Le biocenosi microbiche presenti nel corpo di esseri umani e animali si sono formate nel processo di evoluzione e svolgono un ruolo importante nell'attività funzionale di vari organi umani o animali.
La formazione della composizione quantitativa e qualitativa della microflora nel macroorganismo è regolata da complesse relazioni antagonistiche e sinergiche tra i suoi singoli rappresentanti nella composizione delle bioceosi ed è anche controllata dai fattori fisiologici del macroorganismo nella dinamica del suo sviluppo.
La microflora del corpo umano e animale può essere suddivisa in due gruppi: costante normale (obbligato) e casuale (opzionale).
Il gruppo normale e normale comprende microrganismi che si adattano al massimo all'esistenza nel corpo dell'ospite e si trovano naturalmente nelle sue cavità e organi. Questi microrganismi sono rappresentati da specie saprofiti (non patogeni) e condizionatamente patogene.
La microflora facoltativa (transitoria) è temporanea e facoltativa. La sua presenza è determinata dall'ingresso di microbi da ambiente e lo stato del sistema immunitario dell'ospite. La composizione delle specie della normale microflora dell'uomo e degli animali (biocenosi) si è formata come risultato dell'interazione di microrganismi e macroorganismi nel processo di evoluzione. Una logica conseguenza di questo processo è stata che la totalità delle specie microbiche caratteristiche dei singoli organi e cavità del corpo è diventata una condizione necessaria per il normale funzionamento del corpo. La violazione della biocenosi, la comparsa di microrganismi insoliti, provoca lo sviluppo della malattia.
Il feto di una persona o di un animale durante lo sviluppo fetale è sterile.
L'organismo umano e animale, a partire dai primi minuti di vita terrena, entra costantemente in contatto con l'ambiente ed è popolato da microrganismi che vivono in questo ambiente.
Subito dopo la nascita, sulla pelle e sulle mucose del neonato, nonché nelle cavità a contatto con ambiente esterno un'ampia varietà di microrganismi. Prima di tutto, cadono dalle mani del personale medico e dall'aria. Alcuni di loro muoiono rapidamente o vengono rimossi dal corpo, altri mettono radici in determinati organi o parti del corpo e inizia la formazione della normale microflora del corpo.
Durante la vita di una persona o di un animale, la natura di questa microflora cambia, ma in generale è costante e caratteristica dei singoli organi.
I tessuti interni e gli organi dell'uomo e degli animali (sangue, cervello, liquido cerebrospinale, fegato, utero, cavità vescicale) sono generalmente sterili. Gli stessi organi e tessuti che comunicano con l'ambiente contengono microrganismi.
Molti microbi vivono sulla pelle e sull'attaccatura dei capelli: qui puoi trovare quasi tutti i rappresentanti della microflora dell'ambiente. Tra questi, cocchi, Escherichia, difteroidi, bacilli sporigeni, vari batteri opportunisti e persino patogeni, funghi lieviti e radiosi, ecc.
Il numero totale di microbi sulla superficie della pelle raggiunge il numero 1010 gradi.
I microrganismi caduti su una pelle sana e pulita di solito muoiono per l'azione di sostanze battericide secrete dalla pelle, così come per i batteri antagonisti che vivono costantemente sulla pelle. L'inquinamento della pelle contribuisce all'accumulo di microrganismi patogeni su di essa. Il loro substrato nutritivo sono le secrezioni delle ghiandole sebacee e sudoripare, cellule morte, prodotti di decomposizione.
È molto importante mantenere costantemente pulita la pelle, perché la pelle pulita e intatta, da un lato, impedisce meccanicamente la penetrazione di microrganismi nel corpo del macroorganismo. D'altra parte, contribuisce alla morte delle cellule microbiche a seguito del rilascio di sostanze battericide da parte della pelle. Quando la pelle è contaminata, il rilascio di sostanze battericide diminuisce o si interrompe del tutto.
Con il primo respiro di un neonato, i microbi vengono introdotti nel tratto respiratorio e lì si radicano. La maggior parte di loro si trova nella cavità nasale, molto meno nella laringe, ancor meno nella trachea e nei grossi bronchi. I piccoli bronchi sono privi di microrganismi, ma se singole cellule microbiche arrivano lì, muoiono rapidamente.
Gli abitanti permanenti delle prime vie respiratorie (cavità nasale, laringe e bronchi) sono principalmente cocchi (stafilococchi, streptococchi, pneumococchi). Esistono difteroidi e altri microrganismi, il più delle volte commensali innocui (conviventi).
I microrganismi obbligati delle vie respiratorie mucose negli animali sono stafilococchi e streptococchi, sarcine, pneumococchi, pasteurella, micoplasmi.
L'epitelio ciliato della membrana mucosa del tratto respiratorio superiore svolge un ruolo importante nella protezione degli organi respiratori dai microrganismi.
La microflora della mucosa dell'occhio è molto scarsa, a causa dell'azione del lisozima contenuto nelle lacrime. Sulla membrana mucosa dell'occhio si trovano molto spesso cocchi non patogeni, meno spesso spore di funghi simili a lieviti e muffe, nonché B. xerosi, morfologicamente molto simile ai veri batteri della difterite.
La microflora del tubo digerente di esseri umani e animali è estremamente abbondante e diversificata.
Già con le prime porzioni di latte materno, i microbi entrano nella cavità orale e quindi penetrano nello stomaco e nell'intestino.
La cavità orale è un ottimo serbatoio per lo sviluppo di microrganismi. C'è tutto il necessario per il loro sviluppo: una temperatura misurata, la presenza di umidità, un'abbondanza nutrienti, pH alcalino della saliva.
Nei luoghi in cui si accumulano detriti alimentari - tra i denti, sulle gengive, ci sono molti microbi. Nella cavità orale umana vive un'ampia varietà di microrganismi: cocchi, batteri lattici, difteroidi, anaerobi, attinomiceti, funghi simili a lieviti, spirochete e protozoi non patogeni, ecc. 1 ml di saliva contiene milioni di cellule microbiche. E sebbene la saliva contenga la sostanza battericida lisozima, che ha un effetto dannoso sui microrganismi, molti tipi di batteri si sono radicati nella cavità orale, hanno acquisito resistenza al lisozima e si moltiplicano bene in sua presenza.
La placca mucosa di colore bianco, giallo, rosso o marrone, che compare spesso sulla superficie dei denti, è costituita interamente da microbi, che sono i principali responsabili della carie.
Tra gli abitanti della cavità orale degli animali ci sono micrococchi, spirochete, micoplasmi, batteri dell'acido lattico.
La microflora del tratto gastrointestinale è diversa nei diversi dipartimenti. I succhi delle ghiandole digestive entrano in diverse sezioni del tratto gastrointestinale e il cibo entra in diverse fasi della digestione, il che provoca la creazione di un proprio ambiente specifico in ciascuna sezione. Ogni sezione del canale digerente ha i suoi microbi, abituati a esistere in queste condizioni.
Nello stomaco di esseri umani e animali sopravvivono solo i microrganismi resistenti agli acidi, compresi i microrganismi dell'acido lattico, nonché le spore di batteri, funghi e actinomiceti. Solo con una diminuzione dell'acidità del succo gastrico nello stomaco iniziano a moltiplicarsi lieviti, sarcine, bacilli sporigeni Bac.subtilis, Bac.mesentericus, putrefattivi e altri batteri.
Nel proventricolo dei ruminanti si trovano ciliati, cocchi, batteri che scompongono fibre e carboidrati, sintetizzano vitamine e proteine.
Nell'intestino tenue, nonostante il pH alcalino dell'ambiente, sono presenti pochi microrganismi, proprio come nello stomaco. Ciò è dovuto all'azione sfavorevole degli enzimi per i microrganismi. Qui solo coloro che sono resistenti all'azione della bile possono manifestare la loro attività vitale. Questi includono alcuni tipi di acido lattico e batteri spore, lieviti e funghi radianti.
Nell'intestino crasso, i residui di cibo semidigerito permangono più a lungo che nell'intestino tenue. L'azione battericida dei succhi digestivi non è influenzata qui e i microbi si moltiplicano liberamente e in abbondanza. Nell'intestino crasso sono state trovate fino a 260 specie di microrganismi.
Tutti i microrganismi che si trovano nell'intestino crasso possono essere suddivisi in abitanti casuali e permanenti.
Gli abitanti permanenti dell'intestino crasso includono microbi che scompongono la cellulosa e idrolizzano l'amido, i batteri dell'acido lattico. In questa sezione dell'intestino sono ampiamente rappresentate varietà di Escherichia coli (E.coli), clostridi (Cl.perfringens, Cl.sporogenes), enterococchi, streptococchi e stafilococchi, batteri del genere Citrobacter. Si trovano batteri putrefattivi (Proteus vulgaris), lieviti, protozoi, campylobacter, spore di bacilli, atinomiceti e funghi imperfetti, virus e altri microrganismi.
La microflora dell'intestino crasso sia dell'uomo che degli animali sta cambiando.
Quindi, i batteri dell'acido lattico predominano nei bambini, negli adulti nella maggior parte dei casi si trovano batteriidi, bifidobatteri, Escherichia coli, streptococchi, ecc.
Nell'area degli organi genito-urinari, la microflora si trova solo nelle loro parti esterne. Tra i microbi comuni delle parti esterne degli organi genito-urinari si trovano cocchi, batteri resistenti agli acidi, difteroidi, sarcine, micoplasmi, batteri fusimorfi, listeria, spirochete non patogeni, Escherichia, Klebsiella, Proteus, andidi, campylobacter, micobatteri.
La cavità della vescica e dell'utero, sia nell'uomo che negli animali, nel loro stato normale, sono sterili.
La microflora della vagina cambia nel corso della vita. Nelle ragazze predomina la flora coccale. Nelle donne adulte - bacillo vaginale gram-positivo acidofilo - Bact.doderleini.
La normale microflora del corpo umano e animale è stata ed è oggetto di studio da parte di molti scienziati, ma finora il suo significato per il macroorganismo non è stato completamente rivelato.
Microflora normale dell'uomo e degli animali condizione necessaria mantenimento della salute del macroorganismo. La violazione delle biocenosi microbiche in diversi organi e sistemi del corpo porta allo sviluppo di processi patologici, a una diminuzione dell'attività delle difese del corpo e allo sviluppo della disbatteriosi. Se un neonato viene allevato in condizioni sterili, alimentato con cibo sterile, ad es. privandolo della normale microflora, si svilupperà male, ritarderà nella crescita e potrebbe morire.
Molti dei microrganismi che vivono nel corpo umano o animale rappresentano la normale microflora e sono non patogeni o condizionatamente patogeni in termini di patogenicità. I rappresentanti della microflora saprofita e condizionatamente patogena che abitano il corpo di una persona o di un animale sono stati studiati meno in passato, poiché questa microflora era considerata innocua per il macroorganismo e l'attenzione principale era rivolta ai rappresentanti della microflora patogena.
Attualmente, l'importanza dei microbi non patogeni nell'insorgenza e nello sviluppo di malattie nell'uomo è aumentata fino a diventare un problema che difficilmente può essere sopravvalutato.
Microbi saprofiti e condizionatamente patogeni che si trovano nel corpo o penetrati dall'ambiente, in determinate condizioni sullo sfondo di infezione, beriberi, costante superlavoro fisico e mentale, ipotermia, situazioni stressanti, l'esposizione alle radiazioni, l'esaurimento delle proteine e altri fattori possono causare sia negli esseri umani che negli animali possono causare malattie infettive, che spesso finiscono con la morte. La microflora residente del cavo orale può svolgere un ruolo significativo nelle malattie di origine infettiva (ad esempio con agranulocitosi), mentre si trovano batteriidi, batteri fusiformi, streptococchi, Ps.aeruginosa, C.albicans, St.aueus, E.cjli .
Microrganismi come E.coli, Kl.pneumoniae, Pr.vulgaris, Cl.perfringens, St.aureus, che fanno parte della normale microflora intestinale, possono causare lo sviluppo di processi infiammatori e spesso ascessi. I rappresentanti della microflora residente possono diventare agenti causali di batteriemia e sepsi. I microrganismi saprofiti e condizionatamente patogeni possono causare lo sviluppo di shock batterico, che si sviluppa a seguito dell'ingresso simultaneo nel sangue di una quantità significativa di individui microbici e delle loro tossine, o anche solo di tossine microbiche. Lo shock batterico si verifica dopo un'improvvisa insorgenza di batteriemia di massa dovuta a un'infezione focale cronica che ha superato le barriere protettive, un intervento chirurgico sullo sfondo di un focolaio settico. Molto spesso, lo shock batterico si sviluppa durante le manipolazioni del sistema genito-urinario durante il periodo dell'infezione, durante la trasfusione di sangue contaminato da microbi, con infusioni endovenose prolungate di medicinali e sostanze nutritive, con cui i batteri entrano nel flusso sanguigno. I patogeni più comuni dello shock batterico sono E.coli, Ps.aeruginosa, Proteus vulgaris, St.epidermidis, St.aureus, Kl. Pneumoniae, rappresentanti del genere Bacteroides, Cl.perfringens, streptococco emolitico, meningococco, pneumococco.
Lo shock batterico più grave si verifica con un'infezione causata da Pseudomonas, Proteus, Escherichia. Quando il corpo è indebolito (ipotermia, lesioni, esaurimento, ecc.), i microrganismi che sono residenti permanenti delle prime vie respiratorie possono causare varie malattie(bronchiti, polmoniti, ecc.), mentre interessano le basse vie respiratorie. La microflora residente degli organi urogenitali, che comprende St.aureus, St.epidermidis, E.coli, Klebsiella sp., Cl.perfringens, candida, difteroidi, vibrioni, batterioidi, micoplasmi e altri microrganismi, può causare lo sviluppo di vulvite, uretrite, malattia utero, prostata, appendici. Negli ultimi decenni, negli ospedali delle istituzioni mediche, il numero di pazienti in cui i rappresentanti della microflora residente, i patogeni opportunisti spesso richiedono gravi processi infiammatori purulenti, è aumentato in modo significativo. Negli ultimi anni, il numero di pazienti con processi infiammatori purulento nella regione maxillo-facciale è notevolmente aumentato, soprattutto in soggetti con ridotta attività dei fattori di difesa naturale.
Tra i sierotipi enteropatogeni di Escherichia coli, sono stati identificati agenti causali di malattie gastrointestinali nei bovini giovani.
I funghi simili a lieviti del genere Candida sono diffusi in natura e sono abitanti permanenti del tegumento esterno, delle membrane mucose e del tratto gastrointestinale sia dell'uomo che degli animali. Il ruolo eziologico di Candida albikans, C.tropicalis nel verificarsi di aborti in mucche, conigli, gatti, topi, porcellini d'India. Nello studio delle preparazioni istologiche degli organi interessati (reni, milza, polmoni, fegato), si trovano non solo forme simili a lievito, ma anche miceliali del fungo che crescono nei tessuti. Ciò indica lo sviluppo attivo del fungo nel corpo. Le spirochete patogene nei suini adulti causano la leptospirosi e l'E. coli patogeno nei suinetti causa la coli - batteriosi. Spesso le infezioni negli animali sono causate da virus. Le persone, a diretto contatto con animali malati o con vari substrati contaminati da microbi secreti da questi animali, si infettano e si ammalano.
Le infezioni antropozoonotiche più pericolose sono antrace, morva, brucellosi, tubercolosi, peste, tripanosomiasi, rabbia e molti altri.
La ricerca condotta da scienziati di tutti i continenti nel corso di molti decenni ha permesso di comprendere il ruolo dei microrganismi non solo nella circolazione delle sostanze, ma anche nell'insorgenza di malattie infettive nell'uomo, negli animali e nelle piante. Per milioni di anni, macro e microrganismi si sono adattati reciprocamente e sono diventati necessari l'uno all'altro. microbi: i normali abitanti di un organismo animale o vegetale sono diventati compagni integrali del macroorganismo e svolgono un ruolo significativo nella loro vita.
Pseudomonas aeruginosa è un batterio Gram-negativo a forma di bastoncello che è un aerobo obbligatorio. Le dimensioni di questo microrganismo in spessore raggiungono fino a 0,8 micron e in lunghezza fino a 3 micron. Il microrganismo patogeno più mobile che vive nell'ambiente acquatico. Capace a lungo essere e riprodursi con successo in un'atmosfera umida e in acqua. La temperatura adatta allo sviluppo di questo microrganismo è di 37 gradi. Per l'uomo, questo microrganismo è condizionatamente patogeno, poiché non colpisce mai i tessuti sani.
L'epatite E - è stata studiata e descritta per la prima volta nel 1983. È un microrganismo a forma di sfera con un'elica di RNA. L'epatite E si trasmette principalmente attraverso l'acqua sporca, per via oro-fecale. La malattia dell'epatite E è stagionale e si aggrava soprattutto nel periodo autunno-inverno.
Aeromonas spp. - appartiene alla famiglia dei batteri Gram-negativi a forma di bastoncello, in grado di crescere sia in ambiente privo di ossigeno che in ambiente ossigenato. In caso di infezione da questo agente patogeno, si verificano infezioni acute di due tipi: simili al colera, che è accompagnata da diarrea acquosa; un'infezione simile alla dissenteria, che è accompagnata da feci sanguinolente. L'infezione si verifica attraverso l'acqua contaminata, ma a volte viene trasmessa attraverso il cibo. Una persona può essere infettata solo quando ha ferite aperte.
Shigella o Shigella sono batteri aerobi gram-negativi non mobili espressi sotto forma di bastoncello. Possono causare infezioni intestinali nell'uomo. Il nome comune di questa malattia è dissenteria. Si trasmette attraverso acqua contaminata, cibo sporco e oggetti domestici sporchi.
Vibrio cholerae, in traduzione - colera vibrio. Bastoncino Gram-negativo, di piccola taglia, a forma di virgola. Può svilupparsi perfettamente a temperature da 30 a 40 gradi Celsius. Causano una malattia chiamata colera. Puoi essere infettato molto facilmente attraverso la normale acqua potabile, che ha ottenuto questo batterio. Quando si fa il bagno in corpi idrici inquinati e si ingoia quest'acqua, anche la probabilità di infezione è alta.
Yersinia enterocolitica sono batteri gram-negativi che non formano spore. Sono anaerobi. Resistente alle influenze ambientali e può essere conservato a lungo. L'infezione con questo batterio provoca una malattia acuta chiamata yersiniosi negli esseri umani. Danneggiano il tratto gastrointestinale e portano all'intossicazione del corpo, di conseguenza, il sistema muscolo-scheletrico o il fegato possono essere colpiti.
Gli enterovirus sono piccoli virus a forma esaedrica che non hanno un guscio di membrana, contengono una singola elica di RNA e vivono a lungo nelle acque reflue e clorurate. La malattia più grave che gli enterovirus possono causare nell'uomo è la poliomielite.
Salmonella, o salmonella, sono aerobi mobili Gram-negativi. Causano una malattia infettiva chiamata salmonellosi.
Adenovirus - oggi ci sono circa 100 tipi di tali virus, 49 dei quali possono causare malattie nell'uomo. Colpiscono principalmente il sistema respiratorio, gli occhi e i linfonodi. Meno spesso colpisce l'intestino e la vescica.
44. Variabilità fenotipica e genotipica dei procarioti. Il significato delle mutazioni. Prospettive per l'ingegneria genetica.
Concetti generali.
Eredità- la capacità degli organismi viventi di mantenere determinate caratteristiche per molte generazioni. Variabilità- l'acquisizione di nuove caratteristiche che li distinguono dalle altre generazioni sotto l'influenza di fattori ambientali. La scienza che studia l'ereditarietà e la variazione si chiama genetica.
Fenotipo- il complesso generale delle proprietà morfologiche e fisiologiche di ciascun individuo e funge da manifestazione esterna del genotipo.
Genotipoè la quantità totale di geni che una cellula possiede. Definisce un intero gruppo di proprietà di un organismo che sono specifiche di una data specie.
Nel corpo umano vivono circa 500 specie di microrganismi, che costituiscono la sua normale microflora. . Il macroorganismo e la sua microflora in condizioni normali si trovano in uno stato di equilibrio dinamico ( eubiosi), che si è sviluppato nel corso dell'evoluzione.
Sistemi biologici aperti ( biotopi) che comunicano con l'ambiente sono - pelle, parti delle vie respiratorie situate fino alla glottide, cavità orale, tratto gastrointestinale, mucose del gas, uretra anteriore, vagina. Sono colonizzati da microrganismi, tra i quali predominano i batteri. I protozoi e i virus sono rappresentati da un numero molto minore di specie.
Normalmente esente da microrganismi - sangue, liquido cerebrospinale, liquido sinoviale, midollo osseo, cavità addominale, cavità pleurica, utero .
La microflora naturale di qualsiasi biotopo è suddivisa in residente(o permanente) e transitorio(o casuale).
Se costante la microflora contiene rappresentanti specifici di un dato biotopo, quindi casuali composto da individui portati dall'esterno. Quindi, nel tratto gastrointestinale potrebbero esserci microrganismi estranei che sono stati ingeriti con cibo o bevande. La pelle è spesso contaminata da microflora casuale dall'ambiente. Nella trachea, bronchi, polmoni, esofago può essere rilevata anche la microflora transitoria.
Microflora permanente biotopo specifico ha una composizione relativamente stabile. Allo stesso tempo, la composizione e il ruolo fisiologico dei suoi microrganismi costituenti sono tutt'altro che equivalenti. Pertanto, nella microflora permanente si distinguono due frazioni: obbligare e opzionale.
Microflora obbligataè il componente principale di qualsiasi microbiocenosi, contrasta la colonizzazione del biotopo da parte di microrganismi casuali, partecipa ai processi di fermentazione, immunostimolazione, ad es. svolge funzioni protettive e una serie di altre fisiologiche.
Microflora facoltativa costituisce una parte minore degli abitanti permanenti del biotopo. Se la microflora permanente si manifesta principalmente come attività fermentativa (cioè la scomposizione dei carboidrati con la formazione di prodotti acidi), allora la frazione facoltativa è molto attivamente coinvolta nei processi putrefattivi (la scomposizione delle sostanze proteiche con la formazione di prodotti alcalini) .
Animali. Il corpo di un animale più o meno grande rappresenta un intero mondo per microrganismi con molte nicchie ecologiche. In condizioni naturali, il corpo di qualsiasi animale è abitato da molti microrganismi. Tra questi possono esserci forme casuali, ma per molte specie il corpo dell'animale è l'habitat principale o unico per loro. La natura e i meccanismi di interazione tra microrganismi e un macroorganismo sono diversi e svolgono un ruolo decisivo nella vita e nell'evoluzione di molti tipi di microrganismi. Per un animale, i microrganismi sono un importante fattore ecologico che determina molti aspetti dei suoi cambiamenti evolutivi. Dalle posizioni moderne, la microflora normale è considerata come un insieme di microbiocenosi che occupano numerose nicchie ecologiche sulla pelle e sulle mucose di tutte le cavità del corpo aperte all'ambiente esterno. In una parte significativa, la microflora è la stessa in tutti gli animali nei biotopi confrontati, ma vi sono differenze individuali nella composizione della microbiocenosi. L'automicroflora di un animale sano rimane costante ed è mantenuta dall'omeostasi. I tessuti e gli organi che non comunicano con l'ambiente esterno sono sterili. L'organismo e la sua normale microflora costituiscono un unico sistema ecologico: la microflora funge da sorta di "organo extracorporeo" che svolge un ruolo importante nella vita dell'animale. Essendo un fattore biologico di protezione, la normale microflora costituisce la barriera, dopo lo sfondamento della quale si induce l'inclusione di meccanismi di difesa aspecifici.
Antagonismo microrganismi - un tipo di relazione non simbiotica di microrganismi, in cui un ceppo sopprime o rallenta completamente la crescita di un altro. Può essere osservato sia in condizioni naturali che artificiali (laboratorio). I microrganismi-antagonisti possono appartenere a qualsiasi gruppo tassonomico. Di norma, l'antagonismo si verifica quando un microrganismo rilascia sostanze chimiche con proprietà antibiotiche che inibiscono la crescita e l'attività vitale di altri microrganismi. In questo caso, il microrganismo che rilascia la sostanza chimica ottiene un vantaggio competitivo. Sono possibili anche altri meccanismi. L'antagonismo dei microrganismi è diffuso nel suolo, dove c'è una competizione costante per lo spazio ei nutrienti Esempio: soppressione del bacillo della peste con Pseudomonas aeruginosa.
Commensalismo(dal lat. com- "con", "insieme" e mensa- "tavola", "pasto"; letteralmente "a tavola", "alla stessa tavola"; in precedenza - compagnia) - un modo di convivenza (simbiosi) di due tipi diversi organismi viventi, in cui uno dei partner di questo sistema (il commensale) affida all'altro (l'ospite) la regolazione dei suoi rapporti con l'ambiente esterno, ma non entra in stretti rapporti con esso. Esempio: un pesce attaccato a uno squalo.
Alcuni microrganismi sono abitanti permanenti del corpo animale. Altro temporaneo: vieni con acqua, mangime, aria.
M/f pelle. Post-s: stafilococchi, streptococchi, actinomycetes, sarcins, kish-aya e Pseudomonas aeruginosa. bastoni. Dipende dalle condizioni di detenzione.
Respirazione M / f. modi. A un neonato no. Streptococchi, stafilococchi, attinomiceti, micoplasmi, muffe. e tremare. funghi.
M / f stomaco. Scarso a causa del succo gastrico e dell'ambiente acido. Sarcine, batteri lattici, actinomiceti, enterococchi.
Cicatrice M/f. È più ricco per epifite e terreno m/f. Origine biochimica complessa. e microbiolo. processi che coinvolgono i batteri della cellulosa. Batteri putrefattivi e fermentazione.
M/f sottile. Più povero. Enterococchi, acidofili, microbi spore. actina, Escherichia coli.
M / f di spessore. Il più ricco. Enterococchi, staf, strept, lievito, muffe, actina, putrefattivo m/o. Avere perebol-li nelle feci delle riunioni. patogeno. m / o, che può infettare persone sane (convalescenti).
M/f tratto urinario. organi. Nelle persone sane solo nelle aree esterne. stafilococco, streptococco, micrococchi, micobatteri..
Il ruolo di m / f: la formazione dell'attività immunitaria, l'antagonismo del patogeno m / f, influisce sulle funzioni del tubo digerente, tiene conto dei componenti della bile nella circolazione, della rottura delle fibre e di altri componenti del mangime.
La distribuzione è facilitata dalle dimensioni ridotte, dal peso trascurabile, dall'enorme tasso di riproduzione e dalla capacità di adattarsi ai cambiamenti dell'ambiente. ambiente, fattore di temperatura.
In acqua la profondità più popolata 10-100 cm. Sopra sono UFL. Autodepurazione del serbatoio: corrente rapida, UFL, mineralizzazione org. composti da microrganismi, t. Nella vita di tutti i giorni - filtri. Nelle acque pulite predominano i cocchi, nelle acque inquinate - i bacilli. Può essere patogeno: antrace, brucellosi, erisipela, pasteurellosi .. Titolo coli - minimo (GOST 333) V d'acqua in cui si trova 1 Escherichia coli. If-index - il numero di Escherichia coli in 1 litro d'acqua (GOST 2-3).
Aria - ambiente ostile per m / o. Ma una breve permanenza di microrganismi nell'aria è sufficiente per la trasmissione di agenti patogeni dai pazienti. Dipende dalla ventilazione dei locali e dagli standard sanitari e igienici. Saprofiti: micrococchi, bastoncini, muffe e lieviti, attinomiceti. Condizionalmente patogeno: spore fungine. Patogeno: micobatteri, pneumococchi, streptococchi.
Determinazione della microflora di aria e acqua:
1. MCH: Per l'acqua: prelevare un campione d'acqua utilizzando delle bottiglie, effettuare diluizioni di 1:10, 1:100, versare l'MPA, mettere in un termostato per 24 ore a 37 gradi, quindi contare le colonie cresciute. La norma per l'acqua potabile non supera i 100 CFU (unità formanti colonie).
Per l'aria, il metodo di sedimentazione (capsula di Petri con MPA, termostato, conteggio), il metodo di aspirazione utilizzando l'apparato di Krotov (il dispositivo aspira aria, si deposita su una piastra di Petri con un mezzo denso, contando), il metodo di filtrazione, compreso il Metodo Dyakov (l'aria viene fatta passare attraverso l'MPA e le perle di vetro vengono riempite con un mezzo speciale per stafilococchi e streptococchi, contati)
2. Microbi sanitari indicativi: per l'acqua - batteri coliformi comuni (OKB 37 gradi) e termotolleranti (TCB 44 gradi) - batteri del gruppo Escherichia coli (CGB). Il titolo coli e l'indice coli sono anche determinati dai metodi dei filtri a membrana (i filtri a membrana vengono posti su un filtro di amianto Seitz, l'acqua viene filtrata, trasferita a Endo in una capsula di Petri con una pinzetta, incubata, BGKP contato (Gr-, ossidasi-, spore-, lattosio +)), metodo di fermentazione (inoculazione su terreno di Kessler con lattosio, incubazione, trasferimento a Endo, viene calcolato BGKP). Enterococchi - ambiente alcalino-polimixina. cl. Perfringens - Terreno Wilson-Blair, agar solfito di ferro.
Per aria - streptococchi emolitici, stafilococchi (media salina - Chistovich).
3. Microrganismi patogeni.
Intizarov Mikhail Mikhailovich, accademico dell'Accademia russa di scienze agrarie, il prof..
PREFAZIONE
Quando si considerano i modi per combattere molte malattie infettive di eziologia batterica e virale, spesso si concentrano sui microrganismi patogeni - gli agenti causali di queste malattie e meno spesso prestano attenzione alla normale microflora del corpo animale. Ma in alcuni casi, è la normale microflora che acquisisce Grande importanza nell'insorgenza o nello sviluppo della malattia, contribuendo o prevenendone la manifestazione. A volte la solita microflora diventa una fonte di quegli agenti infettivi patogeni o opportunistici che causano infezioni endogene, la manifestazione di infezioni secondarie, ecc. In altre circostanze, il complesso della normale microflora del corpo animale blocca le vie e le possibilità per lo sviluppo di un processo infettivo causato da alcuni microrganismi patogeni. Pertanto, per conoscere la composizione, le proprietà, le caratteristiche quantitative, il significato biologico gruppi diversi e i rappresentanti della normale microflora del corpo (mammiferi, compresi animali domestici, da fattoria e umani) dovrebbero essere medici, biologi, operatori del bestiame, professori universitari e scienziati.
introduzione
La microflora dell'organismo dei mammiferi, compresi gli animali agricoli, domestici e umani, iniziò a essere studiata insieme allo sviluppo della microbiologia come scienza, con l'avvento delle grandi scoperte di L. Pasteur, R. Koch, I. I. Mechnikov, il loro studenti e dipendenti. Così, nel 1885, T. Escherich isolò dalle feci dei bambini un rappresentante obbligatorio della microflora intestinale - Escherichia coli, che si trova in quasi tutti i mammiferi, uccelli, pesci, rettili, anfibi, insetti, ecc. Dopo 7 anni, i primi dati è apparso sull'importanza dei bastoncini intestinali per l'attività vitale, la salute del macroorganismo. S. O. Jensen (1893) lo stabilì tipi diversi e ceppi di Escherichia coli possono essere sia patogeni per gli animali (causando malattie settiche e diarrea nei vitelli) sia non patogeni, cioè abitanti completamente innocui e persino benefici dell'intestino di animali e umani. Nel 1900, G. Tissier scoprì nelle feci dei neonati bifizhbakter "e - lime: e rappresentanti obbligatori della normale microflora intestinale del corpo in tutti i periodi della sua vita. Bastoncini di acido lattico (L. acidophilus) furono isolati da Moreau nel 1900.
Definizioni, terminologia
La microflora normale è una biocenosi aperta di microrganismi presenti in persone e animali sani (V. G. Petrovskaya, O. P. Marko, 1976). Questa biocenosi dovrebbe essere caratteristica di un organismo completamente sano; è fisiologico, cioè aiuta a mantenere lo stato di salute del macroorganismo, la corretta somministrazione delle sue normali funzioni fisiologiche. L'intera microflora del corpo dell'animale può anche essere chiamata automicroflora (secondo il significato della parola "auto"), cioè la microflora di qualsiasi composizione (O.V. Chakhava, 1982) di un determinato organismo in condizioni normali e patologiche.
Microflora normale associata solo a stato di salute organismo, alcuni autori si suddividono in due parti:
1) obbligato, parte permanente, formato nella filogenesi e nell'ontogenesi in il processo di evoluzione, che è anche chiamato indigeno (cioè locale), autoctono (indigeno), residente, ecc.;
2) facoltativo o transitorio.
I microrganismi patogeni che penetrano accidentalmente nel macroorganismo possono essere periodicamente inclusi nella composizione dell'automicroflora.
Composizione delle specie e caratteristiche quantitativemicroflora delle aree più importanti del corpo animale
Di norma, dozzine e centinaia di specie di vari microrganismi sono associate all'organismo animale. Sono , come scrivono V. G. Petrovskaya e O. P. Marko (1976), sono obbligatori per l'organismo nel suo insieme. Molti tipi di microrganismi si trovano in molte aree del corpo, cambiando solo quantitativamente. Sono possibili variazioni quantitative nella stessa microflora a seconda del tipo di mammifero. La maggior parte degli animali è caratterizzata da medie generali per un certo numero di aree del loro corpo. Ad esempio, le parti distali inferiori del tratto gastrointestinale sono caratterizzate dai seguenti gruppi microbici rilevati nel contenuto dell'intestino o nelle feci (Tabella 1).
In cima al tavolo 1. vengono somministrati solo microrganismi anaerobici obbligati - rappresentanti della flora intestinale. È stato ora stabilito che le specie rigorosamente anaerobiche nell'intestino rappresentano il 95-99%, mentre le specie completamente aerobiche e anaerobiche facoltative rappresentano il restante 1-5%.
Nonostante il fatto che decine e centinaia (fino a 400) specie conosciute microrganismi, possono esistere anche microrganismi completamente sconosciuti, per cui negli ultimi decenni nel cieco e nel colon di alcuni roditori si è affermata la presenza dei cosiddetti batteri segmentati filamentosi, che sono molto intimamente associati alla superficie (glycocalix, brush border ) delle cellule epiteliali della mucosa intestinale. L'estremità sottile di questi batteri lunghi e filamentosi è incassata tra i microvilli del bordo a spazzola delle cellule epiteliali e sembra essere fissata lì in modo tale da premere le membrane cellulari. Questi batteri possono essere così numerosi che, come l'erba, coprono la superficie della mucosa. Questi sono anche anaerobi stretti (rappresentanti obbligati della microflora intestinale dei roditori), specie utili per l'organismo, che normalizzano in gran parte le funzioni intestinali. Tuttavia, questi batteri sono stati rilevati solo con metodi batterioscopici (usando la microscopia elettronica a scansione di sezioni della parete intestinale). I batteri filamentosi non crescono su terreni nutritivi a noi noti, possono sopravvivere solo su terreni densi agar per non più di una settimana) J . P. Koopman et. al., 1984).
La distribuzione dei microrganismi nel tratto gastrointestinale
A causa dell'elevata acidità del succo gastrico, lo stomaco contiene un piccolo numero di microrganismi; Questa è principalmente una microflora resistente agli acidi: lattobacilli, streptococchi, lievito, sardine, ecc. Il numero di microbi è di 10 3 / g di contenuto.
Microflora del duodeno e del digiuno
Ci sono microrganismi nel tratto intestinale. Se non fossero in nessun reparto, la peritonite di eziologia microbica non si verificherebbe quando l'intestino fosse ferito. Solo nelle parti prossimali dell'intestino tenue ci sono meno tipi di microflora rispetto all'intestino crasso. Questi sono lattobacilli, enterococchi, sardine, funghi, nelle sezioni inferiori aumenta il numero di bifidobatteri, Escherichia coli. Quantitativamente, questa microflora può differire in individui diversi. È possibile un grado minimo di contaminazione (contenuto di 10 1 - 10 3 / g) e uno significativo - 10 3 - 10 4 / g La quantità e la composizione della microflora dell'intestino crasso sono presentate nella tabella 1.
Microflora cutanea
I principali rappresentanti della microflora cutanea sono difterioish (corinebatteri, batteri propionici), fungo, lievito, bacilli aerobi di spore (bacilli), stafilococchi (predomina principalmente S. epidermidis, ma S. aureus è presente in piccole quantità sulla pelle sana).
La microflora delle vie respiratorie
Sulle mucose delle vie respiratorie, la maggior parte dei microrganismi si trova nel rinofaringe, dietro la laringe il loro numero è molto inferiore, ancor meno nei grandi bronchi e nelle profondità dei polmoni corpo sano nessuna microflora.
Nei passaggi nasali sono presenti difteroidi, principalmente batteri radicali, stafilococchi costanti (S. epidermidis residente), Neisseria, batteri emofili, streptococchi (alfa-emolitici); nel rinofaringe - corinebatteri, streptococchi (S. mitts, S. salivarius, ecc.), stafilococchi, neisseoii, vayloNella, batteri emofili, enterobatteri, batterioidi, funghi, enterococchi, lattobacilli, Pseudomonas aeruginosa, bacilli aerobi di tipo B. subtil sono più transitorio è ecc.
La microflora delle parti più profonde delle vie respiratorie è stata studiata meno (A - Halperin - Scott et al., 1982). Negli esseri umani, ciò è dovuto alle difficoltà nell'ottenere materiale. Negli animali, il materiale è più accessibile per la ricerca (è possibile utilizzare animali uccisi). Abbiamo studiato la microflora del tratto respiratorio medio nei suini sani, inclusa la loro varietà in miniatura (da laboratorio); i risultati sono presentati nella tabella 1. 2.
I primi quattro rappresentanti sono stati rilevati costantemente (100%), sono stati stabiliti meno residenti (1/2-1/3 casi): lattobacilli (10 2 -10 3), E. coli (10 2 -III 3), muffe ( 10 2 -10 4), lievito. Altri autori hanno notato il trasporto transitorio di Proteus, Pseudomonas aeruginosa, Clostridia, rappresentanti di bacilli aerobi. Nello stesso piano, abbiamo identificato una volta Bacteroides melaninoge - nicus.
Microflora del canale del parto dei mammiferi
Ricerca anni recenti, per lo più autori stranieri (Boyd, 1987; A. B. Onderdonk et al., 1986; J. M. Miller et al., 1986; A. N. Masfari et al., 1986; H. Knothe u. a. 1987), hanno dimostrato che la microflora che colonizza (cioè abita) le mucose del canale del parto sono molto diverse e ricche di specie. I componenti della normale microflora sono ampiamente rappresentati; essa contiene molti microrganismi strettamente anaerobici (Tabella 3).
Se confrontiamo le specie microbiche del canale del parto con la microflora di altre aree del corpo, troviamo che la microflora del canale del parto della madre è simile sotto questo aspetto ai principali gruppi di abitanti microbici del corpo. del futuro giovane organismo, cioè i rappresentanti obbligati della sua normale microflora, l'animale riceve quando passa attraverso il canale del parto della madre. Un ulteriore insediamento del corpo di un giovane animale si verifica da questa covata di una microflora evolutivamente sostanziata ottenuta dalla madre. Va notato che in una femmina sana, il feto nell'utero è sterile fino all'inizio del parto.
Tuttavia, la microflora normale dell'organismo animale correttamente formata (selezionata nel processo di evoluzione). in toto abita il suo corpo non subito, ma in pochi giorni, riuscendo a moltiplicarsi in determinate proporzioni. V. Brown fornisce la seguente sequenza della sua formazione nei primi 3 giorni di vita di un neonato: i batteri si trovano nei primissimi campioni prelevati dal corpo di un neonato subito dopo la nascita. Quindi, sulla mucosa nasale, dapprima predominavano gli stafilococchi coagulasi negativi (S. epidermidis); sulla membrana mucosa della faringe - gli stessi stafilococchi e streptococchi, oltre a una piccola quantità di epterobatteri. Nel retto il 1° giorno erano già stati trovati E. coli, enterococchi, gli stessi stafilococchi, e dal terzo giorno dopo la nascita si è instaurata una biocenosi microbica, per lo più normale per la normale microflora dell'intestino crasso (W. Braun, F. Spenckcr u.a., 1987).
Differenze nella microflora del corpo di diverse specie animali
I suddetti rappresentanti obbligati della microflora sono caratteristici della maggior parte dei mammiferi domestici, agricoli e del corpo umano. A seconda del tipo di animale, il numero dei gruppi microbici può cambiare, ma non la composizione delle specie. Nei cani, il numero di Escherichia coli e lattobacilli nell'intestino crasso è lo stesso mostrato in Tabella. 1. Tuttavia, i bifidobatteri erano un ordine di grandezza inferiore (10 8 per 1 g), un ordine di grandezza più alto erano gli streptococchi (S. lactis, S. mitis, enterococchi) e i clostridi. Nei ratti e nei topi (laboratorio), il numero di bacilli dell'acido lattico (lattobacilli) è aumentato della stessa quantità, più streptococchi e clostridi. Questi animali hanno microflora intestinale c'erano pochi Escherichia coli e il numero di bifidobatteri era ridotto. Il numero di Escherichia coli è ridotto anche nelle cavie (secondo V. I. Orlovsky). Nelle feci delle cavie, secondo la nostra ricerca, Escherichia coli era contenuto nell'intervallo di 10 3 -10 4 per 1 g. 2 in 1 g) e lattobacilli.
Nei suini sani (secondo i nostri dati), la microflora della trachea e dei grossi bronchi né quantitativamente né qualitativamente differiva significativamente dagli indicatori medi ed è molto simile alla microflora umana. Anche la loro microflora intestinale era caratterizzata da una certa somiglianza.
La microflora del rumine dei ruminanti è caratterizzata da caratteristiche specifiche. Ciò è in gran parte dovuto alla presenza di batteri - rompifibra. Tuttavia, i batteri cellulolitici (e i batteri fibrolitici in genere), caratteristici del tratto digerente dei ruminanti, non sono affatto simbionti di questi animali soli. Quindi, nel cieco dei maiali e di molti erbivori, tali divisori di fibre di cellulosa ed emicellulosa, comuni ai ruminanti, come Bacteroides succi - nogenes, Ruminococcus flavefaciens, Bacteroides ruminicola e altri svolgono un ruolo importante (V. H. Varel, 1987).
Microflora normale del corpo e microrganismi patogeni
I macroorganismi obbligati, sopra elencati, sono principalmente rappresentanti della microflora pepatogena. Molte delle specie incluse in questi gruppi sono anche dette simbionti del macroorganismo (lattobacilli, bifeldobatteri) e gli sono utili. Alcune funzioni benefiche sono state identificate in molte specie non patogene di clostridi, batteriidi, eubatteri, enterococchi, Escherichia coli non patogeni, ecc. Questi e altri rappresentanti della microflora del corpo sono chiamati microflora "normale". Ma microrganismi meno innocui, opportunistici e altamente patogeni sono inclusi di volta in volta nella microbiocenosi fisiologica di un macroorganismo. In futuro, questi agenti patogeni possono:
a) esistono più o meno per lungo tempo nel corpo
come parte dell'intero complesso della sua automicroflora; in tali casi si forma il trasporto di microbi patogeni, ma quantitativamente, tuttavia, prevale la normale microflora;
b) essere espulso (rapidamente o poco dopo) dal macroorganismo da utili rappresentanti simbionti della normale microflora ed essere eliminato;
c) si moltiplicano spiazzando la normale microflora in modo tale che, con un certo grado di colonizzazione del macroorganismo, possano provocare la malattia corrispondente.
Nell'intestino degli animali e dell'uomo, ad esempio, oltre ad alcuni tipi di clostridi non patogeni, C. perfringens vive in piccolo numero. Come parte dell'intera microflora di un animale sano, la quantità di C. perfringens non supera i 10-15 mln per 1 g Tuttavia, se ci sono determinate condizioni associate, possibilmente, a violazioni microflora normale, il patogeno C. perfrtngens si moltiplica in gran numero sulla mucosa intestinale (10 7 -10 9 o più), causando un'infezione anaerobica. In questo caso, sposta anche la normale microflora e può essere rilevato nella cata scarificata della mucosa ileo in coltura quasi pura. In modo simile, lo sviluppo dell'infezione da coli intestinali si verifica nell'intestino tenue negli animali giovani, solo i tipi patogeni di Escherichia coli si moltiplicano altrettanto rapidamente lì; nel colera la superficie della mucosa intestinale è colonizzata da Vibrio cholerae, ecc.
Ruolo biologico (valore funzionale) della microflora normale
I microrganismi patogeni e condizionatamente patogeni durante la vita di un animale entrano periodicamente in contatto e penetrano nel suo corpo, essendo inclusi nella composizione del complesso generale della microflora. Se questi microrganismi non possono causare immediatamente la malattia, coesistono per qualche tempo con l'altra microflora del corpo, ma sono più spesso transitori. Quindi, per il cavo orale, da microrganismi transitori facoltativi patogeni e opportunistici, P, aeruginosa, C. perfringens, C. albicans, possono essere tipici rappresentanti (dei generi Esoherichia, Klebsiella, Proteus), per gli intestini sono anche enterobatteri più patogeni, nonché B fragilis, C. tetani, C. sporogenes, Fusobacterium necrophorum, alcuni rappresentanti del genere Campylobacter, spirochete intestinali (compresi patogeni, condizionatamente patogeni) e molti altri.La pelle e le mucose sono caratterizzate da S. aureus; per le vie respiratorie - è anche pneumococco, ecc.
Tuttavia, il ruolo e il significato della microflora normale utile e simbiotica del corpo è che non consente facilmente a questi microrganismi patogeni facoltativi transitori di entrare nel suo ambiente, nelle nicchie ecologiche spaziali da esso già occupate. I suddetti rappresentanti della parte autoctona della normale microflora sono stati i primi, anche durante il passaggio del neonato attraverso il canale del parto della madre, a prendere posto sul corpo dell'animale, cioè hanno colonizzato la sua pelle, gastrointestinale e vie respiratorie, genitali e altre aree del corpo.
Meccanismi che impediscono la colonizzazione (insediamento) della microflora patogena del corpo animale
È stato accertato che le popolazioni più numerose della parte autoctona e obbligata della microflora normale occupano luoghi caratteristici dell'intestino, una sorta di territorio del microambiente intestinale (D. Savage, 1970). Abbiamo studiato questa caratteristica ecologica dei bifidobatteri, batterioidi e abbiamo riscontrato che non sono distribuiti uniformemente nel chimo in tutta la cavità del tubo intestinale, ma si diffondono in strisce e strati di muco (mucine) seguendo tutte le curve della superficie della mucosa membrana dell'intestino tenue. In parte, sono adiacenti alla superficie delle cellule epiteliali della mucosa. Poiché i bifidobatteri, i batteriidi e altri colonizzano prima queste sottoregioni del microambiente intestinale, creano ostacoli per molti agenti patogeni che successivamente entrano nell'intestino dall'avvicinarsi e dal fissarsi (adesione) sulla mucosa. E questo è uno dei fattori principali, poiché è stato stabilito che per realizzare la loro patogenicità (la capacità di causare una malattia), eventuali microrganismi patogeni, compresi quelli che causano infezioni intestinali, devono aderire alla superficie delle cellule epiteliali intestinali, quindi moltiplicarsi su di esso o, dopo essere penetrati più in profondità, colonizzare le stesse o vicine sottoregioni, nell'area di cui si sono già formate enormi popolazioni, ad esempio i bifidobatteri. Si scopre che in questo caso la bifidoflora di un organismo sano protegge la mucosa intestinale da alcuni agenti patogeni, limitando il loro accesso alla superficie degli epiteliociti di membrana e ai recettori sulle cellule epiteliali, su cui devono essere fissati i microbi patogeni.
Per molti rappresentanti della parte autoctona della microflora normale, sono noti numerosi altri meccanismi di antagonismo in relazione alla microflora patogena e condizionatamente patogena:
Produzione di acidi grassi volatili a corta catena di atomi di carbonio (sono formati da una parte rigorosamente anaerobica della normale microflora);
Formazione di metaboliti biliari liberi (lattobacilli, bifidobatteri, batterioidi, enterococchi e molti altri possono formarli deconiugando i sali biliari);
Produzione di lisozima (tipico di lattobacilli, bifidobatteri);
Acidificazione dell'ambiente, durante la produzione di acidi organici;
Produzione di colicine e batteriocine (streptococchi, stafilococchi, Escherichia coli, Neisseria, batteri propionici, ecc.);
Sintesi di varie sostanze simili agli antibiotici da parte di molti microrganismi dell'acido lattico - Streptococcus lactis, L. acidofilo, L. fermento, L. brevis, L. helvetico, L. pjantarum, ecc.;
Competizione di microrganismi non patogeni legati a specie patogene con specie patogene per gli stessi recettori sulle cellule del macroorganismo, a cui dovrebbero essere fissati anche i loro parenti patogeni;
Assorbimento da parte di microbi simbionti dalla composizione della normale microflora di alcuni importanti componenti ed elementi delle risorse nutritive (ad esempio il ferro) necessari per la vita dei microbi patogeni.
Molti di questi meccanismi e fattori che esistono nei rappresentanti della microflora del corpo dell'animale, combinati insieme e interagendo, creano una sorta di effetto barriera - un ostacolo alla riproduzione di microrganismi opportunistici e patogeni in determinate aree del corpo dell'animale. La resistenza di un macroorganismo alla colonizzazione da parte di agenti patogeni, creata dalla sua microflora abituale, è chiamata resistenza alla colonizzazione. Questa resistenza alla colonizzazione da parte della microflora patogena è principalmente creata da un complesso di specie utili di microrganismi rigorosamente anaerobici che fanno parte della normale microflora: vari rappresentanti dei generi - Bifidobacterium, Bacteroides, Eubacterium, Fusobacterium, Clostridium (non patogeno), come nonché anaerobi facoltativi, ad esempio il genere Lactobacil-lus, E. coli non patogeni, S. faecalis, S. faecium e altri. È questa parte dei rappresentanti rigorosamente anaerobici della normale microflora del corpo che domina in termini di numero di popolazioni nell'intera microflora intestinale entro il 95-99%. Per questi motivi, la normale microflora del corpo è spesso considerata un fattore aggiuntivo nella resistenza non specifica del corpo di un animale e di un essere umano sani.
È molto importante creare e osservare le condizioni in cui si forma direttamente o indirettamente l'insediamento del neonato con la normale microflora. Specialisti veterinari, operatori amministrativi ed economici, allevatori di bestiame devono preparare adeguatamente le madri al parto, condurre il parto, garantire l'alimentazione del colostro e del latte dei neonati. È necessario trattare con cura lo stato della normale microflora del canale del parto.
I veterinari dovrebbero tenere presente che la normale microflora del canale del parto delle femmine sane è quell'allevamento fisiologico di microrganismi benefici, che determinerà il corretto sviluppo dell'intera microflora del corpo del futuro animale. Se la nascita non è complicata, la microflora non dovrebbe essere disturbata da influenze terapeutiche, preventive e di altro tipo ingiustificate; non introdurre antisettici nel canale del parto senza prove sufficientemente convincenti, utilizzare deliberatamente antibiotici.
concettodidisbatteriosi
Ci sono casi in cui viene violato il rapporto evolutivamente stabilito tra le specie nella microflora normale o cambiano i rapporti quantitativi tra i gruppi più importanti di microrganismi nell'automicroflora del corpo o cambia la qualità degli stessi rappresentanti microbici. In questo caso, si verifica la disbatteriosi. E questo apre la strada a rappresentanti patogeni e opportunisti dell'automicroflora, che possono invadere o moltiplicarsi nel corpo e causare malattie, disfunzioni, ecc. La corretta struttura della normale microflora che si è sviluppata nel processo di evoluzione, il suo stato eubiotico, trattenere la parte opportunistica entro certi limiti automicroflora dell'organismo animale.
Ruolo morfofunzionale e funzione metabolica dell'automicroflora dell'organismo
L'automicroflora agisce sul macroorganismo dopo la sua nascita in modo tale che sotto la sua influenza la struttura e le funzioni di un certo numero di organi a contatto con l'ambiente esterno maturino e si formino. In questo modo i tratti gastrointestinale, respiratorio, urogenitale e altri organi acquisiscono il loro aspetto morfofunzionale in un animale adulto. Nuova zona ragni biologici - la gnotobiologia, che si è sviluppata con successo dai tempi di L. Pasteur, ha permesso di comprendere molto chiaramente che molte caratteristiche immunobiologiche di un organismo animale adulto e normalmente sviluppato si formano sotto l'influenza dell'automicroflora del suo corpo. Gli animali privi di microbi (gnotobioti) ottenuti con taglio cesareo e poi tenuti per lungo tempo in appositi isolatori gnotobibologici sterili senza alcun accesso ad essi di alcuna microflora vitale hanno caratteristiche dello stato embrionale delle mucose che comunicano con l'ambiente esterno del organi. Il loro stato immunobiologico conserva anche le caratteristiche embrionali. Osservare l'ipoplasia del tessuto linfoide al primo posto di questi organi. Gli animali privi di microbi hanno meno elementi cellulari immunocompetenti e immunoglobuline. Tuttavia, è caratteristico che l'organismo di un tale animale gnotobiotico rimane potenzialmente in grado di sviluppare capacità immunobiologiche, e solo per l'assenza di stimoli antigenici che provengono dall'automicroflora negli animali ordinari (a partire dalla nascita), non ha subito un naturale sviluppo che interessa l'intero sistema immunitario in generale e accumuli linfoidi locali delle membrane mucose di organi come l'intestino, le vie respiratorie, l'occhio, il naso, l'orecchio, ecc. Quindi, nel processo sviluppo individuale dell'organismo animale, è dalla sua automicroflora che seguono gli effetti, compresi gli stimoli antigenici, che determinano il normale stato immunomorfofunzionale di un normale animale adulto.
La microflora del corpo animale, in particolare la microflora del tratto gastrointestinale, svolge importanti funzioni metaboliche per l'organismo: influisce sull'assorbimento nell'intestino tenue, i suoi enzimi sono coinvolti nella degradazione e nel metabolismo degli acidi biliari nell'intestino e si forma acidi grassi insoliti nel tratto digestivo. Sotto l'influenza della microflora, c'è un catabolismo di alcuni enzimi digestivi del macroorganismo nell'intestino; enterochinasi, fosfatasi alcalina sono inattivate, si decompongono, alcune immunoglobuline del tubo digerente che hanno svolto la loro funzione si decompongono nell'intestino crasso, ecc. La microflora del tratto gastrointestinale è coinvolta nella sintesi di molte vitamine necessarie per il macroorganismo. I suoi rappresentanti (ad esempio un certo numero di tipi di batterioidi, streptococchi anaerobici, ecc.) Con i loro enzimi sono in grado di abbattere le fibre, le sostanze pectine che sono indigeribili dal corpo animale da sole.
Alcuni metodi per monitorare lo stato della microflora del corpo animale
Il monitoraggio dello stato della microflora in animali specifici o nei loro gruppi consentirà la correzione tempestiva dei cambiamenti indesiderati in un'importante parte autoctona della normale microflora, le violazioni corrette dovute all'introduzione artificiale di rappresentanti batterici benefici, come bifidobatteri o lattobacilli, ecc., e prevenire lo sviluppo di dysbacteriosis in forme molto gravi. Tale controllo è fattibile se, al momento opportuno, vengono effettuati studi microbiologici sulla composizione delle specie e sui rapporti quantitativi, principalmente nella microflora autoctona strettamente anaerobica di alcune aree del corpo dell'animale. Per l'esame batteriologico, il muco viene prelevato dalle mucose, dal contenuto degli organi o persino dal tessuto dell'organo stesso.
Prendere materiale. Per lo studio dell'intestino crasso possono essere utilizzate le feci raccolte appositamente con l'ausilio di tubi sterili - cateteri - o in altri modi in piatti sterili. A volte è necessario assumere il contenuto di diverse parti del tratto gastrointestinale o di altri organi. Ciò è possibile principalmente dopo la macellazione degli animali. In questo modo si può ottenere materiale dal digiuno, dal duodeno, dallo stomaco, ecc. Il prelievo di segmenti dell'intestino insieme al loro contenuto permette di determinare la microflora sia della cavità del canale alimentare che della parete intestinale preparando raschiamenti, omogenati di la mucosa o la parete intestinale. Il prelievo di materiale dagli animali dopo la macellazione consente inoltre di determinare in modo più completo e completo la normale microflora delle vie respiratorie superiori e medie generiche (trachea, bronchi, ecc.).
Ricerca quantitativa. Per determinare le quantità di diversi microrganismi, il materiale prelevato dall'animale in un modo o nell'altro viene utilizzato per prepararne 9-10 diluizioni dieci volte (da 10 1 a 10 10) in una soluzione salina sterile o in parte (corrispondente al tipo di microbi) mezzo nutritivo liquido sterile. Quindi, da ogni diluizione, partendo da meno a più concentrati, vengono seminati sui mezzi nutritivi appropriati.
Poiché i campioni studiati sono substrati biologici con microflora mista, è necessario selezionare i terreni in modo che ciascuno soddisfi le esigenze di crescita del genere o specie microbica desiderati e contemporaneamente inibisca la crescita di altra microflora di accompagnamento. Pertanto, è auspicabile che i media siano selettivi. A seconda del ruolo biologico e del significato nella microflora normale, è più importante la sua parte autoctona strettamente anaerobica. Le tecniche per la sua rilevazione si basano sull'uso di mezzi nutritivi appropriati e metodi speciali di coltivazione anaerobica; la maggior parte dei microrganismi strettamente anaerobici sopra elencati può essere coltivata su un nuovo mezzo nutritivo arricchito e universale n. 105 di A. K. Baltrashevich et al. (1978). Questo terreno ha una composizione complessa e quindi può soddisfare le esigenze di crescita di un'ampia varietà di microflora. La ricetta per questo ambiente si può trovare nel manuale "Fondamenti teorici e pratici della gnotobiologia" (M.: Kolos, 1983). Varie opzioni Questo mezzo (senza l'aggiunta di sangue sterile, con sangue, denso, semiliquido, ecc.) consente di coltivare molte specie anaerobiche obbligate, in anaerobica in miscela gassosa senza ossigeno e anaerobi esterni, utilizzando una versione semiliquida di mezzo n. 105 in provetta.
I bifidobatteri crescono anche su questo terreno se viene aggiunto l'1% di lattosio. Tuttavia, a causa del numero estremamente elevato di componenti non sempre disponibili e della complessa composizione del mezzo n. 105, possono sorgere difficoltà nella sua fabbricazione. Pertanto, è più opportuno utilizzare il mezzo di Blaurock, che non è meno efficace quando si lavora con i bifidobatteri, ma è più semplice e più accessibile da produrre (Goncharova G.I., 1968). La sua composizione e preparazione: brodo di fegato - 1000 ml, agar-agar - 0,75 g, peptone - 10 g, lattosio - 10 g, cistina - 0,1 g, sale da cucina (x / h) - 5 g decotto: 500 g di fresco fegato di manzo tagliato a pezzetti, versare 1 litro di acqua distillata e far bollire per 1 ora; difendere e filtrare attraverso un filtro di garza di cotone, rabboccare con acqua distillata al volume originario. A questo decotto si aggiungono agar-agar fuso, peptone e cistina; impostare pH = 8,1-8,2 con idrossido di sodio al 20% e far bollire per 15 minuti; lasciare riposare 30 min e filtro. Il filtrato viene portato a 1 litro con acqua distillata e ad esso viene aggiunto lattosio. Quindi viene versato in provette da 10-15 ml e sterilizzato con vapore corrente in modo frazionato (Blokhina I.N., Voronin E.S. et al., 1990).'
Per conferire proprietà selettive a questi terreni, è necessario introdurre agenti appropriati che inibiscano la crescita di altra microflora. Per rilevare i batteriidi: questa è la neomicina, la kanamicina; per batteri a spirale (ad esempio spirochete intestinali) - spectinomicina; per i cocchi anaerobici del genere Veillonella - vancomicina. Per isolare bifidobatteri e altri anaerobi gram-positivi da popolazioni miste di microflora, al terreno viene aggiunta sodio azide.
Per determinare il contenuto quantitativo di lattobacilli nel materiale, si consiglia di utilizzare l'agar salino Rogosa. Le proprietà selettive gli vengono conferite dall'aggiunta di acido acetico, che crea un pH = 5,4 in questo mezzo.
Un mezzo non selettivo per i lattobacilli può essere un idrolizzato di latte con gesso: a un litro di latte scremato pastorizzato (pH -7,4-7,6) che non contenga impurità di antibiotici, aggiungere 1 g di polvere di pancreatina e 5 ml di cloroformio; agitare periodicamente; mettere per 72 ore in termostato a 40°C. Quindi filtrare, impostare pH = 7,0-7,2 e sterilizzare a 1 atm. 10 minuti. L'idrolizzato risultante viene diluito con acqua 1:2, si aggiungono 45 g di polvere di gesso termosterilizzata e 1,5-2% di agar-agar, si scalda fino a scioglimento dell'agar e si sterilizza nuovamente in autoclave. Il mezzo è inclinato prima dell'uso. Facoltativamente, qualsiasi agente di selezione può essere aggiunto al supporto.
È possibile identificare e determinare il livello di stafilococchi su un mezzo nutritivo abbastanza semplice: agar carne-peptone sale di glucosio (MPA con 10% di sale e 1-2% di glucosio); enterobatteri - sul terreno Endo e altri terreni, le cui prescrizioni possono essere trovate in tutti i manuali di microbiologia; lievito e funghi - su terreno di Sabouraud. È consigliabile rilevare gli attinomiceti sul mezzo SR-1 di Krasilnikov, costituito da 0,5 fosfato di potassio bibasico. 0,5 g di solfato di magnesio, 0,5 g di cloruro di sodio, 1,0 g di nitrato di potassio, 0,01 g di solfato di ferro, 2 g di carbonato di calcio, 20 g di amido, 15-20 g di agar-agar e fino a 1 litro di distillato acqua. Sciogliere tutti gli ingredienti, mescolare, scaldare fino a scioglimento dell'agar, impostare pH = 7, filtrare, versare in provette, sterilizzare in autoclave a 0,5 atm. 15 minuti, falciare prima della semina.
Per rilevare gli enterococchi, è auspicabile un terreno selettivo (agar-M) in una versione semplificata della seguente composizione: a 1 litro di MPA sterile fuso aggiungere 4 g di fosfato disostituito sciolto in una quantità minima di acqua distillata sterile 400 mg di anche disciolto eide di sodio; 2 g di glucosio disciolto (o soluzione sterile preparata al 40% di glucosio - 5 ml). Sposta tutto. Dopo che la miscela si è raffreddata a circa 50 ° C, aggiungere TTX (2,3,5-trifeniltetrazolio cloruro) - 100 mg sciolti in acqua distillata sterile. Mescolare, non sterilizzare il terreno, versare immediatamente in piastre Petri sterili o provette. Gli Entero cocchi crescono su questo terreno come piccole colonie grigio-bianche. Ma più spesso, a causa della mescolanza di TTX, le colonie di euterococchi acquisiscono un colore ciliegia scuro (l'intera colonia o il suo centro).
I bastoncelli aerobici di spore (B. subtilis e altri) sono facilmente identificabili dopo aver riscaldato il materiale di prova a 80°C per 30 minuti. Quindi il materiale riscaldato viene seminato né con MPA né 1MPB e, dopo la consueta incubazione (37°C con accesso all'ossigeno), la presenza di questi bacilli è determinata dalla loro crescita sulla superficie del terreno sotto forma di un film ( sull'MPB).
Il numero di corinebatteri nei materiali provenienti da diverse aree del corpo dell'animale può essere determinato utilizzando il terreno di Buchin (disponibile in forma pronta presso l'Istituto del Daghestan per i mezzi nutritivi secchi). Può essere arricchito con sangue sterile fino al 5%. La Neisseria viene rilevata sul terreno di Bergea con ristomicina: aggiungere l'1% di maltosio sciolto sterile in acqua distillata a 1 litro di agar Hottinger fuso (MPA meno desiderabile) (10 g di maltosio possono essere sciolti in una quantità minima di acqua e bolliti a bagnomaria ), 15 ml 2% una soluzione di blu acquoso (blu di anilina solubile in acqua), una soluzione di rystomycin da; calcolo 6,25 unità. per 1 ml di mezzo. Mescolare, non sterilizzare, versare in piastre Petri sterili o provette. I cocchi Gram-negativi del genere Neisseria crescono sotto forma di colonie di piccole e medie dimensioni di colore blu o blu. I batteri Hemophilus possono essere isolati su terreno agar cioccolato (da sangue di cavallo) con bacitracina come agente selettivo. .
Metodi per rilevare microrganismi condizionatamente patogeni (Pseudomonas aeruginosa, Proteus, Klebsiella, ecc.). Ben noto o può essere trovato nella maggior parte dei manuali batteriologici.
RIFERIMENTI
Di base
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