbios, como Fusobacterium, Bacteroides espiral, Peptoestreptococo, Peptococo, Veilonella e alguns tipos Actinomyces encontrado em quase todas as pessoas saudáveis. As bactérias coliformes são encontradas no trato respiratório em 3-10% das pessoas saudáveis. O aumento da colonização do trato respiratório por esses microrganismos foi encontrado em alcoólatras, pessoas com um curso grave da doença, em pacientes que receberam terapia antibacteriana que suprime a microflora normal, bem como em pessoas com funções do sistema imunológico prejudicadas.

Tabela 2. Conteúdo quantitativo de microrganismos em biótopos

corpo humano normal

Populações de microrganismos no trato respiratório adaptam-se a certos nichos ecológicos (nariz, faringe, língua, fendas gengivais). A adaptação dos microrganismos a esses biótopos é determinada pela afinidade das bactérias por determinados tipos de células ou superfícies, ou seja, é determinada pelo tropismo celular ou tecidual. Por exemplo, Estreptococo salivarius bem aderido ao epitélio da bochecha e domina na composição da mucosa bucal. bactérias de adesão -

riy também pode explicar a patogênese de certas doenças. Estreptococo pyogenes adere bem ao epitélio da faringe e muitas vezes causa faringite, a E. coli tem afinidade com o epitélio da bexiga e, portanto, causa cistite.

Couro. A microflora indígena da pele é representada principalmente por bactérias dos seguintes gêneros: Estafilococo, Micrococcus, Companhiarinobactéria, Propionobactéria, Brevibacterium e Acinetobacter. Também estão frequentemente presentes leveduras do gênero Pityrosporium. Os anaeróbios são representados em grande parte por bactérias gram-positivas do gênero propi- onobactéria (usualmente Propionobactéria acnes). Cocos Gram-positivos (Peptoestreptococo spp.) e Bactérias Gram-positivas do gênero Eubactéria presente em alguns indivíduos.

Uretra. As bactérias que colonizam a uretra distal são estafilococos, estreptococos não hemolíticos, difteróides e, em um pequeno número de casos, vários membros da família Enterobacteriaceae. Os anaeróbios são representados em maior medida por bactérias gram-negativas - BacteroideseFusobacterium spp..

Vagina. Cerca de 50% das bactérias do segredo do colo do útero e da vagina são anaeróbias. A maioria dos anaeróbios são representados por lactobacilos e peptoestreptococos. Prevo-tells são frequentemente encontrados - P. bivia e P. disiens. Além disso, bactérias Gram-positivas do gênero Mobiluncus e Clostridium.

Intestinos. Das 500 espécies que habitam o corpo humano, aproximadamente 300 a 400 espécies vivem nos intestinos. As seguintes bactérias anaeróbicas são encontradas em maior número no intestino - Bacteroides, Bifidobactéria, Clostridium, Eubactéria, LactobacillusePeptoestrepto- coco. Bacteróides são os microrganismos dominantes. Foi estabelecido que para uma célula de Escherichia coli existem mil células de bacteróides.

2. Fatores de patogenicidade de microrganismos anaeróbios

A patogenicidade dos microrganismos significa sua capacidade potencial de causar doenças. O surgimento da patogenicidade em micróbios está associado à aquisição por eles de uma série de propriedades que proporcionam a capacidade de se fixar, penetrar e se espalhar no corpo do hospedeiro, resistir aos seus mecanismos de defesa e causar danos a órgãos e sistemas vitais. Ao mesmo tempo, sabe-se que a virulência dos microrganismos é uma propriedade polideterminada, que se realiza plenamente apenas no organismo de um hospedeiro sensível ao patógeno.

Atualmente, vários grupos de fatores de patogenicidade são distinguidos:

a) adesinas, ou fatores de fixação;

b) fatores de adaptação;

c) invasores ou fatores de penetração

d) cápsula;

e) citotoxinas;

e) endotoxinas;

g) exotoxinas;

h) toxinas enzimáticas;

i) fatores moduladores do sistema imunológico;

j) superantígenos;

k) proteínas de choque térmico (2, 8, 15, 26, 30).

Os estágios e mecanismos, a gama de reações, interações e relacionamentos nos níveis molecular, celular e do organismo entre os microrganismos e o organismo hospedeiro são muito complexos e diversos. Conhecimento sobre fatores de patogenicidade de microrganismos anaeróbios e seus uso pratico para prevenir a doença ainda não é suficiente. A Tabela 3 mostra os principais grupos de fatores patogênicos de bactérias anaeróbias.

Tabela 3. Fatores de patogenicidade de microrganismos anaeróbios

Estágio de interação

Fator

Tipos

Adesão

Polissacarídeos capsulares da Fimbria

Hemaglutininas

Invasão

Fosfolipase C

Proteases

Dano

tecidos

Exotoxinas

Hemolisinas

Proteases

colagenase

fibrinolisina

Neuraminidase

Heparinase

Sulfato de condriitina glicuronidase

N-acetil-glucosaminidase Citotoxinas

Enterotoxinas

neurotoxinas

P. melaninogenica

P. melaninogenica

Fatores que suprimem o sistema imunológico

Produtos metabólicos Lipopolissacarídeos

(O-antígeno)

Proteases de imunoglobulina (G, A, M)

C 3 e C 5 convertase

Protease a 2-microglobulina Produtos metabólicos Ácidos graxos de anaeróbios

Compostos de enxofre

Oxidorredutase

Beta-lactamases

A maioria dos anaeróbios

Ativadores de fator de dano

Lipopolissacarídeos

(O-antígeno)

Estruturas de superfície

Foi agora estabelecido que os fatores de patogenicidade de microrganismos anaeróbios são determinados geneticamente. Genes cromossômicos e plasmidiais, bem como transposons que codificam vários fatores de patogenicidade, foram identificados. O estudo das funções desses genes, mecanismos e padrões de expressão, transmissão e circulação em uma população de microrganismos é um problema muito importante.

2.1. O papel da microflora endógena anaeróbica na patologia humana

Microrganismos anaeróbios da microflora normal muitas vezes se tornam os agentes causadores de processos infecciosos localizados em várias partes anatômicas do corpo. A Tabela 4 mostra a frequência da microflora anaeróbia no desenvolvimento da patologia. (2, 7, 11, 12, 18, 24, 27).

É possível formular uma série de generalizações importantes sobre a etiologia e patogênese da maioria dos tipos de infecções anaeróbias: 1) a fonte de microrganismos anaeróbios é a microflora normal de pacientes do próprio trato gastrointestinal, respiratório ou urogenital; 2) alterações nas propriedades teciduais decorrentes de trauma e/ou hipóxia proporcionam condições adequadas para o desenvolvimento de uma infecção anaeróbica secundária ou oportunista; 3) as infecções anaeróbicas, via de regra, são polimicrobianas e muitas vezes são causadas por uma mistura de vários tipos de microrganismos anaeróbios e aeróbios, exercendo sinergicamente um efeito danoso; 4) a infecção é acompanhada pela formação e liberação de odor forte em cerca de 50% dos casos (os anaeróbios não esporulados sintetizam ácidos graxos voláteis que causam esse odor); 5) a infecção é caracterizada pela formação de gases, necrose tecidual, desenvolvimento de abscessos e gangrena; 6) a infecção se desenvolve durante o tratamento com antibióticos aminoglicosídeos (os bacteróides são resistentes a eles); 7) observa-se coloração preta do exsudato (porfiromonas e prevotella produzem pigmento marrom escuro ou preto); 8) a infecção tem um curso prolongado, lento, muitas vezes subclínico; 9) há extensas alterações teciduais necróticas, discrepância entre a gravidade dos sintomas clínicos e o volume das alterações destrutivas, sangramento baixo na incisão.

Embora as bactérias anaeróbicas possam causar infecções graves e fatais, o início da infecção geralmente depende do estado dos fatores de defesa do organismo, ou seja, funções do sistema imunológico (2, 5, 11). Os princípios de tratamento de tais infecções incluem a remoção do tecido morto, drenagem, restauração da circulação sanguínea adequada, remoção de substâncias estranhas e uso de terapia antimicrobiana ativa adequada ao patógeno, em dose e duração adequadas.

Tabela 4. Papel etiológico da microflora anaeróbica

em desenvolvimento doenças

Doenças

Número de examinados

Frequência de isolamento de anaeróbios

Cabeça e pescoço

Abscessos cranianos não traumáticos

Sinusite crônica

Infecções do espaço perimandibular

Caixa torácica

Pneumonia por aspiração

Abscesso pulmonar

Abdômen

Abscessos ou peritonite Apendicite

abscesso hepático

trato genital feminino

tipos mistos

Abscessos pélvicos Processos inflamatórios

33 (100%) 22 (88%)

tecidos macios

infecção da ferida

Abscessos da pele

Úlceras de membros diabéticos Celulite não clostridial

bacteremia

Todas as culturas

Sepse intra-abdominal Aborto séptico

3. Principais formas de infecção anaeróbica

3.1. Infecção pleuropulmonar

Microrganismos anaeróbios etiologicamente significativos nesta patologia são representantes da microflora normal da cavidade oral e do trato respiratório superior. Eles são os agentes causadores de várias infecções, incluindo pneumonia aspirativa, pneumonia necrosante, actinomicose e abscesso pulmonar. Os principais agentes causadores de doenças pleuropulmonares são apresentados na Tabela 5.

Tabela 5. Bactérias anaeróbicas que causam

pleuropulmonar infecção

Os fatores que contribuem para o desenvolvimento de uma infecção pleuropulmonar anaeróbica em um paciente incluem aspiração de microflora normal (como resultado de perda de consciência, disfagia, presença de objetos mecânicos, obstrução, má higiene oral, necrotização do tecido pulmonar) e disseminação hematogênica de microorganismos. Como pode ser visto na Tabela 5, a pneumonia por aspiração é mais comumente causada por organismos anteriormente chamados de espécies "bacteróides orais" (atualmente espécies de Prevotella e Porphyromonas), Fusobacterium e Peptostreptococcus. O espectro de bactérias isoladas de empiema anaeróbio e abscesso pulmonar é quase o mesmo.

3.2. Infecção do pé diabético

Entre os mais de 14 milhões de diabéticos nos Estados Unidos, o mau odor nos pés é a causa infecciosa mais comum de hospitalização. Esse tipo de infecção é muitas vezes ignorado pelos pacientes em estágio inicial e, às vezes, tratado inadequadamente pelos médicos. Em geral, os pacientes não procuram examinar cuidadosa e regularmente as extremidades inferiores e não seguem as recomendações dos médicos quanto aos cuidados e regime de caminhada. O papel dos anaeróbios no desenvolvimento de infecções nos pés de diabéticos foi estabelecido há muitos anos. Os principais tipos de microrganismos que causam esse tipo de infecção são apresentados na Tabela 6.

Tabela 6. Microrganismos aeróbios e anaeróbios que causam

infecção do pé em diabéticos

Aeróbios

Anaeróbios

Proteus mirabili

Bacteroides fragilis

Pseudomonas aeruginosa

outras espécies do grupo B. fragilis

Enterobacter aerogenes

Prevotella melaninogenica

Escherichia coli

outras espécies de Prevotella\ Porphyromonas

Klebsiella pneumonia

Fusobacterium nucleatum

outras fusobactérias

Peptoestreptococo

Staphylococcus aureus

outros tipos de clostrídios

Foi estabelecido que 18-20% dos pacientes diabéticos têm uma infecção mista aeróbica/anaeróbica. Em média, 3,2 espécies de microorganismos aeróbios e 2,6 anaeróbios foram detectados em um paciente, sendo as bactérias anaeróbias dominantes os peptoestreptococos. Bacteróides, prevotella e clostrídios também foram frequentemente detectados. De feridas profundas, uma associação de bactérias foi isolada em 78% dos casos. Microflora aeróbica Gram-positiva (estafilococos e estreptococos) foi detectada em 25% dos pacientes, e microflora aeróbica Gram-negativa em forma de bastonete foi detectada em aproximadamente 25% dos pacientes. Cerca de 50% das infecções anaeróbicas são mistas. Essas infecções são mais graves e na maioria das vezes requerem amputação do membro afetado.

3.3. bacteremia e sepse

A proporção de microrganismos anaeróbios no desenvolvimento de bacteremia varia de 10 a 25%. A maioria dos estudos mostra que NO.frágil e outras espécies deste grupo, bem como Bacteroides thetaiotamicron são a causa mais comum de bacteremia. Clostrídios são os próximos em frequência (especialmente Clostridium perfringens) e peptoestreptococos. Eles são frequentemente isolados em cultura pura ou em associações. Nas últimas décadas, em muitos países do mundo houve um aumento na frequência de sepse anaeróbia (de 0,67 para 1,25 casos por 1.000 internados no hospital). A mortalidade em pacientes com sepse causada por microrganismos anaeróbios é de 38-50%.

3.4. Tétano

O tétano tem sido uma infecção grave e muitas vezes fatal bem conhecida desde a época de Hipócrates. Durante séculos, esta doença tem sido um problema urgente associado a tiros, queimaduras e feridas traumáticas. controvérsia Clostridium tétano são encontrados em fezes humanas e animais e são amplamente distribuídos no meio ambiente. Ramon e colegas em 1927 propuseram com sucesso a imunização com toxóide para a prevenção do tétano. O risco de desenvolver tétano é maior em pessoas com mais de 60 anos devido à diminuição da eficácia/perda da imunidade antitóxica protetora pós-vacinação. A terapia inclui administração de imunoglobulinas, desbridamento da ferida, terapia antimicrobiana e antitóxica, cuidados de enfermagem contínuos, sedativos e analgésicos. Atualmente, está sendo dada atenção especial ao tétano neonatal.

3.5. Diarréia

Há uma série de bactérias anaeróbicas que causam diarréia. Anaerobiospirillum produtores succínicos- bactérias móveis em forma de espiral com flagelos bipolares. O agente causador é excretado nas fezes de cães e gatos com infecções assintomáticas, bem como de pessoas com diarreia. Cepas enterotoxigênicas NO.frágil. Em 1984 Mayer mostrou o papel das cepas produtoras de toxinas NO.frágil na patogênese da diarreia. As cepas toxigênicas desse patógeno são isoladas de diarreia em humanos e animais. Eles não podem ser diferenciados de cepas comuns por métodos bioquímicos e sorológicos. No experimento, causam diarreia e lesões características do intestino grosso e do intestino delgado distal com hiperplasia das criptas. A enterotoxina tem um peso molecular de 19,5 kD e é termolábil. A patogênese, o espectro e a frequência de incidência, bem como a terapia ideal, ainda não foram suficientemente desenvolvidos.

3.6. Infecção anaeróbica cirúrgica de feridas e tecidos moles

Os agentes infecciosos isolados de feridas cirúrgicas dependem em grande parte do tipo de intervenção cirúrgica. A causa da supuração em intervenções cirúrgicas limpas que não são acompanhadas por uma abertura do trato gastrointestinal, urogenital ou respiratório, como regra, é St. aureus. Em outros tipos de supuração de feridas (limpamente contaminada, contaminada e suja), uma microflora polimicrobiana mista de órgãos ressecados cirurgicamente é mais frequentemente isolada. Nos últimos anos, houve um aumento no papel da microflora oportunista no desenvolvimento de tais complicações. A maioria das feridas superficiais é diagnosticada tardiamente, entre o oitavo e o nono dia após a cirurgia. Se a infecção se desenvolver mais cedo - nas primeiras 48 horas após a cirurgia, isso é típico de uma infecção gangrenosa causada por certas espécies de clostrídios ou estreptococos beta-hemolíticos. Nesses casos há um aumento dramático na gravidade da doença, toxicose pronunciada, rápido desenvolvimento local da infecção com o envolvimento de todas as camadas dos tecidos do corpo no processo.

3.7. Geração de gás infecção de tecidos moles

A presença de gás em tecidos infectados é um sinal clínico ameaçador e, no passado, essa infecção era mais frequentemente associada por médicos à presença de patógenos de gangrena gasosa clostridial. Sabe-se agora que a infecção produtora de gás em pacientes cirúrgicos é causada por uma mistura de microrganismos anaeróbios, como Clostridium, Peptoestreptococo ou Bacteroides, ou um dos tipos de bactérias coliformes aeróbicas. Os fatores predisponentes para o desenvolvimento desta forma de infecção são doenças vasculares das extremidades inferiores, diabetes, trauma.

3.8. Mionecrose Clostridial

A gangrena gasosa é um processo destrutivo do tecido muscular associado à crepitação local, intoxicação sistêmica grave causada por clostrídios anaeróbios formadores de gás. Em humanos, eles são normalmente habitantes do trato gastrointestinal e genital feminino. Às vezes, eles podem ser encontrados na pele e na cavidade oral. A espécie mais significativa das 60 conhecidas é Clostridium perfringens. Este microrganismo é mais tolerante ao oxigênio atmosférico e cresce rapidamente. É uma toxina alfa, a fosfolipase C (lecitinase), que decompõe a lecitina em fosforilcolina e diglicerídeos, além de colagenase e proteases, que causam destruição tecidual. A produção de alfa-toxina está associada à alta mortalidade na gangrena gasosa. Possui propriedades hemolíticas, destrói plaquetas, causa danos intensos aos capilares e destruição tecidual secundária. Em 80% dos casos, a mionecrose é causada A PARTIR DE.perfringens. Além disso, a etiologia desta doença está envolvida A PARTIR DE.novyi, A PARTIR DE. septicum, A PARTIR DE.bifer- mentes. Outros tipos de Clostridium C. histolithicum, A PARTIR DE.esporogenes, A PARTIR DE.falácia, A PARTIR DE.tertium são de baixa significância etiológica.

3.9. Infecção de ferida necrótica de crescimento lento

Infecção agressiva da ferida com risco de vida Pode ocorrer até 2 semanas após a infecção, especialmente em pacientes diabéticos

doente. Geralmente, são infecções fasciais mistas ou monomicrobianas. As infecções monomicrobianas são relativamente raras. em cerca de 10% dos casos e são geralmente observadas em crianças. Os agentes causadores são estreptococos do grupo A, Staphylococcus aureus e estreptococos anaeróbios (Peptostreptococcus). Estafilococos e estreptococos hemolíticos são isolados com a mesma frequência em cerca de 30% dos pacientes. A maioria deles está infectada fora do hospital. A maioria dos adultos tem fascelite necrosante das extremidades (em 2/3 dos casos, as extremidades são afetadas). Em crianças, o tronco e a virilha são mais comumente envolvidos. A infecção polimicrobiana inclui vários processos causados ​​pela microflora anaeróbica. Em média, cerca de 5 tipos principais são distinguidos de feridas. A mortalidade nessas doenças permanece alta (cerca de 50% entre os pacientes com formas graves). As pessoas mais velhas tendem a ter um prognóstico ruim. A mortalidade em pessoas com mais de 50 anos é superior a 50% e em pacientes com diabetes - mais de 80%.

3.10. infecção intraperitoneal

As infecções intra-abdominais são as mais difíceis de diagnóstico precoce e tratamento eficaz. Um resultado bem-sucedido depende principalmente do diagnóstico precoce, da intervenção cirúrgica imediata e adequada e do uso de um regime antimicrobiano eficaz. A natureza polimicrobiana da microflora bacteriana envolvida no desenvolvimento de peritonite como resultado de perfuração na apendicite aguda foi demonstrada pela primeira vez em 1938 Altemeier. O número de microrganismos aeróbios e anaeróbios isolados de locais de sepse intra-abdominal depende da natureza da microflora ou do órgão lesado. Os dados generalizados indicam que o número médio de espécies bacterianas isoladas do foco de infecção varia de 2,5 a 5. Para microrganismos aeróbios, esses dados são 1,4–2,0 espécies e 2,4–3,0 espécies de microrganismos anaeróbios. Pelo menos 1 tipo de anaeróbios é detectado em 65-94% dos pacientes. Dos microrganismos aeróbios, Escherichia coli, Klebsiella, Streptococcus, Proteus, Enterobacter são os mais frequentemente detectados, e dos microrganismos anaeróbios - Bacteroides, Peptostreptococci, Clostridia. Bacteroides são responsáveis ​​por 30% a 60% de todas as cepas isoladas de microrganismos anaeróbios. De acordo com os resultados de vários estudos, 15% das infecções são causadas por microflora anaeróbica e 10% por microflora aeróbica e, portanto, 75% são causadas por associações. O mais significativo deles- E.coli e NO.frágil. De acordo com N. S. Bogomolova e L. V. Bolshakov (1996), a infecção anaeróbica

foi a causa do desenvolvimento de doenças odontogênicas em 72,2% dos casos, peritonite apendicular - em 62,92% dos casos, peritonite por doenças ginecológicas - em 45,45% dos pacientes, colangite - em 70,2%. A microflora anaeróbica foi mais frequentemente isolada em peritonite grave nos estágios tóxico e terminal da doença.

3.11. Caracterização de abscessos anaeróbios experimentais

Em experimento NO.frágil inicia o desenvolvimento de abscesso subcutâneo. Os eventos iniciais são a migração de leucócitos polimorfonucleares e o desenvolvimento de edema tecidual. Após 6 dias, 3 zonas são claramente identificadas: interna - consiste em massas necróticas e células inflamatórias e bactérias alteradas degenerativamente; a do meio é formada a partir da diáfise leucocitária e a zona externa é representada por uma camada de colágeno e tecido fibroso. A concentração de bactérias varia de 10 8 a 10 9 em 1 ml de pus. Um abscesso é caracterizado por um baixo potencial redox. É muito difícil de tratar, pois há destruição dos antimicrobianos pelas bactérias, bem como fuga dos fatores de defesa do hospedeiro.

3.12. Colite pseudomembranosa

A colite pseudomembranosa (CMP) é uma doença gastrointestinal grave caracterizada por placas exsudativas na mucosa do cólon. Esta doença foi descrita pela primeira vez em 1893, muito antes do advento dos antimicrobianos e seu uso para fins medicinais. Já foi estabelecido que o fator etiológico desta doença é Clostridium difícil. A violação da microecologia do intestino devido ao uso de antibióticos é a causa do desenvolvimento de MVP e da ampla disseminação de infecções causadas por A PARTIR DE.difícil, cujo espectro clínico de manifestações varia amplamente - de transporte e diarréia de curta duração, passando espontaneamente ao desenvolvimento de MVP. O número de pacientes com colite causada por C. difícil, entre pacientes ambulatoriais 1-3 por 100.000, e entre pacientes hospitalizados 1 por 100-1000.

Patogênese. Colonização do intestino humano com cepas toxigênicas A PARTIR DE,difícil é um fator importante desenvolvimento do PMK. No entanto, o transporte assintomático ocorre em aproximadamente 3-6% dos adultos e 14-15% das crianças. A microflora intestinal normal serve como uma barreira confiável à colonização por microrganismos patogênicos. É facilmente perturbado por antibióticos e muito difícil de recuperar. O efeito mais pronunciado na microflora anaeróbica são as cefalosporinas de 3ª geração, clindamicina (grupo lincomicina) e ampicilina. Como regra, todos os pacientes com MVP sofrem de diarreia. Ao mesmo tempo, as fezes são líquidas com impurezas de sangue e muco. Há hiperemia e inchaço da mucosa intestinal. A colite ulcerativa ou proctite é frequentemente observada, caracterizada por granulações, mucosa hemorrágica. A maioria dos pacientes com esta doença apresenta febre, leucocitose e tensão abdominal. Subsequentemente, complicações graves podem se desenvolver, incluindo intoxicação geral e local, hipoalbuminemia. Os sintomas de diarreia associada a antibióticos começam nos dias 4-5 da antibioticoterapia. Nas fezes desses pacientes, S. difícil em 94% dos casos, enquanto em adultos saudáveis ​​esse microrganismo é isolado em apenas 0,3% dos casos.

A PARTIR DE.difícil produz dois tipos de exotoxinas altamente ativas - A e B. A toxina A é uma enterotoxina que causa hipersecreção e acúmulo de líquido no intestino, além de uma reação inflamatória com síndrome hemorrágica. A toxina B é uma citotoxina. É neutralizado pelo soro antigrenoso polivalente. Essa citotoxina é encontrada em aproximadamente 50% dos pacientes com colite associada a antibióticos sem formação pseudomembranosa e em 15% dos pacientes com diarreia associada a antibióticos com achados normais de sigmoidoscopia. Sua ação citotóxica baseia-se na despolimerização do microfilamento de actina e no dano ao citoesqueleto dos enterócitos. Recentemente, mais e mais dados têm aparecido em A PARTIR DE.difícil como agente infeccioso nosocomial. Nesse sentido, é desejável isolar os pacientes cirúrgicos, portadores desse microrganismo, a fim de evitar a disseminação da infecção no hospital. A PARTIR DE.difícil mais sensíveis à vancomicina, metronidazol e bacitracina. Assim, essas observações confirmam que as cepas produtoras de toxinas A PARTIR DE.difícil causar uma ampla gama de doenças, incluindo diarréia, colite e MVP.

3.13. Infecções obstétrico-ginecológicas

Compreender os padrões de desenvolvimento de infecções dos órgãos genitais femininos é possível com base em um estudo aprofundado da microbiocenose da vagina. A microflora normal da vagina deve ser considerada como barreira protetora contra os patógenos mais comuns.

Os processos disbióticos contribuem para a formação da vaginose bacteriana (BV). A VB está associada ao desenvolvimento de complicações como infecções anaeróbicas pós-operatórias de tecidos moles, endometrite pós-parto e pós-aborto, aborto prematuro, infecção intra-amniótica (10). A infecção obstétrico-ginecológica é de natureza polimicrobiana. Em primeiro lugar, gostaria de observar o papel crescente dos anaeróbios no desenvolvimento de processos inflamatórios agudos dos órgãos pélvicos - inflamação aguda dos apêndices uterinos, endometrite pós-parto, especialmente após o parto operatório, complicações pós-operatórias em ginecologia (pericultite, abscessos, infecção da ferida) (5). Os microrganismos mais comumente isolados de infecções do trato genital feminino incluem Bactemidas frágil, assim como os tipos Peptococo e Peptoestreptococo. Os estreptococos do grupo A não são comumente encontrados em infecções pélvicas. Os estreptococos do grupo B geralmente causam sepse em pacientes obstétricas cuja porta de entrada é o trato genital. Nos últimos anos, com infecções obstétricas e ginecológicas, cada vez mais é alocado A PARTIR DE.trachomatis. Entre os processos infecciosos mais comuns do trato urogenital estão a pelvioperitonite, endometrite após cesariana, infecções do manguito vaginal após histerectomia, infecções pélvicas após aborto séptico. A eficácia da clindamicina nessas infecções varia de 87% a 100% (10).

3.14. Infecção anaeróbica em pacientes com câncer

O risco de infecção em pacientes com câncer é incomparavelmente maior do que em outros pacientes cirúrgicos. Esta característica é explicada por uma série de fatores - gravidade da doença de base, imunodeficiência, grande número de procedimentos diagnósticos e terapêuticos invasivos, grande volume e traumatismo das intervenções cirúrgicas, uso de métodos de tratamento muito agressivos - rádio e quimioterapia . Em pacientes operados de tumores do trato gastrointestinal, em pós-operatório os abcessos subfrênicos, subhepáticos e intraperitoneais da etiologia anaeróbica desenvolvem-se. Os patógenos dominantes Bacteroides fragi- lis, Prevotella spp.. Fusobacterium spp., cocos gram positivos. Nos últimos anos, tem havido cada vez mais relatos sobre o importante papel dos anaeróbios não esporógenos no desenvolvimento de condições sépticas e no seu isolamento do sangue durante a bacteremia (3).

4. Diagnóstico laboratorial

4.1. Material em estudo

O diagnóstico laboratorial de infecção anaeróbica é uma tarefa bastante difícil. O tempo de estudo a partir do momento em que o material patológico é entregue da clínica para o laboratório microbiológico e até que uma resposta detalhada completa seja obtida é de 7 a 10 dias, o que não pode satisfazer os médicos. Muitas vezes, o resultado da análise bacteriológica se torna conhecido no momento em que o paciente recebe alta. Inicialmente, a pergunta deve ser respondida: os anaeróbios estão presentes no material. É importante lembrar que os anaeróbios são o principal componente da microflora local da pele e mucosas e, além disso, seu isolamento e identificação devem ser realizados em condições adequadas. O sucesso do início da pesquisa em microbiologia clínica da infecção anaeróbia depende da correta coleta de material clínico apropriado.

Na prática laboratorial normal, os seguintes materiais são mais frequentemente usados: 1) lesões infectadas de trato gastrointestinal ou trato genital feminino; 2) material da cavidade abdominal com peritonite e abscessos; 3) sangue de pacientes sépticos; 4) corrimento nas doenças inflamatórias crônicas do trato respiratório (sinusite, otite média, mastoidite); 5) material das partes inferiores do trato respiratório em caso de pneumonia aspirativa; 6) líquido cefalorraquidiano na meningite; 7) o conteúdo do abscesso cerebral; 8) material local para doenças dentárias; 9) conteúdos de abcessos superficiais: 10) conteúdos de feridas superficiais; 11) material de feridas infectadas (cirúrgicas e traumáticas); 12) biópsias (19, 21, 29, 31, 32, 36, 38).

4.2. Etapas da pesquisa de materiais no laboratório

O diagnóstico e o tratamento bem-sucedidos da infecção anaeróbica só são possíveis com a cooperação interessada de microbiologistas e clínicos do perfil apropriado. A obtenção de amostras adequadas para testes microbiológicos é fundamental. Os métodos de coleta de material dependem da localização e do tipo do processo patológico. A pesquisa laboratorial baseia-se na indicação e posterior identificação das espécies de microrganismos anaeróbios e aeróbios contidos no material de teste por métodos tradicionais e expressos, bem como na determinação da sensibilidade de microrganismos isolados a quimioterápicos antimicrobianos (2).

4.3. Exame direto do material

Existem muitos testes diretos rápidos que indicam fortemente a presença de anaeróbios em grande número no material de teste. Alguns deles são bastante simples e baratos e, portanto, têm vantagens sobre muitos testes laboratoriais caros.

1. 3 a p a x. Materiais fétidos sempre contêm anaeróbios, apenas alguns deles são inodoros.

2. Cromatografia gás-líquido (GLC). Refere-se ao número de métodos de diagnóstico expresso. GLC permite determinar no pus ácidos graxos de cadeia curta (acético, propiônico, isovalérico, isocapróico, capróico), que causam o cheiro. Com o auxílio do GLC, de acordo com o espectro de ácidos graxos voláteis, é possível realizar a identificação das espécies dos microrganismos presentes nele.

3. Fluorescência. O estudo de materiais (pus, tecidos) em luz ultravioleta no comprimento de onda de 365 nm revela uma intensa fluorescência vermelha, que é explicada pela presença de bactérias pigmentadas de preto pertencentes aos grupos Basteroides e Porphyromonas, e que indica a presença de anaeróbios.

4. Bacterioscopia. No estudo de muitas preparações coradas pelo método de Gram, o esfregaço revela a presença de células do foco inflamatório, microrganismos, principalmente bacilos gram-negativos polimórficos, pequenos cocos gram-positivos ou bacilos gram-positivos.

5. Imunofluorescência. A imunofluorescência direta e indireta são métodos expressos e possibilitam a detecção de microrganismos anaeróbios no material de teste.

6. Método ELISA. O ELISA permite determinar a presença de antígenos estruturais ou exotoxinas de microrganismos anaeróbios.

7. Métodos biológicos moleculares. A maior distribuição, sensibilidade e especificidade nos últimos anos tem sido demonstrada pela reação em cadeia da polimerase (RCP). Ele é usado tanto para detectar bactérias diretamente no material quanto para identificação.

4.4. Métodos e sistemas para criar condições anaeróbicas

O material retirado de fontes apropriadas e em recipientes ou meios de transporte adequados para este fim deve ser entregue imediatamente ao laboratório. No entanto, há evidências de que anaeróbios clinicamente significativos em grandes volumes de pus ou em um meio de transporte anaeróbio sobrevivem por 24 horas. É importante que o meio inoculado seja incubado em condições anaeróbicas ou colocado em um recipiente cheio de CO2 e armazenado até ser transferido para um sistema de incubação especial. Existem três tipos de sistemas anaeróbicos comumente usados ​​em laboratórios clínicos. Os sistemas mais utilizados são os microanaeróstatos do tipo (GasPark, BBL, Cockeysville), que são utilizados em laboratórios há muitos anos, principalmente em pequenos laboratórios, e apresentam resultados satisfatórios. Placas de Petri com inoculação de bactérias anaeróbicas são colocadas dentro do recipiente simultaneamente com uma bolsa geradora de gás especial e um indicador. A água é adicionada ao saco, o recipiente é hermeticamente fechado, CO2 e H2 são liberados do saco na presença de um catalisador (geralmente paládio). Na presença de um catalisador, H2 reage com O2 para formar água. O CO2 é essencial para o crescimento dos anaeróbios, pois são capnófilos. O azul de metileno é adicionado como um indicador de condições anaeróbicas. Se o sistema de geração de gás e o catalisador estiverem funcionando de forma eficaz, o indicador ficará descolorido. A maioria dos anaeróbios requer pelo menos 48 horas de cultura. Depois disso, a câmara é aberta e os copos são examinados pela primeira vez, o que não é muito conveniente, pois os anaeróbios são sensíveis ao oxigênio e perdem rapidamente sua viabilidade.

Recentemente, sistemas anaeróbicos mais simples entraram em prática - bolsas anaeróbicas. Um ou dois pratos semeados com um saco gerador de gás são colocados em um saco de polietileno transparente hermeticamente selado e incubados em condições termostáticas. A transparência dos sacos de polietileno facilita o monitoramento periódico do crescimento de microrganismos.

O terceiro sistema de cultivo de microrganismos anaeróbios é uma câmara selada automaticamente com parede frontal de vidro (estação anaeróbica) com luvas de borracha e fornecimento automático de uma mistura de gases isenta de oxigênio (N2, H2, CO2). Materiais, copos, tubos de ensaio, pastilhas para identificação bioquímica e suscetibilidade a antibióticos serão colocados neste gabinete através de uma escotilha especial. Todas as manipulações são realizadas por um bacteriologista em luvas de borracha. O material e os pratos neste sistema podem ser visualizados diariamente e as colheitas podem ser incubadas de 7 a 10 dias.

Esses três sistemas têm suas vantagens e desvantagens, mas são eficazes para isolar anaeróbios e devem estar em todos os laboratórios bacteriológicos. Muitas vezes eles são usados ​​​​simultaneamente, embora a maior confiabilidade pertença ao método de cultivo em uma estação anaeróbica.

4.5. Meios nutritivos e cultivo

O estudo de microrganismos anaeróbios é realizado em várias etapas. O esquema geral para o isolamento e identificação de anaeróbios é mostrado na Figura 1.

Um fator importante no desenvolvimento da bacteriologia anaeróbica é a disponibilidade de uma coleção de cepas bacterianas típicas, incluindo cepas de referência das coleções ATCC, CDC e VPI. Isso é especialmente importante para monitorar meios nutrientes, para a identificação bioquímica de culturas puras e para avaliar a atividade de drogas antibacterianas. Existe uma grande variedade de meios básicos que são usados ​​para preparar meios de cultura anaeróbicos especiais.

Os meios nutrientes para anaeróbios devem atender aos seguintes requisitos básicos: 1) atender às necessidades nutricionais; 2) fornecer crescimento rápido microrganismos; 3) ser adequadamente reduzido. A inoculação primária do material é realizada em placas de ágar sangue ou meios eletivos mostrados na Tabela 7.

Cada vez mais, o isolamento de anaeróbios obrigatórios do material clínico é realizado em meios que incluem agentes seletivos em determinada concentração, permitindo o isolamento de certos grupos de anaeróbios (20, 23) (Tabela 8).

A duração da incubação e a frequência do exame das placas inoculadas dependem do material de teste e da composição da microflora (tabela 9).

Material em estudo

feridas destacáveis,

conteúdo de abscesso,

Aspirado traqueobrônquico, etc.

Transporte para o laboratório: em cipreste, em meio de transporte especial (colocação imediata do material no meio)

Microscopia de material

coloração de Gram

Cultivo e isolamento

cultura pura

copos aeróbicos para

35±2°C em comparação com

18-28 horas anaeróbios

5-10% С0 2

  1. 1. ágar sangue microaerostato

Gaz-Pak

(H 2 + C0 2)

35±2°С

de 48 horas a 7 dias

2. Ágar sangue Schaedler

35±2°С

de 48 horas a 7 dias

  1. 3. Meio seletivo para identificação

anaeróbios

de 48 horas a 2 semanas

4. Meio líquido (tioglicol)

Identificação. Culturas puras de colônias isoladas

1. Coloração de Gram e Orzeszko para detectar esporos

2. Morfologia das colônias

3. Relação do tipo de colônia com oxigênio

4. Diferenciação preliminar por sensibilidade a drogas antimicrobianas

5. Testes bioquímicos

Determinação da sensibilidade a antibióticos

1. Método de diluição em ágar ou caldo

2. Método de disco de papel (difusão)

Arroz. 1. Isolamento e identificação de microrganismos anaeróbios

microorganismos anaeróbios

Quarta-feira

Propósito

Ágar sangue Brucella (ágar sangue anaeróbico CDC, ágar sangue Shadler) (ágar BRU)

Não seletivo, para isolar anaeróbios presentes no material

Bile Esculina Agar para Bacteróides(Ágar WWE)

Seletivo e diferencial; para o isolamento de bactérias do grupo Bacteroides fragilis

Ágar Sangue Kanamicina-Vancomicina(KVLB)

Seletivo para a maioria dos não formadores de esporos

Bactérias Gram-negativas

Agar Fenil Etil(ERVILHA)

Inibe o crescimento de Proteus e outras enterobactérias; estimula o crescimento de anaeróbios gram-positivos e gram-negativos

caldo de tioglicol(THIO)

Para situações especiais

Agar de gema(EYA)

Para isolar clostrídios

Ágar cicloserina-cefoxitina-frutose(CCFA) ou ágar de manito de cicloserina (CMA) ou ágar de sangue de manito de cicloserina (CMBA)

Seletivo para C. difficile

Agar cristal-violeta-eritromicina-novo(CVEB)

Para isolamento de Fusobacterium nucleatum e Leptotrichia buccalis

Ágar Bacteróide Gengival(BGA)

Para isolamento de Porphyromonas gingivalis

Tabela 8. Agentes seletivos para anaeróbios obrigatórios

organismos

Agentes seletivos

Obrigar anaeróbios do material clínico

neomicina (70mg/l)

ácido nalidíxico (10 mg/l)

Actinomyces spp.

metronidazol (5 mg/l)

Bacteroides spp. Fusobacterium spp.

ácido nalidíxico (10 mg/l) + vancomicina (2,5 mg/l)

Bacteroides urealytica

ácido nalidíxico (10 mg/l) teicoplanina (20 mg/l)

Clostridium difficile

cicloserina (250 mg/l) cefoxitina (8 mg/l)

Fusobacterium

rifampicina (50 mg/l)

neomicina (100 mg/l)

vancomicina (5 mg/l)

A contabilização dos resultados é realizada descrevendo as propriedades culturais de microrganismos cultivados, pigmentação de colônias, fluorescência, hemólise. Em seguida, um esfregaço é preparado a partir das colônias, corado com Gram, e assim as bactérias Gram-negativas e Gram-positivas são detectadas, microscopicamente e as propriedades morfológicas são descritas. Posteriormente, os microrganismos de cada tipo de colônia são subcultivados e cultivados em caldo de tioglicol com adição de hemina e vitamina K. A morfologia das colônias, a presença de pigmento, propriedades hemolíticas e as características das bactérias na coloração de Gram permitem identificar e diferenciar preliminarmente os anaeróbios. Como resultado, todos os microrganismos anaeróbios podem ser divididos em 4 grupos: 1) Gr + cocos; 2) bacilos Gr+ ou cocobacilos: 3) Gr-cocos; 4) Gr-bacilos ou cocobacilos (20, 22, 32).

Tabela 9. Duração da incubação e frequência do estudo

culturas de bactérias anaeróbicas

Tipo de culturas

Tempo de incubação*

Frequência do estudo

Sangue

Diariamente até o dia 7 e após o dia 14

Líquidos

Diário

Abscessos, feridas

Diário

Vias aéreas

Escarro Aspirado transtraqueal Descarga brônquica

Diário

uma vez

Diário

Diário

Trato urogenital

Vagina, útero Próstata

Diário

Diário

Diário

uma vez

Fezes

Diário

Anaeróbios

Brucela

actinomicetos

Diário

3 vezes por semana

1 vez por semana

*até obter um resultado negativo

Na terceira etapa da pesquisa, é realizada uma identificação mais longa. A identificação final é baseada na determinação de propriedades bioquímicas, características fisiológicas e genéticas, fatores de patogenicidade no teste de neutralização de toxinas. Embora a completude de identificação de anaeróbios possa variar muito, alguns testes simples e com alta probabilidade permitem a identificação de culturas puras de bactérias anaeróbias - coloração de Gram, motilidade, sensibilidade a certos antibióticos usando discos de papel e propriedades bioquímicas.

5. Terapia antibacteriana para infecção anaeróbica

As cepas de microrganismos resistentes aos antibióticos surgiram e começaram a se espalhar imediatamente após a introdução generalizada de antibióticos na prática clínica. Os mecanismos de formação de resistência de microrganismos a antibióticos são complexos e diversos. Eles são classificados em primários e adquiridos. A resistência adquirida é formada sob a influência de drogas. As principais formas de sua formação são as seguintes: a) inativação e modificação do fármaco por sistemas enzimáticos de bactérias e sua transferência para uma forma inativa; b) diminuição da permeabilidade das estruturas superficiais da célula bacteriana; c) violação dos mecanismos de transporte para dentro da célula; d) alteração na significância funcional do alvo para o fármaco. Os mecanismos de resistência adquirida dos microrganismos estão associados a alterações ao nível genético: 1) mutações; 2) recombinações genéticas. Extremamente importância desempenham mecanismos dentro e interespécies de transmissão de fatores extracromossômicos de hereditariedade - plasmídeos e transposons que controlam a resistência de microrganismos a antibióticos e outros quimioterápicos (13, 20, 23, 33, 39). Informações sobre resistência a antibióticos em microrganismos anaeróbios foram obtidas de estudos epidemiológicos e genéticos/moleculares. Dados epidemiológicos indicam que desde cerca de 1977 houve um aumento na resistência de bactérias anaeróbias a vários antibióticos: tetraciclina, eritromicina, penicilina, ampicilina, amoxicilina, ticarcilina, imipenem, metronidazol, cloranfenicol, etc. Aproximadamente 50% dos bacteróides são resistentes a penicilina G e tetraciclina.

Ao prescrever antibioticoterapia para infecção mista aeróbia-anaeróbia, é necessário responder a uma série de perguntas: a) onde está localizada a infecção?; b) quais os microrganismos que mais frequentemente causam infecções nesta área?; c) qual a gravidade da doença?; d) quais as indicações clínicas para o uso de antibióticos?; e) qual a segurança do uso desse antibiótico?; e) qual o seu custo?; g) qual sua característica antibacteriana?; h) qual o tempo médio de uso do medicamento para a cura?; i) atravessa a barreira hematoencefálica?; j) como afeta a microflora normal?; k) São necessários antimicrobianos adicionais para tratar este processo?

5.1. Características dos principais antimicrobianos utilizados no tratamento da infecção anaeróbia

P e n i c i l n s. Historicamente, a penicilina G tem sido amplamente utilizada para tratar infecções mistas. No entanto, os anaeróbios, principalmente as bactérias do grupo Bacteroides fragilis, possuem a capacidade de produzir beta-lactamase e destruir a penicilina, o que reduz sua eficácia terapêutica. Tem toxicidade baixa a moderada, pouco efeito sobre a microflora normal, mas tem pouca atividade contra anaeróbios produtores de beta-lactamase e é limitada contra microrganismos aeróbicos. As penicilinas semi-sintéticas (naflacina, oxacilina, cloxacilina e dicloxacilina) são menos ativas e inadequadas para o tratamento de infecções anaeróbicas. Um estudo randomizado comparativo da eficácia clínica da penicilina e da clindamicina para o tratamento de abscessos pulmonares mostrou que o uso de clindamicina em pacientes reduziu o período de febre e produção de escarro para 4,4 versus 7,6 dias e para 4,2 versus 8 dias, respectivamente. Em média, 8 (53%) dos 15 pacientes tratados com penicilina foram curados, enquanto todos os 13 pacientes (100%) tratados com clindamicina foram curados. A clindamicina é mais eficaz que a penicilina no tratamento de pacientes com abscesso pulmonar anaeróbio. Em média, a eficácia da penicilina foi de cerca de 50-55% e da clindamicina - 94-95%. Ao mesmo tempo, notou-se no material a presença de microrganismos resistentes à penicilina, o que causou uma razão frequente para a ineficácia da penicilina e ao mesmo tempo mostrou que a clindamicina é a droga de escolha para terapia no início do tratamento.

T e tra c e c lin y. As tetraciclinas também são caracterizadas por

cuja toxicidade e efeito mínimo sobre a microflora normal. As tetraciclinas também eram anteriormente as drogas de escolha, já que quase todos os anaeróbios eram sensíveis a elas, mas desde 1955 houve um aumento na resistência a elas. A doxiciclina e a monociclina são as mais ativas, mas um número significativo de anaeróbios também é resistente a elas.

C l o r a m f e nico l. O cloranfenicol tem um efeito significativo na microflora normal. Esta droga é extremamente eficaz contra bactérias do grupo B. fragilis, penetra bem em fluidos e tecidos corporais e tem atividade média contra outros anaeróbios. Nesse sentido, tem sido utilizado como fármaco de escolha para o tratamento de doenças potencialmente fatais, principalmente as que envolvem o sistema nervoso central, pois penetra facilmente na barreira hematoencefálica. Infelizmente, o cloranfenicol tem várias desvantagens (inibição da hematopoiese dependente da dose). Além disso, pode causar anemia aplástica idiossencrática independente da dose. Algumas cepas de C. perfringens e B. fragilis são capazes de reduzir o grupo p-nitro do cloranfenicol e inativa-lo seletivamente. Algumas cepas de B. fragilis são altamente resistentes ao cloranfenicol porque produzem acetiltransferase. Atualmente, o uso de cloranfenicol para o tratamento de infecções anaeróbicas diminuiu significativamente devido ao medo de desenvolver efeitos hematológicos colaterais e ao surgimento de muitos medicamentos novos e eficazes.

K l in d a m i c i n. A clindamicina é um derivado 7(S)-cloro-7-desoxi da lincomicina. A modificação química da molécula de lincomicina resultou em várias vantagens: melhor absorção pelo trato gastrointestinal, aumento de oito vezes na atividade contra cocos gram-positivos aeróbicos, expansão do espectro de atividade contra muitas bactérias anaeróbicas gram-positivas e gram-negativas, como bem como protozoários (Toxoplasma e Plasmodium). As indicações terapêuticas para o uso da clindamicina são bastante amplas (Tabela 10).

Bactérias Gram-positivas. O crescimento de mais de 90% de cepas de S. aureus é inibido na presença de clindamicina na concentração de 0,1 µg/ml. Em concentrações que podem ser facilmente alcançadas no soro, a clindamicina é ativa contra Str. pyogenes, St. pneumonia, Av. viridans. A maioria das cepas do bacilo da difteria também é sensível à clindamicina. No que diz respeito às bactérias aeróbicas gram-negativas Klebsiella, Escherichia coli, Proteus, Enterobacter, Shigella, Serratia, Pseudomonas, este antibiótico é inativo. Cocos anaeróbios Gram-positivos, incluindo todos os tipos de peptococos, peptoestreptococos, bem como propionobactérias, bifidumbactérias e lactobacilos, são geralmente altamente sensíveis à clindamicina. Clostrídios clinicamente significativos também são sensíveis a ele - C. perfringens, C. tetani, bem como outros clostrídios, frequentemente encontrados em infecções intraperitoneais e pélvicas.

Tabela 10. Indicações para uso de clindamicina

Biótopo

Doença

vias respiratórias superiores

Amigdalite, faringite, sinusite, otite média, escarlatina

trato respiratório inferior

Bronquite, pneumonia, empiema, abscesso pulmonar

Pele e tecidos moles

Piodermia, furúnculos, celulite, impetigo, abscessos, feridas

Ossos e articulações

Osteomielite, artrite séptica

Órgãos pélvicos

Endometrite, celulite, infecções do manguito vaginal, abscessos tubo-ovarianos

Cavidade oral

abscesso periodontal, periodontite

Septicemia, endocardite

Os anaeróbios Gram-negativos - bacteróides, fusobactérias e veillonella - são altamente sensíveis à clindamicina. Está bem distribuído em muitos tecidos e fluidos biológicos, de modo que na maioria deles são alcançadas concentrações terapêuticas significativas, mas não penetra na barreira hematoencefálica. De particular interesse são as concentrações da droga nas amígdalas, tecido pulmonar, apêndice, trompas de Falópio, músculos, pele, ossos, líquido sinovial. A clindamicina está concentrada em neutrófilos e macrófagos. Os macrófagos alveolares concentram a clindamicina intracelularmente (30 minutos após a administração, a concentração excede a concentração extracelular em 50 vezes). Aumenta a atividade fagocitária de neutrófilos e macrófagos, estimula a quimiotaxia, inibe a produção de certas toxinas bacterianas.

M e t r o n i d a z o l. Este quimioterápico é caracterizado por baixíssima toxicidade, é bactericida contra anaeróbios e não é inativado por beta-lactamases bacteróides. Bacteroides são altamente sensíveis a ela, mas certos cocos anaeróbios e bacilos Gram-positivos anaeróbios podem ser resistentes. O metronidazol é inativo contra a microflora aeróbica e no tratamento da sepse intra-abdominal deve ser combinado com gentamicina ou alguns aminoglicosídeos. Pode causar neutropenia transitória. As combinações de metronidazol-gentamicina e clindamicina-gentamicina não diferem em eficácia no tratamento de infecções intra-abdominais graves.

C e f o k s it e n. Este antibiótico pertence às cefalosporinas, tem toxicidade baixa e moderada e, via de regra, não é inativado pela beta-lactamase bacteróide. Embora existam relatos de casos de isolamento de cepas resistentes de bactérias anaeróbias devido à presença de proteínas ligantes de antibióticos que reduzem o transporte do fármaco para dentro da célula bacteriana. A resistência da bactéria B. fragilis à cefoxitina varia de 2 a 13%. É recomendado para o tratamento de infecções abdominais moderadas.

C e f o t e t a n. Esta droga é mais ativa contra microrganismos anaeróbios gram-negativos em comparação com a cefoxitina. No entanto, aproximadamente 8% a 25% das cepas de B. fragilis mostraram-se resistentes a ela. É eficaz no tratamento de infecções ginecológicas e abdominais (abscessos, apendicite).

C e f conheceu a z o l. É semelhante em espectro à cefoxitina e cefotetan (mais ativo que a cefoxitina, mas menos ativo que o cefotetan). Pode ser usado para tratar infecções leves a moderadas.

C e f a pera z o n. Caracteriza-se por baixa toxicidade, maior atividade em comparação com as três drogas acima, mas de 15 a 28% de cepas resistentes de bactérias anaeróbicas foram identificadas a ela. É claro que não é a droga de escolha para o tratamento da infecção anaeróbia.

C e f t i z o k c i m. É um medicamento seguro e eficaz no tratamento de infecções nas pernas em pacientes com diabetes, peritonite traumática, apendicite.

M e r o p e n e m. O meropenem, um novo carbapenem metilado na posição 1, é resistente à ação da desidrogenase 1 renal, que o degrada. É cerca de 2-4 vezes mais ativo que o imipenem contra organismos gram-negativos aeróbicos, incluindo representantes de enterobactérias, hemophilus, pseudomonas, neisseria, mas tem atividade ligeiramente menor contra estafilococos, alguns estreptococos e enterococos. Sua atividade contra bactérias anaeróbicas gram-positivas é semelhante à do imipenem.

5.2. Combinações de medicamentos beta-lactâmicos e inibidores de beta-lactamase

O desenvolvimento de inibidores da beta-lactamase (clavulanato, sulbactam, tazobactam) é uma direção promissora e permite o uso de novos beta-lactâmicos protegidos da hidrólise com sua administração simultânea: a) amoxicilina - ácido clavulânico - possui maior espectro de atividade antimicrobiana do que a amoxicilina sozinha e tem eficácia próxima a uma combinação de antibióticos - penicilina-cloxacilina; b) ácido ticarcilina-clavulânico - amplia o espectro de atividade antimicrobiana do antibiótico contra bactérias produtoras de beta-lacgamase, como estafilococos, hemophilus, Klebsiella e anaeróbios, incluindo bacteróides. A concentração inibitória mínima dessa mistura foi 16 vezes menor que a da ticarcilina; c) ampicilina-sulbactam - quando combinados na proporção de 1: 2, seu espectro se expande significativamente e inclui estafilococos, hemophilus, Klebsiella e a maioria das bactérias anaeróbicas. Apenas 1% dos bacteróides são resistentes a esta combinação; d) cefaperazona-sulbactam - na proporção de 1:2 também expande significativamente o espectro de atividade antibacteriana; e) piperacilina-tazobactam. Tazobactam é um novo inibidor beta-lactâmico que atua em muitas beta-lactamases. É mais estável que o ácido clavulânico. Essa combinação pode ser considerada como um medicamento para monoterapia empírica de infecções polimicrobianas graves, como pneumonia, sepse intra-abdominal, infecção necrosante de tecidos moles, infecções ginecológicas; f) imipenem-cilastatina - o imipenem é um membro de uma nova classe de antibióticos conhecidos como carbapenêmicos. É usado em combinação com cilastatina na proporção de 1:1. Sua eficácia é semelhante à clindamicina-aminoglicosídeos no tratamento de infecções cirúrgicas anaeróbicas mistas.

5.3. Significado clínico da determinação da sensibilidade de microrganismos anaeróbios a drogas antimicrobianas

A crescente resistência de muitas bactérias anaeróbias aos agentes antimicrobianos levanta a questão de como e quando a determinação da sensibilidade aos antibióticos é justificada. O custo desse teste e o tempo que leva para obter um resultado final aumentam ainda mais a importância dessa questão. É claro que a terapia inicial para infecções anaeróbicas e mistas deve ser empírica. Baseia-se na natureza específica das infecções e um certo espectro de microflora bacteriana em uma determinada infecção. Deve-se levar em consideração o estado fisiopatológico e o uso prévio de antimicrobianos que possam ter modificado a microbiota normal e da lesão, bem como os resultados da coloração de Gram. O próximo passo deve ser a identificação precoce da microflora dominante. Informações sobre o espectro de sensibilidade antibacteriana específica da microflora dominante. A informação sobre o espectro de sensibilidade antibacteriana das espécies da microflora dominante permitirá avaliar a adequação do regime de tratamento inicialmente escolhido. No tratamento, se o curso da infecção for desfavorável, é necessário usar a determinação da sensibilidade de uma cultura pura aos antibióticos. Em 1988, um grupo de trabalho ad hoc sobre anaeróbios revisou recomendações e indicações para testes de sensibilidade antimicrobiana em anaeróbios.

A determinação da sensibilidade dos anaeróbios é recomendada nos seguintes casos: a) é necessário estabelecer alterações na sensibilidade dos anaeróbios a determinadas drogas; b) a necessidade de determinar o espectro de atividade de novos medicamentos; c) nos casos de garantia de monitorização bacteriológica de um paciente individual. Além disso, algumas situações clínicas também podem ditar a necessidade de sua implementação: 1) em caso de esquema antimicrobiano inicial escolhido sem sucesso e persistência da infecção; 2) quando a escolha de um antimicrobiano eficaz desempenha um papel fundamental na evolução da doença; .3) quando a escolha do medicamento neste caso específico é difícil.

Deve-se ter em mente que, do ponto de vista clínico, existem outros pontos: a) o aumento da resistência de bactérias anaeróbias aos antimicrobianos é um grande problema clínico; b) há divergência entre os clínicos sobre a eficácia clínica de certos medicamentos contra infecções anaeróbicas; c) há discrepâncias nos resultados da sensibilidade dos microrganismos aos fármacos in vitro e sua eficácia in vivo; r) A interpretação de resultados que é aceitável para aeróbios nem sempre se aplica a anaeróbios. A observação da sensibilidade/resistência de 1200 cepas bacterianas isoladas de diferentes biótopos mostrou que uma parte significativa delas é altamente resistente às drogas mais utilizadas (Tabela 11).

Tabela 11. Resistência de bactérias anaeróbicas a

antibióticos comumente usados

bactérias

Antibióticos

Porcentagem de formas resistentes

Peptoestreptococo

Penicilina Eritromicina Clindamicina

Clostridium perfringens

Penicilina Cefoxitina Metronidazol Eritromicina Clindamicina

Bacteroides fragilis

Cefoxitina Metronidazol Eritromicina Clindamicina

Veilonella

Penicilina Metronidazol Eritromicina

Ao mesmo tempo, numerosos estudos estabeleceram as concentrações inibitórias mínimas das drogas mais comuns que são adequadas para o tratamento de infecções anaeróbicas (Tabela 12).

Tabela 12 Concentrações Inibitórias Mínimas

antibióticos para microrganismos anaeróbios

A concentração inibitória mínima (CIM) é a concentração mais baixa de um antibiótico que inibe completamente o crescimento de microrganismos. Um problema muito importante é a padronização e controle de qualidade da determinação da sensibilidade dos microrganismos aos antibióticos (testes utilizados, sua padronização, preparação dos meios, reagentes, treinamento do pessoal que realiza este teste, uso de culturas de referência: B. fragilis-ATCC 25285; B. thetaiotaomicron - ATCC 29741; C. perfringens-ATCC 13124; E. lentum-ATCC 43055).

Em obstetrícia e ginecologia, penicilina, algumas cefalosporinas de 3-4 gerações, lincomicina, cloranfenicol são usados ​​para tratar infecções anaeróbicas. No entanto, os medicamentos antianaeróbicos mais eficazes são representantes do grupo 5-nitroimidazol - metronidazol, tinidazol, ornidazol e clindamicina. A eficácia do tratamento com metronidazol isolado é de 76-87%, dependendo da doença, e de 78-91% com tinidazol. A combinação de imidazóis com aminoglicosídeos, cefalosporinas de 1ª-2ª geração aumenta a taxa de sucesso do tratamento em até 90-95%. Um papel significativo no tratamento de infecções anaeróbicas pertence à clindamicina. A associação de clindamicina com gentamicina é um método de referência para o tratamento de doenças inflamatórias purulentas dos órgãos genitais femininos, principalmente nos casos de infecções mistas.

6. Correção da microflora intestinal

Durante o século passado, a microflora intestinal humana normal tem sido objeto de pesquisa ativa. Numerosos estudos estabeleceram que a microflora nativa do trato gastrointestinal desempenha um papel significativo na garantia da saúde do organismo hospedeiro, desempenhando um papel importante na maturação e manutenção da função do sistema imunológico, bem como na garantia de uma série de processos metabólicos. O ponto de partida para o desenvolvimento de manifestações disbióticas no intestino é a supressão da microflora anaeróbica indígena - bifidobactérias e lactobacilos, bem como a estimulação da reprodução da microflora oportunista - enterobactérias, estafilococos, estreptococos, clostrídios, candida. I. I. Mechnikov formulou as principais disposições científicas sobre o papel da microflora indígena do intestino, sua ecologia e apresentou a ideia de substituir a microflora prejudicial por uma benéfica para reduzir a intoxicação do corpo e prolongar a vida humana. A ideia de I. I. Mechnikov foi desenvolvida no desenvolvimento de várias preparações bacterianas usadas para corrigir ou “normalizar” a microflora humana. Eles são chamados de "eubióticos", ou "probióticos", e contêm substâncias vivas ou

bactérias secas dos gêneros Bifidobacterium e Lactobacillus. A atividade imunomoduladora de vários eubióticos foi demonstrada (estimulação da produção de anticorpos, atividade de macrófagos peritoneais é observada). Também é importante que cepas de bactérias eubióticas tenham resistência cromossômica aos antibióticos, e sua administração combinada aumenta a taxa de sobrevivência dos animais. As formas de leite fermentado mais difundidas de lactobacterina e bifidumbacterina (4).

7. Conclusão

A infecção anaeróbica é um dos problemas não resolvidos da medicina moderna (especialmente cirurgia, ginecologia, terapia, odontologia). Dificuldades diagnósticas, avaliação incorreta de dados clínicos, erros no tratamento, antibioticoterapia, etc. levam a alta mortalidade em pacientes com infecções anaeróbicas e mistas. Tudo isso aponta para a necessidade de eliminar rapidamente tanto a falta de conhecimento existente nesta área da bacteriologia, quanto deficiências significativas no diagnóstico e na terapia.

Bactérias aeróbicas são microorganismos que precisam de oxigênio livre para a vida normal. Ao contrário de todos os anaeróbios, eles também participam do processo de geração da energia necessária para a reprodução. Estas bactérias não têm um núcleo pronunciado. Eles se reproduzem por brotamento ou fissão e, quando oxidados, formam vários produtos tóxicos de redução incompleta.

Características dos aeróbios

Poucas pessoas sabem que as bactérias aeróbicas (em termos simples, aeróbios) são organismos que podem viver no solo, no ar e na água. Eles estão ativamente envolvidos na circulação de substâncias e possuem várias enzimas especiais que garantem sua decomposição (por exemplo, catalase, superóxido dismutase e outras). A respiração dessas bactérias é realizada pela oxidação direta de metano, hidrogênio, nitrogênio, sulfeto de hidrogênio e ferro. Eles são capazes de existir em uma ampla faixa a uma pressão parcial de 0,1-20 atm.

O cultivo de bactérias aeróbicas gram-negativas e gram-positivas implica não apenas no uso de um meio nutriente adequado para elas, mas também no controle quantitativo da atmosfera de oxigênio e na manutenção de temperaturas ótimas. Para cada microrganismo deste grupo, existe uma concentração mínima e máxima de oxigênio no ambiente que o cerca, necessária para sua reprodução e desenvolvimento normais. Portanto, tanto uma diminuição quanto um aumento no teor de oxigênio além do limite “máximo” levam ao término da atividade vital desses micróbios. Todas as bactérias aeróbicas morrem em uma concentração de oxigênio de 40 a 50%.

Tipos de bactérias aeróbicas

De acordo com o grau de dependência do oxigênio livre, todas as bactérias aeróbicas são divididas nos seguintes tipos:

1. aeróbios obrigatórios- estes são aeróbios "incondicionais" ou "estritos" que são capazes de se desenvolver apenas quando há uma alta concentração de oxigênio no ar, pois recebem energia de reações oxidativas com sua participação. Esses incluem:

2. Aeróbios facultativos- microorganismos que se desenvolvem mesmo com uma quantidade muito baixa de oxigênio. pertence a este grupo.